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芪丹通脉片联合骨髓间充质干细胞修复损伤内皮细胞Caspase-3、c-IPI-1和c-IPI-2的表达
目的:通过对中药复方芪丹通脉片(QDTMP)逆转内皮细胞损伤的机制做进一步研究,为中药治疗血管疾病提供理论依据,也为干细胞修复研究提供更多的思路.方法:采用全骨髓贴壁法和酶消化法分别分离骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)和人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),采用免疫荧光法对HUVEC鉴定.将HUVEC接种在Tanswell下室,用HCY诱导凋亡,24 h后将MSC接种在Tanswell上室并分别加入不同浓度的含QDTMT血清(0.15%、1.5%、15%),对各组用流式细胞仪观察凋亡情况,采用Western blot 检测caspase-3,c-IPI-1,c-IPI-2的表达.结果:修复干预后的凋亡率有明显下降,Western blot结果显示各修复组活化的caspase-3明显减弱,并且各修复组的c-IPI-1,c-IPI-2的表达增强,其中各种变化都以15%血清组的变化明显.结论:含QDTMP血清联合MSC能通过提高c-IPI-1,c-IPI-2抑制了caspase-3的活化,逆转了由HCY诱导的HUVEC的凋亡.
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PI3K/Akt信号通路介导芪丹通脉片抑制缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡
目的 观察芪丹通脉片对缺血再灌注(MI/R)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其与PI3K/Akt信号通路活化的关系.方法 雄性SD大鼠随机分为4组:(A)假手术组;(B)缺血再灌注组;(C)芪丹通脉片预处理+缺血再灌注组;(D)芪丹通脉片处理组+缺血再灌注+LY294002.大鼠麻醉开胸,结扎冠状动脉前降支40min,再灌注4 h.TUNEL方法定性和定量检测心肌细胞凋亡;Westernblot测定信号蛋白的表达.结果 芪丹通脉片能够抑制心肌细胞的凋亡[(20.3±4.5)%vs(11.6±2.3)%,P＜0.01];并能够增加Akt的磷酸化水平,而这种抗凋亡作用能够被磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidyl inositol 3 kinase PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/theonine kinase,Akt)信号通路阻断剂LY294002所抑制.结论 芪丹通脉片能够抑制缺血再灌注所致的心肌细胞凋亡,这种保护作用与生存信号通路PI3K/Akt的活化所介导.
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芪丹通脉片治疗老年高粘血症临床观察
目的 观察芪丹通脉片治疗老年高粘血症的临床疗效.方法 将确诊的63例老年高粘血症病例随机分为2组,其中试验组32例,给予芪丹通脉片治疗,对照组31例,给予复方丹参片治疗.结果 试验组血流变各项指标均在治疗后明显下降,与治疗前相比,差异有统计学意义(p＜0.05).对照组治疗前后无变化.试验组总有效率为87.50％,对照组为32.26％,2组比较差异有统计学意义(p＜0.05).结论 芪丹通脉片能够改善高粘血症患者的症状及降低血流变的各项指标,是治疗高粘血症的有效药物.
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芪丹通脉片治疗冠心病心绞痛(气虚血瘀证)临床观察
目的观察芪丹通脉片治疗冠心病心绞痛 (气虚血瘀证 )的疗效及安全性.方法采用随机双盲双模拟、阳性药平行对照方法,治疗组予芪丹通脉片、对照组予养心氏片治疗,疗程均为 4周;检测两组治疗前后安全性指标及心电图、心绞痛积分、中医证候积分等疗效指标.结果治疗后两组疗效指标统计无差异,亦未发现不良反应.结论芪丹通脉片治疗冠心病心绞痛 (气虚血瘀证 )安全、有效.
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芪丹通脉片对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生及HIF-1α、VEGF表达的影响
目的 观察芪丹通脉片(QDTMT)对心肌梗死后气虚血瘀证大鼠缺血心肌血管新生的作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响.方法 以结扎SD大鼠左冠状动脉前降支,制备急性心肌梗死模型,随机分为假手术(Sham)组、梗死组(MI)组、MI+芪丹通脉片小剂量(MI+QDTMTL)组和MI+芪丹通脉片大剂量(MI+QDTMTH)组.术后24 h各组均用生理盐水配制成等体积药液灌胃,4周后动态评价各组大鼠气虚血瘀表征变化,采用免疫组化染色方法检测梗死边缘区CD31的表达,测定各组大鼠缺血心肌中新生血管数、微血管密度,于第7日、14日及28日时检测心梗边缘区HIF-1α和VEGFmRNA的表达.结果 (1)Sham组无气虚血瘀证相关表现,而MI组、MI+QDTMTL组和MI+QDTMTH组都有气虚血瘀的相关表现,且MI组表现为明显.(2)MI+QDTMTL组和MI+QDTMTH组CD.的表达较MI组增强,且MI+QDTMTH组高于MI+QDTMTL组.(3)与MI组相比,MI+QDTMTL组和MI+QDTMTH组心梗边缘区新生血管数及微血管密度增加,且MI+QDTMTH组高于MI+QDTMTL组.(4)RT-PCR结果显示,心梗后7d、14d时MI+QDTMTL组和MI+QDTMTH组HIF-1α mRNA及VEGF mRNA相对表达量较MI组增高,28 d时MI+QDTMTL组和MI+QDTMTH组HIF-1α mRNA及VEGF mRNA相对表达量较MI组降低.结论 QDTMT能够改善心梗大鼠气虚血瘀的症状,增加心梗边缘区新生血管数和微血管密度,调控HIF-1α与VEGFmRNA的表达,为心梗后心功能的改善提供了新的治疗思路,其机制可能与活化HIF-1α信号调控HIF-1α mRNA及VEGF mRNA的表达有关.
关键词： 芪丹通脉片 气虚血瘀 血管新生 缺氧细胞诱导因子-1α 血管内皮细胞生长因子 -
芪丹通脉片对缺血再灌注大鼠心电图及心肌中NF-κB表达的影响
目的 探讨益气活血复方芪丹通脉片(QDTMT)对缺血再灌注大鼠心电图及心肌中核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芪丹通脉片低剂量组(0.36g/kg)、芪丹通脉片中剂量组(1.08g/kg)、芪丹通脉片高剂量组(3.24g/kg)及恬尔心组(5mg/kg),各组均用生理盐水配制的等体积药液灌胃,每日1次,共7d.采用冠脉结扎的方法,造成大鼠心肌缺血再灌注模型,记录心电图并采用免疫组化染色法,检测各组大鼠心肌中NF-κB蛋白的表达.结果 QDTMT各剂量组和恬尔心组均能减慢心肌缺血再灌注大鼠的心率,减轻ST段抬高程度.与假手术组比较,模型组NF-κB的表达显著增多(P＜0.01);与模型组比较,QDTMT各剂量组和恬尔心组NF-κB的表达显著减少(P＜0.01).结论 QDTMT能抑制缺血再灌注大鼠心肌中NF-κB蛋白的表达,从而对心肌具有保护作用.
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芪丹通脉片对缺氧大鼠血管内皮生长因子的双向调节作用
目的 探讨活血化瘀复方中药芪丹通脉片(QDTMT)对缺氧模型大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)浓度的影响及其内皮保护作用的相关分子机制.方法 将大鼠随机分为正常对照组、低氧+QDTMT组(QDTMT组)、低氧+生理盐水组(生理盐水对照组),采用低压低氧法建立大鼠缺氧模型,并对肝脏组织进行病理形态学分析;分别于缺氧1周后、缺氧2周后用ELISA试剂盒检测各组大鼠血清中VEGF含量.结果 造模后,QDTMT组病理形态学损伤较轻.缺氧1周后,QDTMT组大鼠血清中VEGF含量明显高于正常对照组和生理盐水对照组;缺氧2周后,QDTMT组大鼠VEGF含量仍高于正常对照组,但明显低于生理盐水对照组.结论 缺氧后QDTMT对VEGF分泌的双向调节作用,可能为其内皮保护机制之一.
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芪丹通脉片对大鼠缺血心肌的血管新生作用与机制研究
目的 观察益气活血复方芪丹通脉片对大鼠缺血心肌的血管新生作用,并探讨其可能机制.方法 复制大鼠急性心肌缺血模型,设生理盐水对照组和芪丹通脉片治疗组,分别于第7、14日取左心室心肌组织,采用N-BT染色法测定心肌梗死区面积,采用免疫荧光和免疫组化法检测心肌微血管密度(MVD)、心肌血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况.结果 治疗组第7、14日心肌梗死面积减少,心肌微血管密度增加,VEGF蛋白表达增加,与对照组存在显著性差异,两组第14日心肌微血管密度和VEGF蛋白表达与第7日比较均有增加,而治疗组明显高于对照组.结论 以益气活血为治疗原则的中药复方芪丹通脉片具有增加急性心肌缺血大鼠心肌微血管密度、减少心肌梗死面积的作用,其作用机制可能与增加心肌VEGF蛋白表达有关.
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芪丹通脉片对缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2与Bax表达的影响
目的 观察芪丹通脉片对缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax表达的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、不同剂量芪丹通脉片组,分组干预7d后,通过结扎冠状动脉左降支40min后再灌注4h成功复制心肌I/RI模型.TUNEL法检测心肌凋亡细胞,免疫组化检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 不同剂量芪丹通脉片(1.08,3.24g/kg)预处理可抑制I/RI中心肌细胞凋亡,其凋亡指数分别为(14.3±3.8)%和(10.6±2.0)%,与模型组(21.3±4.2)%比较均存在显著差异.模型组Bcl-2平均灰度值为(165.17±9.21);不同剂量芪丹通脉片(1.08,3.24g/kg)预处理后缺血/再灌注心肌组织中Bcl-2的平均灰度值分别为(147.82±19.51)和(118.65±16.31),平均灰度较模型组明显降低;模型组Bax平均灰度值为(139.43±11.70),芪丹通脉片(1.08,3.24g/kg)预处理后Bax-2的平均灰度值分别为(151.67±16.69)和(160.71±19.82),二者的灰度值与模型组比较有降低,但无显著差异.结论 芪丹通脉片能抑制缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡,其机制与调节再灌注心肌中Bcl-2、Bax的表达有关.
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芪丹通脉片对脑缺血-再灌注大鼠神经细胞凋亡及Fas-L蛋白表达的影响
目的 观察芪丹通脉片对脑缺血-再灌注大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因Fas-L蛋白表达的影响.方法 采用Longa报道的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型.将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和芪丹通脉片组,并予相应处理以TUNEL法检测各组大鼠脑组织神经细胞凋亡,以免疫组织化学法与医学图像分析结合的方法检测各组大鼠脑组织Fas-L蛋白的表达.结果 与假手术组相比,模型组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达增多;与模型组相比,芪丹通脉片组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达减少.结论 芪丹通脉片可下调Fas-L蛋白的表达,从而抑制脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,这可能是芪丹通脉片对脑缺血再灌注损伤起神经保护作用的机制之一.
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芪丹通脉片对脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究
目的研究芪丹通脉片对脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.将健康雄性 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组、阳性对照尼莫地平组,各组大鼠处死后行 TTC和 HE染色,测定梗死灶体积及观察病理学改变.结果各用药组大鼠缺血侧脑组织梗死灶体积均明显小于模型组,病理改变较模型组减轻,且芪丹通脉片各剂量组之间存在量-效关系.结论芪丹通脉片对脑缺血再灌注损伤有保护作用.
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芪丹通脉片治疗心绞痛的疗效分析
目的:观察芪丹通脉片(QDTMT)治疗冠心病心绞痛的临床疗效.方法:将205例心绞痛患者,随机分为芪丹通脉片组和养心氏组;分别口服芪丹通脉片4片,养心氏片2片,观察患者心绞痛发作次数、疼痛程度、持续时间、硝酸甘油服用量,以及胸闷、心悸、气短、倦怠乏力、自汗等中医症候和心电图的变化.结果:芪丹通脉片组患者心绞痛总有效率为78.6%、显效率35.9%,养心氏组总有效率为71.5%、显效率30.3%,芪丹通脉片组中医证候显效率35.9%、总有效率为91.3%,养心氏组显效率27.5%,总有效率为86.4%,芪丹通脉片组心电图总有效率45.6%、显效率21.4%,养心氏组总有效率34.3%、显效率9.8%;两组心绞痛和中医证候总有效率相比无统计学差异,而芪丹通脉片组心电图总有效率显著高于养心氏组(P<0.05).结论:芪丹通脉片对心绞痛有较好的临床疗效.
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复方中药芪丹通脉片治疗高脂血症的随机对照试验
目的 探讨复方中药芪丹通脉片(QDTMT)治疗高脂血症的临床疗效.方法 以社区高脂血症235例老年人为研究对象,按随机、对照、单盲设计临床试验.将入选对象随机分为QDTMT组、血脂康组和安慰剂组.分别采集研究对象试验前、后外周血并检测血清总胆同醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),分析QDTMT对高脂血症的治疗效果.结果 与安慰组相比,QDTMT、血脂康能降低TC和TG,升高HDL-C含量(均P<0.05);QDTMT与血脂康疗效无显著差异.结论 QDTMT治疗高脂血症有效,其疗效与血脂康无显著差异.
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芪丹通脉片对心肌梗死后大鼠心肌纤维化重构的影响
目的:观察益气活血复方芪丹通脉片(qidan tongmai tablet,QDTMT)对大鼠心肌梗死(MI)后心功能及左心室非梗死区心肌纤维化的影响.方法:以结扎SD大鼠左冠脉前降支法建立MI模型,随机分为假手术(Sham)组、MI组、MI+ QDTMT小剂量(MI-QDTMTL)组和MI+ QDTMT大剂量(MI-QDTMTH)组.术后24 h各组均用生理盐水配制成等体积药液灌胃4周,4周后以多普勒超声评价心脏功能；测定心室的质量/体质量(HW/BW)；以MAS-SON染色检测非梗死区胶原的含量；用RT-PCR法检测非梗死区转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen type 1,Col1)及Ⅲ型胶原蛋白(Collagen type 3,Co13) mRNA的表达水平.采用大鼠羟脯氨酸(HYP)的ELASA试剂盒检测非梗死区中HYP的含量.结果:①术后4周心功能:与MI组比较,MI-QDTMTL组和MI-QDTMTH组左室舒张末期内径(LVEDD)和HW/BW均降低,而射血分数(EF)升高(P＜0.01或P＜0.05)；②非梗死区心肌胶原蛋白的含量:MI-QDTMTL组胶原和MI-QDTMTH组胶原含量均低于MI组(P ＜0.01)；MI-QDTMTH组胶原的含量明显低于MI-QDTMTL组(P＜0.01)；③非梗死区TGF-β1、Col1、Col3 mRNA的表达:与MI组比较,MI-QDTMTL组、MI-QDTMTH组的TGF-β1 Col1、Col3 mRNA均显著降低(P＜0.01或P＜0.05)；MI-QDTMTH组TGF-β1、Col1、Col3mRNA的表达显著低于MI-QDTMTL组(P＜0.05)；④非梗死区HYP的含量:MI-QDTMTL组与MI-QDTMTH组HYP的含量低于MI组(P＜0.05,P＜0.01)；MI-QDTMTH组HYP的含量低于MI-QDTMTL组(P＜0.05).结论:QDTMT通过下调MI交界区TGF-β1、Col1、Col3 mRNA的表达及HYP产生,进而抑制MI后非梗死区反应性胶原的过度沉积,且高剂量组比低剂量组的疗效更好,为防治MI后非梗死区心肌纤维化重构,改善心脏功能提供了新的治疗思路.
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芪丹通脉片保护缺氧内皮细胞的实验研究
目的 观察芪丹通脉片(QDTMT)对缺氧内皮细胞的保护机制.方法 原代培养、鉴定人脐静脉内皮细胞(HuVECs).制备含QDTMT的血清并干预传代的HuVECs.将HuVECs根据不同处理因素随机分为3组:空白对照组、生理盐水组和QDTMT组,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.用免疫荧光染色法检测生理盐水组和QDTMT组细胞上血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的表达.结果 培养的HuVECs中具有特征性的短棒状细胞器Weible-Palade小体.流式细胞仪检测结果显示,与空白对照组相比,缺氧培养的HuVECs的凋亡率增加,但QDTMT组内皮细胞的凋亡率明显低于生理盐水组(P<0.05).免疫荧光染色检测可见QDTMT组内皮细胞VEG-FR2的表达强于生理盐水组.结论 QDTMT抗缺氧的HuVECs凋亡的作用可能与其促进VEGFR2的表达有关.
关键词： 芪丹通脉片 凋亡 脐静脉内皮细胞 血管内皮生长因子受体2 缺氧 -
益气活血复方芪丹通脉片对缺血/再灌注大鼠心肌中NF-κB表达的影响
目的 探讨益气活血复方芪丹通脉片(QDTMT)对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌中核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 将SD大鼠48只随机分为6组(n=8),即假手术组、模型组、QDTMT低中高剂量组(0.36、1.08、3.24g/kg)及恬尔心组(5 ms/kg).各组均用生理盐水配制的等体积药液灌胃7 d,每日1次.采用冠脉结扎的方法,造成大鼠心肌I/R模型后,采用Western blot和免疫组化染色法,检测各组大鼠心肌中NF-κB蛋白的表达.结果 与假手术组比较,模型组NF-κB的表达显著增多(P<0.01).与模型组比较,QDTMT各剂量组和恬尔心组NF-κB的表达显著减少(P<0.01).结论 QDTMT能抑制I/R大鼠心肌中NF-κB蛋白的表达,从而对心肌具有保护作用.
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芪丹通脉片对大鼠缺血/再灌注损伤心肌细胞GLUT4的影响
目的 探讨中药复方芪丹通脉片对大鼠缺血/再灌注损伤(RMMI)心肌细胞葡萄糖转运蛋白(GLUT4)的影响.方法 选用雄性SD大鼠36只,随机分为6组(n=6),即正常组、假手术组、单纯模型组、芪丹通脉片高剂量组和低剂量组、恬尔心组,各组均用生理盐水配制成等体积药液灌胃7 d,每日1次,采用冠脉结扎的方法建立大鼠心肌缺血/再灌注模型,将大鼠冠状动脉左前降支完全闭塞40 min,再灌注4 h后,速取再灌注区心肌组织,用免疫荧光、Western blot方法检测心肌细胞GLUT4的表达.结果 单纯模型组心肌细胞膜GLUT4蛋白明显表达,细胞中总的GLUT4含量较正常组增加;芪丹通脉片高剂量组和恬尔心组心肌细胞膜GLUT4蛋白表达明显增强,细胞中总的GLUT4含量较单纯模型组增加.结论 芪丹通脉片能明显增强RMMI大鼠心肌细胞总GLUT4的表达,并促进其向细胞膜转位,从而起到保护RMMI心肌的作用.
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芪丹通脉片对大鼠心肌缺血/再灌注乳酸脱氢酶及氧自由基的影响
目的 探讨芪丹通脉片对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(RMMI)的防治及其作用机制.方法 选用SD大鼠36只,随机分为6组 (n=6),即假手术组、模型组、芪丹通脉片低剂量组、中剂量组和高剂量组、恬尔心组,用生理盐水配制等体积药液灌胃14 d,1次/d.造成大鼠心肌缺血/再灌注模型,检测各组大鼠乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果 与假手术组比较,模型组大鼠LDH活性、MDA含量显著升高,SOD活性显著下降 (P＜0.05).与模型组比较芪丹通脉片各剂量组、恬尔心组LDH活性、MDA含量显著下降,SOD活力显著上升(P＜0.05).结论 芪丹通脉片对大鼠RMMI有显著的保护作用,可能与其有效地消除或抑制氧自由基的损伤有关.
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芪丹通脉片对实验性急性心肌梗死大鼠左心室功能的影响
目的:探讨预防性芪丹通脉片(QDTMT)对梗死心肌的左室功能保护作用.方法:SD大鼠分为对照组、模型组、QDTMT组.通过结扎冠状动脉左前降支(LAD)复制缺血模型,生理仪记录左室功能.结果:QDTMT能明显降低排血前时间,等容收缩时间,排血前时间/左室射血时间和等容收缩时间/左室射血时间.结论:芪丹通脉片对缺血大鼠左心室功能具有保护作用.
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芪丹通脉片治疗高脂血症效果的临床观察
我们采用随机对照临床试验,对比观察了芪丹通脉片和辛伐他汀治疗高脂血症和伴颈动脉粥样硬化的患者的疗效.1对象和方法1.1对象2010年1月～2011年3月在我院门诊就诊的高脂血症患者100例.纳入标准:均符合1993年卫生部药政局颁布的《新药(中药)临床研究指导原则》中高脂血症的诊断标准:2 ～4周采血2次,两次血清总胆固醇(TC)≥5.98mmol/L,或2.2 mmol/L≤三酰甘油(TG)≤5.5 mmol/L,或高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)男性≤1.04 mmol/L,女性≤1.17 mmol/L.所有病例均经彩色多普勒超声检查确诊为颈动脉粥样硬化斑块形成.排除标准:除外糖尿病、肾病、肝胆和内分泌疾病患者.将纳入对象随机分为2组:试药组和对照组(每组各50例).1.2治疗方法 试药组治疗前停服其它降脂药7d,从第8天开始口服芪丹通脉片(由黄芪、当归、红花、丹参、桂枝等中药组成的复方中药制剂)4片,3次/d;对照组口服辛伐他汀10 mg,1次/d,两组均连用6个月.服药期间避免高脂蛋白饮食.
