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丹参注射液对大鼠下颌骨骨折愈合过程中BMP-2和TGF-β1的影响
目的 探讨丹参注射液对大鼠下颌骨骨折愈合的影响,并通过测量骨形成蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平变化,探讨丹参促进下颌骨骨折愈合的机制.方法 选取SD大鼠48只,通过双侧下颌骨体部造成颊舌侧贯穿不完全性骨折模型,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组24只.实验组每天腹腔注射丹参注射液(1 mL/kg),对照组每天腹腔注射生理盐水.术后第1、2、3、4周,每组分别随机处死6只大鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清BMP-2、TGF-β1的含量.取出双侧下颌骨,右侧下颌骨行X线片检测骨折愈合情况并测量骨痂区的平均骨密度,标本经组织脱钙、石蜡包埋行HE染色后,采用骨组织形态计量学方法分析骨痂区骨小梁面积比、骨小梁宽度;左侧下颌骨骨痂,行组织粉碎,采用RT-qPCR技术检测BMP-2、TGF-β1的表达情况.结果 X线结果显示对照组骨折愈合明显延迟于实验组;从第2周开始,与对照组相比,实验组骨痂骨密度明显增加(P＜ 0.05或P＜0.01),骨痂区骨小梁面积比、骨小梁宽度显著性增大(P＜ 0.05或P＜ 0.01);差异随着愈合时间的延长而显著.ELISA结果显示,术后实验组血清BMP-2、TGF-β1的浓度均高于对照组(P＜0.05).RT-qPCR结果显示,术后第2周开始,实验组骨痂中BMP-2及TGF-β1mRNA的表达均高于对照组(P＜0.01).结论丹参注射液促进下颌骨骨折愈合,可能与促进骨折愈合过程中BMP-2、TGF-β1基因的转录及蛋白表达有关.
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不同辐照时间低强度脉冲超声促进人成骨细胞生物学效应研究
目的 研究低强度脉冲超声(LIPUS)对人成骨细胞FOB1.19生物学效应的影响并明确其适辐照时间.方法 选用频率为1.5 MHz、 强度为30 mW/cm2的LIPUS以不同时间(0、10、20、30、40、50 min)辐照人成骨细胞FOB1.19,以CCK-8法分别检测不同辐照时间并培养24、48、72 h时成骨细胞增殖情况,初步筛选出LIPUS作用于成骨细胞的相对适辐照时间范围;并在此适辐照时间范围内,通过流式细胞仪检测不同辐照时间(20、25、30 min)后培养72 h对细胞周期的影响;通过碱性磷酸酶染色检测不同辐照时间后培养24、72 h对细胞矿化能力的影响,通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测不同辐照时间对细胞内骨形成蛋白(BMP)-2的相对表达量的影响.结果 经过LIPUS辐照后培养不同时间观察到成骨细胞增殖能力相比阴性对照组显著提高,LIPUS辐照时间在20~30 min内为相对适辐照时间范围.细胞周期增殖指数(PI)在每天辐照25 min并培养72 h实验组高于阴性对照组[(0.57±0.01)%vs(0.45±0.02)%],差异有显著统计学意义(P<0.01);碱性磷酸酶阳性率在辐照25 min并培养细胞72 h为明显,实验组高于阴性对照组[(67.05±3.46)%vs(28.37±4.12)%,P<0.01].成骨细胞内BMP-2的相对表达量显著提高,其中以LIPUS辐照25 min、培养72 h时促进人成骨细胞生物学效应为显著,培养72 h实验组BMP-2相对含量高于阴性对照组(4.16±0.13)倍,差异有显著统计学意义(P<0.01).结论 不同辐照时间LIPUS可促进成骨细胞生物学活性,但是其促进成骨细胞的效果不一,其中以辐照时间25 min/d的LIPUS辐照下促进成骨的效果佳.
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痹祺胶囊水提取物促进成骨细胞MC3T3-E1增殖的作用
目的：：研究痹祺胶囊水提取物对成骨细胞 MC3T3-E1的作用及其机制。方法：(1)体外培养成骨细胞MC3T3-E1，分为对照组及痹祺胶囊水提取物(0.125，0.25，0.5，1，2，4 g·L-1)干预组，48 h后，MTT法检测细胞增殖情况(2)培养MC3T3-E1细胞，分为对照组及痹祺胶囊水提取物（0.25，0.5，1 g ·L-1)干预组，48 h后，用RT-PCR 检测骨形成蛋白-2(BMP-2) mRNA，骨钙素（OC）mRNA以及碱性磷酸酶(ALP)mRNA 表达。结果：(1)痹祺胶囊水提取物各干预组MC3T3-E1细胞的OD 值均明显升高，与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。(2)痹祺胶囊水提取物0.5 g·L-1组的BMP-2 mRNA，ALP mRNA和OC mRNA表达均明显增强，痹祺胶囊水提取物0.25 g·L-1组的ALP mRNA和痹祺胶囊水提取物1 g·L-1组的OC mRNA表达也明显增强，与对照组比较均有统计学差异（P<0.05或P <0.01）。结论痹祺胶囊水提取物可促进成骨细胞MC3T3-E1增殖，通过上调BMP-2 mRNA，ALP mRNA和OC mRNA的表达，也可促进成骨细胞的分化功能。
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基于Wnt-β-catenin信号调控BMP-2表达探讨当归四逆汤防治类风湿性关节炎临床研究
目的:通过观察类风湿性关节炎治疗前、后主要症状及血清Wnt3a、β-catenin及BMP-2表达变化,探讨当归四逆汤防治类风湿性关节炎的可能机制及临床效用.方法:采用非劣效设计,随机、对照方法,将60例符合诊断标准、纳入标准及排除标准患者按就诊顺序随机分为两组.治疗组予当归四逆汤加减治疗,对照组予仙灵骨葆胶囊治疗,连续4周.详细记录治疗前后中医临床症状计分变化,应用Real-time PCR技术检测治疗前后血清Wnt3a、β-catenin及BMP-2变化.结果:全部病例完成临床观察,无病例脱落.治疗组显效6例,有效13例,无效11例,总有效率63.33％;对照组显效4例,有效9例,无效17例,总有效率为43.33％.治疗组优于对照组,P＜0.05.治疗前,两组RA患者临床症状计分无差异,具有可比性;治疗后2周及4周,治疗组患者临床症状计分较治疗前比较,有统计学差异,P＜0.05.对照组在治疗后2周与治疗前比较,尽管临床症状计分下降,但无统计学意义,P＞0.05.治疗后4周,对照组临床症状计分较治疗前比较,有统计学差异,P＜0.05.治疗组和对照组在治疗后临床症状计分比较,有统计学差异,P ＜0.05.治疗前,RA患者血清Wnt3a、β-catenin及BMP-2表达均呈上升趋势;治疗后,治疗组RA患者血清Wnt3a、β-catenin及BMP-2表达下降,与治疗前比较,有统计学差异,P ＜0.05.对照组治疗前、后血清Wnt3a、β-catenin及BMP-2无明显变化,P＞0.05.结论:当归四逆汤可能通过下调Wnt3a、β-catenin及BMP-2表达,发挥缓解RA患者关节疼痛、改善关节功能的效用.
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BMP-2和VEGF在乳腺癌的表达及意义
目的 探讨骨形成蛋白-2(BMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌的表达及其与乳腺癌临床病理因素的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测68例乳腺浸润性导管癌组织BMP-2和VEGF的表达情况,应用Western Blot方法检测30例乳腺癌、5例癌旁正常组织中BMP-2和VEGF的表达情况.结果 BMP-2蛋白阳性信号位于乳腺癌细胞浆内,VEGF蛋白主要分布于乳腺癌与正常乳腺上皮细胞的胞浆内.有淋巴结转移的乳腺癌组织BMP-2和VEGF的表达明显高于无淋巴结转移者(P<0.01);且BMP-2和VEGF表达与临床分期有关,与患者年龄、肿瘤大小无明显相关性.Western Blot结果显示BMP-2和VEGF在有淋巴结转移患者中表达高于无淋巴结转移者(P<0.01).结论 BMP-2和VEGF在乳腺癌高表达与乳腺癌的淋巴结转移和临床分期有关.
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老年性骨质疏松患者松质骨中骨形成蛋白-2及骨形成蛋白-7基因表达
目的通过观察老年性骨质疏松患者与正常人松质骨中骨形成蛋白(BMP)2、7mRNA含量的变化,探讨BMP基因表达在老年性骨质疏松症发病机制中的作用。方法共选8例临床病例,根据患者X线表现、桡骨远端骨密度值以及生化指标检测确定为老年性骨质疏松患者。对照组取8例年龄在20～30岁之间的骤然死亡的健康男性股骨头,取各自的股骨头提取RNA,以BMP2、7cDNA为探针进行RNA斑点杂交,根据图像分析结果进行统计处理,比较两组差异。结果临床患病组BMP2、BMP7mRNA含量明显低于对照组。结论老年性骨质疏松症患者松质骨中BMP2及BMP7mRNA表达明显降低,这可能是老年性骨质疏松症发病原因之一。
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骨形成蛋白-2在成釉细胞瘤中表达的研究
目的 探讨成釉细胞瘤(AB)的发病和复发机制.方法 对2004-2006年中国医科大学口腔医学院和沈阳市口腔医院病理科存档的34例病理诊断为AB的蜡块标本(滤泡型AB 18例,丛状型AB 10例,壁性AB 6例)及口腔正常黏膜蜡块标本14例,采用SABC法免疫组化检测BMP-2的表达.胞浆出现棕黄色颗粒为阳性着色.用改良打分法半定量分析BMP-2表达.采用秩和检验比较.结果 AB与正常口腔黏膜的BMP-2表达差异具有统计学意义.滤泡型AB组、丛状型AB组和壁性AB组间差异无统计学意义.结论 BMP-2在AB中有阳性表达.在不同病理类型的AB中,BMP-2的表达差异无统计学意义.BMP-2在AB的发生、发展中起重要作用.
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骨形成蛋白-2在卵巢癌组织中的表达检测及其对卵巢癌细胞增殖影响的研究
目的:探讨骨形成蛋白-2(BMP-2)在卵巢癌上皮性癌(EOC)中的表达检测及对卵巢癌细胞增殖影响的研究.方法:选择该院2007年4月～2010年7月收治的98例卵巢癌患者,提取患者肿瘤细胞后,采用SABC免疫组化方法和RT-PCR技术,检测卵巢上皮性肿瘤和正常卵巢组织中BMP-2蛋白及其mRNA的表达,分析其与卵巢癌细胞增殖及癌细胞组织分级之间的关系.结果:BMP-2蛋白在卵巢癌细胞组织中的阳性表达率为79.59%(78/98),与正常卵巢组织中的阳性表达率30.43%(7/23)比较有统计学差异(P＜0.01);BMP-2蛋白与mRNA在卵巢癌组织高级别组(Ⅲ级、Ⅳ级)中的表达显著性高于低级别组(Ⅰ级,Ⅱ级),表明了随着癌细胞级别的升高,BMP-2的表达也逐渐增强.结论:BMP-2的表达对卵巢上皮性癌细胞增殖具有抑制的作用,同时BMP-2蛋白及其mRNA的异常表达可能与卵巢癌的恶性程度相关,因此可以作为检测肿瘤的一个标志物在临床中应用.
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血清miR-1207-5p和miR-96-5p表达水平与绝经后女性股骨头坏死的关系
目的 探讨绝经后女性股骨头坏死的发生与血清miR-1207-5p和miR-96-5p表达水平的关系.方法 连续选择30例绝经后女性股骨头坏死患者(观察组)和30例绝经后女性健康志愿者(对照组),采用反转录PCR (RT-PCR)法检测外周循环miR-1207-5p和miR-96-5p表达水平,ELISA法检测循环骨形成蛋白(BMP)-2和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平.结果 观察组血清miR-1207-5p表达水平明显高于对照组,miR-96-5p表达水平低于对照组,miR-1207-5p上调率和miR-96-5p下调率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).观察组血清BMP-2和VEGF表达水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-1207-5p和miR-96-5p表达异常可能与绝经后女性股骨头坏死的发生有关,影响BMP-2和VEGF的表达水平可能是其发生机制.
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膝骨关节炎中医证型与血清Wnt-3α、BMP-2及炎性因子的相关性
目的 探讨膝骨关节炎中医证型与血清分泌型糖蛋白Wnt-3α、骨形成蛋白-2(BMP-2)及炎性因子的关系.方法 选取2016年1月-2017年2月在我院治疗的膝骨关节炎患者174例,其中肝肾阴虚患者36例,脾肾阳虚患者52例,气滞血瘀患者44例,风寒湿痹患者42例,采用实时荧光定量PCR检测血清Wnt-3α和BMP-2表达,采用酶联免疫夹心法检测白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP),采用魏氏法检测红细胞沉降率(ESR).结果 风寒湿痹型患者Wnt-3α和BMP-2表达量分别为(1.95±0.64)和(1.82±0.34),明显高于肝肾阴虚型、脾肾阳虚型和气滞血瘀型患者(P＜0.05);风寒湿痹型患者TNF-α表达量为(36.11±8.10) pg/mL,明显高于肝肾阴虚型、脾肾阳虚型和气滞血瘀型患者(P＜0.05);各中医证型IL-6、CRP和ESR比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 风寒湿痹型患者血清Wnt-3α、BMP-2及TNF-α表达明显升高,而肝肾阴虚型、脾肾阳虚型和气滞血瘀型患者各指标无明显差异.
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罗格列酮对OLETF鼠股骨骨密度及骨形成蛋白-2表达的影响
目的 探讨罗格列酮对OLETF鼠股骨骨密度(BMD)及骨形成蛋白-2(BMP-2)表达的影响及机制.方法 OLETF雄性大鼠 20只,定期口服葡萄糖耐量试验(OGTT)监测血糖.喂养至30 w时,共有成模的2型糖尿病(T2DM)OLETF大鼠12只,随机分为罗格列酮组和模型组(每组6只),LETO鼠8只作为对照组,各组均给药12 w.双能X-线骨密度仪(DEXA)测定股骨BMD.股骨经固定、脱钙后,制成切片,光镜观察其病理变化,并运用免疫组化方法对BMP-2表达情况进行检测,应用图像分析软件进行分析.结果 与模型组相比,罗格列酮组股骨BMD及成骨细胞BMP-2阳性表达强度明显降低(P<0.01),对照组BMD及BMP-2阳性表达强度明显升高(P<0.01).结论 2 型糖尿病本身可干扰成骨细胞功能和活性,而罗格列酮对自发肥胖型T2DM大鼠股骨有加重损害作用.
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BMP-2和p21在乳腺癌原发灶及骨转移灶中的表达及意义
目的 检测骨形成蛋白-2(BMP-2)和p21在乳腺癌患者原发灶及骨转移灶中的表达,探讨它们在乳腺癌骨转移发生中的意义.方法 选取临床及病理资料完整的乳腺癌患者126例,其中,至今未发生骨转移者88例,发生骨转移者38例.应用免疫组织化学方法对原发灶及骨转移灶中BMP-2和p21的表达进行测定,并结合患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移状况、临床分期等,探讨它们之间的相互关系.结果 发生骨转移的乳腺癌患者腋窝淋巴结转移率为84.2％( 32/38).临床Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者的骨转移发生率分别为13.2％、34.2％、52.6％.Ⅲ～Ⅳ期与Ⅱ期比较有统计学意义(P＜0.01).乳腺癌组织中BMP-2阳性表达率在合并骨转移和无骨转移组中分别为15.79％和54.5％ (P＜0.01)；在合并有淋巴结转移和无淋巴结转移组中分别为15.2％和58.75％ (P ＜0.01)；而在临床Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌组织中为20.59％,明显低于临床Ⅱ期的BMP-2阳性表达率(66.67％)(P＜0.01).乳腺癌组织p21蛋白阳性表达率在合并骨转移和无骨转移组中分别为18.4％和53.4％ (P ＜0.01)；在合并有淋巴结转移和无淋巴结转移组中分别为34.8％和83.75％ (P＜0.01)；而在临床Ⅲ～Ⅳ期的乳腺癌组织中为23.53％,明显低于临床Ⅱ期的p21阳性表达率(64.58％)(P＜0.01).BMP-2阳性表达率在乳腺癌原发灶中为21.74％ (5/23),而骨转移灶中下降至0(0/23),P＜0.05；虽然p21在乳腺癌骨转移灶中的阳性表达率4.35％ (1/23)也低于乳腺癌原发灶26.09％ (6/23),但无统计学意义.BMP-2及p21与乳腺癌密切相关.结论 乳腺癌发生骨转移的患者腋窝淋巴结转移率高；临床分期越晚,骨转移的发生率越高；BMP-2和p21高表达者淋巴结转移少、发生骨转移的机会较少；而BMP-2和p21的低表达预示具有形成骨转移的潜能.
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骨形成蛋白-2局部基因治疗牙周骨缺损的研究进展
牙周骨缺损是牙周病的严重后果之一,一般自身很难达到完善的修复.骨形成蛋白-2(BMP-2 )作为一种高效诱导成骨因子,有望提高牙周骨缺损的治疗效果.笔者就BMP-2 局部基因治疗在牙周骨缺损方面的基础与应用研究进展做一综述.
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miR-21和miR-155在系统性红斑狼疮患者外周血B细胞中的表达及意义
目的:探讨miR-21和miR-155在系统性红斑狼疮患者外周血B细胞中的表达及意义.方法:将93例系统性红斑狼疮(SLE)患者根据SLEDAL评分分为轻度活动组(n=49)和中重度活动组(n=44),并选择40例健康者作为对照组,采用实时荧光定量PCR技术检测其外周血B细胞中miR-21、miR-155、骨形成蛋白-2(BMP-2)和骨形成蛋白受体Ⅱ (BMPR Ⅱ)的表达.结果:SLE患者外周血B细胞中miR-21和miR-155相对表达量均高于对照组(P＜0.05),中重度活动组患者外周血B细胞中miR-21和miR-155相对表达量均高于轻度活动组和对照组,且轻度活动组高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);SLE患者外周血B细胞中BMP-2 mRNA和BMPRⅡ mRNA相对表达量均高于对照组(P＜0.05),中重度活动组患者外周血B细胞中BMP-2 mRNA和BMPRⅡ mRNA相对表达量均高于轻度活动组和对照组,且轻度活动组高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关分析显示SLE患者外周血B细胞中miR-21和miR-155相对表达量与BMP-2 mRNA和BMPR Ⅱ mRNA均呈正相关(r=0.292、0.365和0.481、0.279,P＜0.05),SLE患者外周血B细胞中miR-21和miR-155相对表达量均与补体C3和补体C4水平呈显著负相关(r=-0.570、-0.289和-0.751、-0.308,P＜0.05).结论:miR-21和miR-155在SLE患者外周血B细胞中呈高表达,可能通过BMP信号通路异常活化而发挥作用,且与补体C3和C4呈负相关,有望作为监控SLE患者病情的参考指标.
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燃煤型氟中毒大鼠骨形成蛋白表达变化研究
目的 复制燃煤型氟中毒大鼠模型,并观察骨形成蛋白-2(BMP-2)和骨形成蛋白-3 (BMP-3)在不同染氟剂量和染氟时间大鼠血清中的表达变化.方法 断乳4周80～ 120 g清洁级SD大鼠120只,按体质量随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,每组30只,雌雄各半.食用病区煤烘玉米,复制燃煤型氟中毒动物模型.对照组、低氟组、中氟组、高氟组的含氟量分别为6.30、9.56、15.89、23.00mg/kg.各组分别于染氟第30、90、180天时股动脉放血法处死10只动物,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清BMP-2和BMP-3水平.结果 ①BMP-2测定结果:染氟第90、180天时,血清BMP-2组间比较差异有统计学意义(F值分别为385.08、173.98,P均＜0.01).其中低氟组、中氟组、高氟组在染氟第90天时[(18.80±0.43)、(22.22±0.85)、(25.14±0.69)μg/L]和第180天[(7.98±0.68)、(8.97±0.78)、(15.04±0.89)μg/L]血清BMP-2表达高于对照组[(12.54±1.29)、(7.53±0.97)μg/L,P均＜0.05],且BMP-2表达随着染氟剂量的增加而增加(P均＜0.05).4组不同染氟时间血清BMP-2组内比较差异有统计学意义(F值分别为55.42、511.58、686.35、671.64,P均＜0.01).其中染氟第90天时,各组血清BMP-2[(12.54±1.29)、(18.80±0.43)、(22.22±0.85)、(25.14±0.69)μg/L]均高于同组染氟第30天时[(11.75±1.15)、(11.42±1.07)、(11.38±0.92)、(11.15±1.03)μg/L,P均＜0.05]；染氟第180天时,各组血清BMP-2[(7.53±0.97)、(7.98±0.68)、(8.97±0.78)、(15.04±0.89)μg/L]均低于同组染氟第90天时(P均＜ 0.05).②BMP-3测定结果:染氟第30、90、180天时,血清BMP-3组间比较差异无统计学意义(F值分别为0.7215、1.2951、0.0964,P均＞0.05).结论 大鼠较长时间摄人过量氟,刺激BMP-2表达增强,但随着摄氟时间延长,氟对BMP-2的表达呈现抑制作用.氟对BMP-3表达的影响不及对BMP-2敏感.
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人骨形成蛋白－2重组腺病毒表达载体的构建
目的构建人骨形成蛋白-2（BMP-2）基因的重组腺病毒表达载体，为应用BMP-2基因治疗的研究奠定基础。方法首先构建携带BMP-2基因的腺病毒穿梭质粒pAdCMV-BMP-2，在脂质体介导下，与腺病毒基因组质粒pJM17共转染293细胞，经同源重组获得重组腺病毒Ad-BMP-2。结果经限制性酶切和PCR扩增鉴定，证实为复制缺陷型BMP-2重组腺病毒。结论成功构建了BMP-2腺病毒表达载体。
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人骨形成蛋白-2基因腺病毒表达载体构建方法的优化
目的:探索采用体外连接技术替代同源重组方法构建Ad-BMP-2,优化腺病毒载体构建方法.方法:将BMP-2基因连接到辅助载体pShuttle2后,以限制性内切酶PI-Sce Ⅰ及Ⅰ-Ceu Ⅰ酶切,获得含启动子Pcmvie的BMP-2基因片段,然后将其连接到经同样双酶切的Adeno-X载体上,获得含BMP-2基因的重组腺病毒载体Ad-BMP-2.将其以限制性内切酶Pac Ⅰ酶切线性化后,转染HEK293细胞,包装重组腺病毒颗粒,并采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定.结果:重组载体pShuttle2-BMP-2及Adneo-BMP-2均采用酶法切及PCR鉴定,鉴定结果均与理论相符.将包装后的重组腺病毒以PCR鉴定,以1%琼脂糖电泳见1.2 kb及287 bP有带,与MBP-2及腺病毒扩增片段大小相符.结论:与传统的同源重组方法相比,体外连接技术方法简单、快捷,并且此方法不需噬斑纯化、筛选方法简便,提高了腺病毒载体构建的效率;同时,Ad-BMP-2的构建成功为后续进行BMP-2基因的治疗研究奠定了坚实的基础.
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骨形成蛋白-2基因促进犬牙周组织再生的体内研究
目的:观察重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)质粒对犬牙周骨缺损再生作用的影响.方法:选用6只成年beagle犬,将其下颌两侧的第2、3、4前磨牙(P2、P3、P4)作为实验牙.在每颗实验牙的近中根颊侧制作"U"型骨缺损,并随机设计为3组,即pIRES-rhBMP-2组、rhBMP-2组(阳性对照组)和PBS组(空白对照组).术后第4与第8周分别处死动物.光镜下观察组织学变化,采用Image-Pro-Express系统测量新生牙槽骨和牙骨质的高度、新生结缔组织的附着量.测量结果以SAS 6.12软件包进行Newman-Keulsq检验.结果:实验第8周时,组织学观察可见2个实验组新生牙槽骨接近于正常骨结构,新生牙周纤维稠密,富含血管;空白对照组胶原纤维稀疏,排列不规则.新生组织测量结果显示:2个实验组新生牙槽骨和牙骨质的高度、新生结缔组织的附着量较空白对照组显著增加(P＜0.05,P＜0.01);但2个实验组间相比无显著性差异(P＞0.05).结论:pIRES-rhBMP-2有较强的骨诱导活性,能有效促进犬牙周骨缺损的组织再生.
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骨形成蛋白-2基因转染对辐射后成骨细胞增殖活性的影响
目的:探讨经过不同剂量X线照射成骨细胞后,感染复数(multiply of infection,MOI)值为100的腺病毒载体介导的骨形成蛋白-2(Ad-hBMP-2)基因转染对成骨细胞增殖能力的影响.方法:通过酶消化法,从Wistar大鼠乳鼠颅骨中获取成骨细胞并传代培养,分别进行0、100、300、500、700、900cGy的X线辐射.更换培养液后,加入Ad-hBMP-2进行转染.常规培养6 d后,首先在倒置显微镜下观察不同辐射剂量条件下转染组与未转染组细胞的形态区别,采用MTT法检测各组细胞的增殖活力,并应用SPSS13.0统计软件包对数据进行t检验.结果:X射线剂量为100cGy时,细胞的增殖活性无明显变化;剂量增至300cGv时,细胞的增殖活性下降;转染Ad-hBMp-2后,增殖活性提高(P＜0.05),经转染后细胞的增殖活性可提高至接近未接受放射线组细胞的水平;放射线剂量增至500cGy时,Ad-hBMP-2可以在一定程度上提高细胞的增殖活性(P＜0.05);当剂量增至700cGy以上时,Ad-hBMP-2对细胞的增殖活性无显著影响(P＞0.05).结论:转染Ad-hBMp-2可以提高低剂量放射线照射后成骨样细胞的增殖能力,但在高剂量放射线条件下,细胞受到损伤,Ad-hBMP-2对细胞生长无影响,增殖能力无法恢复至正常水平.
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颌骨骨肉瘤中BMP-2mRNA的表达及其与淋巴结转移的关系
目的:观察颌骨骨肉瘤(osteosarcoma of the jaw,OSJ)中BMP-2mRNA的表达,并探讨其与淋巴结转移的关系.方法:采用原位杂交方法,对21例OSJ标本进行BMP-2mRNA检测.应用卡方检验,对OSJ中BMP-2mRNA表达与淋巴结转移间的关系作统计分析.结果:21例OSJ中,17例BMP-2mRNA表达阳性(80.95%),包括全部15例成骨细胞型和2例(2/4)成软骨细胞型OSJ.梭形或多边形的肿瘤细胞,细胞质中可见明显的阳性染色.12例出现淋巴结转移的OSJ标本,BMP-2mRNA表达均为阳性,而无BMP-2mRNA表达的OSJ标本中,无1例出现淋巴结转移.淋巴结阳性组,BMP-2 mRNA的阳性表达率为100%;淋巴结阴性组,BMP-2 mRNA的阳性表达率为55.56%,两者差异有统计学意义(P=0.021).结论:BMP-2mRNA主要在成骨细胞型及部分成软骨细胞型OSJ中表达,其表达可能与OSJ的淋巴结转移存在一定关系.
