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淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化作用的实验研究
目的 观察淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)骨向分化的作用特点.方法 (1)采用机械分离及全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度的淫羊藿苷在第3、6、9、12、15、18、21天对细胞上清液中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,采用茜素红染色法检测各浓度组BMSCs矿化情况,观察不同浓度的淫羊藿苷促BMSCs骨向分化的作用.(2)将BMSCs细胞分为空白对照组、成骨诱导组及淫羊藿苷组(0.5 μg/mL),在培养第7、14、21天检测各组细胞上清ALP活性,并于第14及21天分别检测各组细胞ALP阳性染色率与矿化结节数,同时采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测3个不同时间点各组细胞中核心结合蛋白因子(Runt-related transcripition factor-2,Runx2)及骨钙素(Osteocalcin) mRNA的表达水平.结果 (1) 0.05～5.0 μg/mL淫羊藿苷均可明显提高细胞上清液中ALP活性,其中0.2～2.0 μg/mL浓度组细胞结节数亦明显增加(P＜0.01).(2)淫羊藿苷促BMSCs骨向分化时,Runx2 mRNA表达水平及ALP活性均先升后降;Osteocalcin mRNA表达水平则持续上升(P＜0.01);与成骨诱导组比较,作用14天后,淫羊藿苷组ALP活性及ALP阳性染色率均明显提高(P ＜0.05,P＜0.01).结论 淫羊藿苷通过上调Runx2基因的表达,促使BMSCs向成骨细胞分化,并通过增加细胞ALP分泌及Osteocalcin基因的表达,促进细胞矿化的发生,从而促使新生成骨细胞的成熟.
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淫羊藿苷对骨髓间充质干细胞骨向诱导的实验研究
目的 通过研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和骨向分化能力的影响,并观察其促BMSCs骨向分化过程中对细胞因子转化生长因子β1(TGFβ1)、骨形成蛋白-2(BMP-2)表达的影响,分析可能的作用途径,为阐释其防治骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机理提供实验依据,并为以TGF-β1,、BMP-2作为筛选防治OP药物进行实验研究.方法 以碱性磷酸酶(ALP)等指标确定干预药物不同浓度梯度中佳促BMSCs骨向分化剂量;分组实验,通过检测诱导分化过程中ALP和钙化结节等指标的表达,来观察其对BMSCs骨向分化能力的影响;采用ELISA法检测骨向分化过程中TGF-β1、BMP-2的表达.结果 (1)ICA佳促BMSCs骨向分化浓度为1×10-9mol/L.ICA 10-9组能促进成骨指标的表达和TGF-β1和BMP-2分泌增加;(2)能促BMSCs骨向分化能力的ICA各诱导组均伴随TGF-β1和BMP-2分泌增加.结论 ICA能促进BMSCs骨向分化;在BMSCs骨向分化过程中,上调TGFβ1、BMP-2的表达量可能是各干预药物促进BMSCs骨向分化的作用机制之一.
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离子通道对间充质干细胞增殖、骨向分化的作用
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有向中胚层多向分化的干细胞,其细胞表面的离子通道表达多样,功能复杂.近年来,离子通道对间充质干细胞的功能调节备受关注.越来越.多研究发现离子通道参与各种信号传递,调控细胞功能,如增殖、分化等基因的表达等.本文主要从离子通道表达的角度介绍离子通道在间充质干细胞的增殖、骨向分化中的作用.
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静磁场对骨髓间充质干细胞增殖及骨向分化的影响
目的：研究0.25 T、0.35 T、0.42 T静磁场持续或间歇曝磁对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖及骨向分化的影响。方法全骨髓贴壁筛选法分离MSCs，取第三代MSCs采用强度分别为0.25 T、0.35 T、0.42 T静磁场持续曝磁或间歇曝磁，CCK-8法检测各组细胞增殖活力，并观察0.35 T连续曝磁后MSCs碱性磷酸酶活性、骨钙素含量。结果细胞经过磁场处理后，与对照组相比，细胞增殖活力均降低，连续曝磁第7天效果为显著(P<0.001)，而0.25 T、0.35 T间歇曝磁第2~8天持续表现出显著抑制效应(P<0.001)。0.35 T持续曝磁后，MSCs碱性磷酸酶活性和骨钙素水平均增高(P<0.05)。结论0.25 T、0.35 T、0.42 T静磁场连续曝磁或间歇曝磁均可抑制MSCs增殖，0.35 T连续曝磁能促进MSCs向成骨细胞方向分化。
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GLP-1对 GK 糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化能力的影响
目的：观察胰高血糖素样肽-1（Glucagon-like peptide-1， GLP-1）对Goto-Kakizaki 鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow stromal cell， BMSCs）成骨分化能力的影响，并讨探其可能作用机制。方法贴壁法取8周龄GK鼠BMSCs，逆转录PCR法验证BMSCs表达GLP-1受体，MTT法筛选GLP-1对GK鼠BMSCs的佳刺激浓度，选取该浓度干预GK鼠BMSCs，观察其成骨分化相关指标：第7 d、14 d测定碱性磷酸酶活性，第14d应用实时定量PCR检测ALP、RUNX2、OCN、Smad1、β-catenin、OPG和RANKL的表达。结果1．GK鼠BMSCs中存在GLP-1受体；2.20 nmol／L的GLP-1对细胞刺激作用佳；3．成骨诱导后ALP活性升高。成骨诱导7 d，诱导组和GLP-1干预组的ALP活性相对于对照组均明显升高（ P＜0.05）；成骨诱导14 d，诱导组和GLP-1干预组的ALP活性进一步升高（与自身7d时相比，P＜0.05），且均高于对照组（ P＜0.05）；GLP-1干预组ALP活性在第7d时稍高于诱导组（P＞0.05），第14d时明显高于诱导组（P＜0.05）；4．与正常成骨诱导组相比，GLP-1干预组ALP和RUNX 2表达量均明显增加（P＜0.05），OCN的表达量增加，但无统计学意义。 GLP-1干预组表达Smad1减少（P＞0.05），β-catenin明显增多（P＜0.05）。 GLP-1干预组表达OPG增加（P＞0.05），RANKL减少（P＜0.05），OPG／RANKL升高（P＜0.05）。结论1．GK鼠BMSCs上存在GLP-1受体；2．GLP-1可促进GK鼠BMSCs 向成骨细胞分化，并调节Wnt 通路部分基因的表达及OPG／RANK／RANKL轴的动态平衡。
关键词： 胰高血糖素样肽-1( GLP-1) 骨向分化 信号通路 -
骨髓间充质干细胞在骨向分化的作用及中医药研究进展
目的：骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）是一种具有自我更新、增殖和分化能力的多潜能干细胞，对在骨形成过程中具有的重要作用，并且与中医理论中的“肾精”具有一定的相似性。近年来国内外学者对于 BMSCs 在骨形成中的作用及相关中医基础理论进行了大量研究，本文通过对相关研究的梳理，对BMSCs在骨形成过程中的作用及中医药研究进展作综述。 BMSCs的体外扩增和成骨特性已受关注，可作为骨组织工程的种子细胞具有一定的理论及实践意义，并且中医药对BMSCs成骨诱导的研究已积累一定的经验，可以看出中药诱导BMSCs成骨分化主要集中于补肾药，包括单味补肾药、单味补肾药的有效成分及以补肾药为主要构成的复方，充分阐释了“肾主骨、生髓”理论的科学内涵。
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Leptin对人牙周膜细胞骨向分化作用的实验研究
目的 探讨瘦素( leptin)对人牙周膜细胞增殖和骨向分化的作用.方法 采用酶消化法体外培养人牙周膜细胞,用不同浓度梯度的leptin处理细胞,通过四唑盐(MTT)比色试验和碱性磷酸酶活性测试,检测leptin对细胞体外增殖分化的影响.将人牙周膜细胞与羟基磷灰石/磷酸三钙材料作为复合体,植入BALBc免疫缺陷裸鼠,12周后采用组织学和免疫组化法检测裸鼠体内生成物.结果 体外实验leptin对人牙周膜细胞增殖有明显抑制作用,但leptin能促进人牙周膜细胞碱性磷酸酶的活性表达.体内试验中leptin可提高牙周膜细胞生成类骨质的能力.结论 leptin抑制牙周膜细胞的增殖活性,但可明显促进牙周膜细胞骨向分化.
关键词： 瘦素 牙周膜细胞 增殖 羟基磷灰石/磷酸三钙 骨向分化 -
nHAC/CSH对犬外周血基质细胞骨向分化影响的实验研究
目的:评价可注射纳米羟基磷灰石/半水硫酸钙(nano-hydroxyapatite/collagen/calcium sulphate hemihydrate,nHAC/CSH)植骨材料对犬外周血基质细胞(dog peripheral blood stromal cells,dPBSCs)骨向分化的影响.方法:体外培养犬外周血基质细胞,分别用成骨诱导液和nHAC/CSH浸提后的成骨诱导液培养dPBSCs,检测ALP活性,利用RT-PCR检测成骨基因Runx2、Col Ⅰ、OPN的表达;采用Western Blot检测Runx2、Col Ⅰ、OPN蛋白表达的水平.结果:在各时间点nHAC/CSH浸提液培养的dPBSCs ALP活性(4d:11.801±0.614;7d:20.589±0.693)高于成骨诱导液组(4d:5.048±0.674;7d:7.690±1.852);7天时浸提液组OPN mRNA表达明显高于成骨诱导液组;浸提液组Runx2、OPN蛋白表达的灰度值明显高于成骨诱导液组.结论:nHAC/CSH在一定程度上提高dPBSCs向成骨细胞分化的能力.
关键词： 纳米羟基磷灰石/胶原/硫酸钙 外周血 细胞培养 骨向分化 -
聚二甲基硅氧烷基底弹性对大鼠骨髓间充质干细胞骨向诱导分化的影响
目的 模拟体内组织弹性微环境,构建聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)基底,探究该基底的弹性模量对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSC)成骨分化的影响.方法 通过调节PDMS基底固化剂及预聚物的比例(质量比1:10、1:20、1:35、1:60、1:80)制备5组弹性基底(分别为1:10、1:20、1:35、1:60及1:80组);采用原子力显微镜观察并测量基底表面的弹性模量;rBMSC在不同弹性模量基底上诱导培养7 d后,采用实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹法、免疫荧光染色检测及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase assay,ALP)活性测定等方法检测成骨标志物骨桥蛋白、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、Ⅰ型胶原、骨钙蛋白的蛋白及mRNA表达.结果 PDMS能模拟生物体内不同组织的弹性,经过表面修饰后,rBMSC在其上贴壁良好,形态规则.培养7 d后,不同弹性基底上rBMSC的4种成骨标志物的表达不同,差异有统计学意义(P<0.05).1:20组[弹性模量为(354.1±40.9)kPa],其rBMSC表达的ALP活性显著高于其他4组(P<0.05),其骨桥蛋白、BMP2、Ⅰ型胶原的蛋白表达量(分别为1.80±0.37、1.79±0.28及4.12±0.94),BMP2、骨桥蛋白、Ⅰ型胶原及骨钙蛋白的mRNA表达量(分别为1.30±0.11、1.93±0.29、1.55±0.13及2.56±0.37)均有显著增高的趋势(P<0.05).免疫荧光染色结果显示,Ⅰ型胶原、骨桥蛋白及骨钙蛋白3种成骨标志物在细胞内部呈阳性表达.结论 PDMS可满足弹性基底诱导rBMSC骨向分化实验的要求,可作为良好的可观察的实验基底材料,其基底的弹性模量对rBMSC的骨向分化有明显影响.当PDMS弹性模量在特定范围内时,rBMSC向成骨系方向分化理想.
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牙龈卟啉单胞菌超声提取物对小鼠成骨细胞骨向分化蛋白表达的影响
目的 研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)W83超声提取物对小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1)骨向分化相关蛋白表达的影响,探讨Pg超声提取物对细胞成骨功能的作用.方法 标准厌氧环境下培养PgW83,收集细菌沉淀,离心后制备细菌的超声提取物,然后以0(对照组)、10、100及1000 mg/L的质量浓度加入MC3T3-E1的成骨诱导分化培养基中,培养14 d后提取细胞总蛋白,蛋白质印迹法检测细胞骨钙蛋白、骨涎蛋白、骨桥蛋白及骨粘连蛋白的表达改变,酶标仪法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达；培养21 d后茜素红染色观察MC3T3-E1矿化结节形成情况；以上实验均重复3次,应用SPSS 13.0统计软件对各组结果进行单因素方差分析,检验水准为双侧α =0.05.结果 Pg超声提取物作用于MC3T3E1 14 d后,100 mg/L实验组细胞表达骨粘连蛋白、骨钙蛋白的相对表达量(分别为0.141±0.023、0.625±0.451)均显著低于对照组(均为1.000 ±0.000)和10 mg/L组(分别为1.035 ±0.133、0.852±0.110)；1000 mg/L组细胞表达骨粘连蛋白、骨钙蛋白的相对表达量(分别为0.020±0.003、0.213±0.053)均显著低于对照组、10及100 mg/L组(P＜0.05),Pg超声提取物呈剂量依赖性显著下调骨粘连蛋白和骨钙蛋白的表达.1000 mg/L高浓度时,Pg超声提取物显著下调骨桥蛋白的表达(蛋白相对表达量为0.572±0.162),与对照组、10及100 mg/L实验组相比骨桥蛋白表达(分别为1.000±0.000、1.029±0.135、1.199±0.337)差异均有统计学意义(P＜0.05).Pg超声提取物不改变骨涎蛋白的表达,对照组、10、100及1000 mg/L组间骨涎蛋白的相对表达量(分别为1.000 ±0.000、0.831±0.182、0.897±0.115、0.778±0.235)差异无统计学意义(P＞0.05).Pg超声提取物抑制MC3T3-E1的ALP活性,其抑制作用随各实验组质量浓度的增加逐渐增强,10、100、1000 mg/L质量浓度组ALP活性[分别为(0.0140±0.0011)、(0.0057±0.0013)及(0.0020±0.0008) U/gprot]均显著低于对照组[(0.0275±0.0014) U/gprot](P＜0.05),同时Pg超声提取物作用于MC3T3-E1 21d后能明显抑制MC3T3-E1矿化结节的形成.结论 Pg超声提取物可以下调小鼠成骨细胞骨向分化蛋白的表达,抑制细胞的成骨功能.
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低氧对人牙周膜干细胞骨向分化影响的实验研究
基因,如碱性磷酸酶、骨钙素和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白的表达,从而抑制了人牙周膜干细胞骨向分化.
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低氧对人牙周膜细胞骨向分化能力的影响
目的 研究低氧对人牙周膜细胞(PDLC)的碱性磷酸酶(ALP)活性及成骨相关基因表达的影响.方法 采用组织块法体外分离培养人PDLC;取第3 ～ 5 代细胞分别在常氧和低氧条件下培养后检测其ALP 活性;并通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)观察低氧处理后人PDLC 中成骨相关基因的表达变化.结果 低氧12、24、36、48 h 组ALP 活性均比常氧组高;其中低氧48 h 组与常氧组相比明显升高,差异有统计学意义(P ＜ 0.05);低氧48 h 组ALP mRNA 表达比常氧组高,差异具有统计学意义(P ＜ 0.05);4 个时间点低氧组骨钙蛋白(OCN)mRNA 表达均比常氧组高,且差异有统计学意义(12、36 h:P ＜ 0.05;24、48 h:P ＜ 0.01).结论 低氧增强人PDLC 的ALP 活性,上调ALP mRNA 和OCN mRNA 的表达,促进人PDLC 向成骨细胞分化,同时促进成骨细胞的矿化,提示低氧环境对人PDLC 的骨向分化功能产生一定的影响.
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微重力对成骨细胞及其分化过程的影响
目的综述近年来有关微重力导致骨丢失的新研究进展. 资料来源与选择国内外该领域的相关文献. 资料引用资料引用文献40篇. 资料综合详细描述了微重力对成骨细胞增殖、分化的影响.着重介绍了微重力对骨髓间质干细胞到成熟成骨细胞整个分化过程的影响及其可能机制. 结论微重力不但影响成骨细胞的增殖和活性,也影响骨髓间质干细胞骨向分化过程,导致成熟成骨细胞的数量减少和活性下降,引起空间骨丢失.
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巴戟天多糖含药血清对骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Cbfa-1 mRNA表达的影响
目的 探讨巴戟天多糖含药血清对SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化过程中核心结合因子ɑ-1(Cbfɑ-1)mRNA表达的影响.方法 全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,采用pNPP法检测不同浓度r巴戟天多糖含药血清(高、中、低)对BMSCs碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,并以其佳作用浓度进行后续实验,后续实验分成空白组、成骨诱导组、巴戟天多糖含药血清组、联合组(巴戟天多糖含药血清组+成骨诱导组),各组用药14d,采用RT-PCR技术检测各组BMSCs Cbfa-1 mRNA表达的情况.结果 与对照组比较,不同剂量的巴戟天多糖含药血清均可提高BMSCs分泌ALP(F=126.278,P<0.05),其中高剂量组的作用强度高于其它剂量组;与空白组相比,成骨诱导组、巴戟天多糖含药血清组、联合组均能上调BMSCs中Cbfa-1 mRNA的表达(F=261.412,P<0.05);但与成骨诱导组相比,巴戟天多糖含药血清组不及成骨诱导组,两者差异有统计学意义(t=26.721,P<0.05).结论 巴戟天多糖含药血清能够促进BMSCs向成骨细胞分化,并能上调Cbfa-1 mRNA的表达,但其作用不及成骨诱导强.
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淫羊藿水提取物对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的影响及其机制
目的 观察淫羊藿水提取物对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化能力及转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2 (BMP-2)表达的影响,阐释其防治骨质疏松症的作用机制.方法 全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠MSCs;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定淫羊藿水提取物促MSCs骨向分化的佳质量浓度,并以该质量浓度进行MSCs骨向分化实验.按是否添加经典成骨诱导液将大鼠分为对照组、成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物(500 μg/mL)组、淫羊藿水提取物(500 μg/mL)+成骨诱导剂组,每3～4 d各组更换含相应物质培养液1次,连续干预14d.通过检测各组ALP、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、骨钙素(BGP)和钙化结节等骨向分化指标的变化,以评价淫羊藿水提取物对MSCs骨向分化能力的影响;通过检测TGF-β1、BMP-2的表达,研究淫羊藿水提取物促MSCs骨向分化的作用机制.结果 淫羊藿水提取物佳促MSCs骨向分化的质量浓度为500 μg/mL;成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物组及淫羊藿水提取物十成骨诱导剂组均能促进MSCs骨向分化及上调TGF-β1和BMP-2的表达.结论 淫羊藿促进MSCs骨向分化,上调TGF-β1、BMP-2的表达可能是其作用机制之一.
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高重力对成骨细胞骨向分化功能的影响
[目的]了解力学因素在骨组织重建过程中的作用,探讨高重力对前成骨细胞(mouse embryonic osteoblast precursorcells,MC3T3-E1)成骨功能的影响,为组织工程中研究高重力对骨组织重建的影响提供理论依据.[方法]将MC3T3-E1细胞按不同高重力分为对照组、5G组、10G组、15G组、20 G组,实验组每次加载30 min连续加载3d,对照组同步置于除G值外相同的环境中.ALP活性染色试剂盒检测ALP活性;ALP活性检测试剂盒检测ALP含量;实时定量PCR检测碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(Ⅰ collagen,COL Ⅰ)、骨钙素(osteocalcin,OC)、runt相关转录因子(runt-related transcription factor,RUNX2)的基因表达;western blotting检测COL Ⅰ、OC、RUNX2蛋白表达.[结果]高重力条件下ALP活性显著增高,成骨分化相关指标ALP、COL Ⅰ、OC、RUNX2的基因均显著上调;COL Ⅰ和OC、RUNX2蛋白亦呈现高表达.各实验组细胞茜素红染色未见桔红色结节.[结论]高重力可促进成骨细胞骨向分化相关基因和蛋白表达,有效刺激成骨细胞成熟分化.
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密度梯度离心和贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和成骨功能比较
目的通过比较密度梯度离心和贴壁筛选两种方法所获MSCs的增殖活性和成骨功能,探索骨髓MSCs体外分离和纯化较好的方法,为MSCs进一步的试验研究提供依据.方法应用密度梯度离心和贴壁筛选两种方法分离纯化骨髓MSCs,并通过MTT法检测其增殖活性.用第三代MSCs进行骨向诱导,以观察两种方法所获MSCs是否有相似的骨向分化能力.结果密度梯度离心法所获MSCs纯度高,杂质细胞少,增殖活性强,常表现为梭形和小多角形,7到10天内便可达到融合.而贴壁法所获MSCs纯度低,红细胞、破骨样细胞等杂质细胞较多,增殖速度相对较慢,且经数次传代仍有较多杂质细胞存在.经骨向诱导后,两种方法所获MSCs表现出相似的ALP活性和矿化结节形成能力.矿化结节数目在两组比较无显著性差异(P＞0.05).结论密度梯度离心法是体外分离和纯化骨髓MSCs较好的方法,所获细胞增殖活性高.两种方法所获MSCs具有相似的骨向分化能力.
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淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及骨向分化的影响分析
目的：：探讨并分析淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及骨向分化的影响。方法：体外进行人牙周膜细胞的培养，基于矿化诱导这一条件下，把第三代细胞和六个不同浓度淫羊藿苷进行互相作用，即浓度为零（对照组）、浓度为10mg/L、1mg/L、0.1 mg/L、0.01 mg/L、0.001 mg/L，借助于BSP表达水平、噻唑蓝比色法以及ALP活性测定，就其对于人牙周膜细胞增殖与骨向分化的影响进行分析。结果：作用24个小时后，不同药物浓度都可使人牙周膜细胞增殖；48小时后，淫羊藿苷在1-0.001mg/L区间，对于人牙周膜细胞增殖能力的强化较为显著，在10mg/L时影响较小；72个小时后，淫羊藿苷浓度在0.1-0.001mg/L区间时，增殖能力较为显著；作用72个小时后，浓度在1-0.001mg/L区间的组数推动人牙周膜细胞骨向分化，相对于对照组而言，所存差异具有统计学意义，即P＜0.05，而10mg/L组和对照组之间所存差异不具统计学意义，即P＞0.05。结论：基于一定的浓度范围内，利用淫羊藿苷不仅可以推动人牙周膜细胞的增殖，同时还可进一步推动其骨向分化。
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中西医联合诱导大鼠BMSCs增殖、骨向分化能力的研究
目的:探讨补肾益髓中药含药血清、转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、骨向分化能力的研究.方法:采用全骨髓贴壁法分离及培养大鼠BMSCs.补肾益髓中药含药血清、TGF-β1及BMP-2的制备并确定佳促BMSCs增殖、骨向分化添加浓度.实验分组:空白组、血清组、TGF-β1组、血清+TGF-β1组、BMP-2组、血清+BMP-2组、TGF-β1+BMP-2组、综合诱导组,酶联免疫分析检测Coll、BGP浓度.结果:TGF-β1佳促BMSCs增殖浓度为10 ng/mL,BMP-2佳促BMSCs骨向分化浓度是40 ng/mL;综合诱导组能明显促进大鼠BMSCs的Ⅰ型胶原(Coll)、骨钙素(BGP)的表达量.结论:中西医联合诱导能够显著提高大鼠BMSCs增殖、骨向分化能力.
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干细胞因子促进牙髓干细胞增殖与骨向分化能力
背景:干细胞因子作为对干细胞的增殖分化具有一定促进作用的因子,是否影响牙髓干细胞的生物学特性从而在牙齿再生中发挥重要作用尚不清楚.目的:观察干细胞因子对人牙髓干细胞增殖与骨向分化能力的影响.方法:采用酶消化法培养因正畸需要拔H{的健康人牙的牙髓组织,接种于培养板,加入含1,10 μmol/L干细胞因子的培养液,以正常培养液作为对照.MTT法检测细胞增殖,real-time PCR检测成骨相关基因骨唾液蛋白、骨钙素Mrna的表达,碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性.结果与结论:干细胞因子对牙髓干细胞的增殖具有促进作用,干细胞因子上调了骨唾液蛋白、骨钙素Mrna的表达,增强了牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性,且具有随浓度增加促进作用增强的趋势.提示干细胞因子可以促进人牙髓干细胞的增殖及骨向分化能力.
