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河北省沿海地区海产品副溶血弧菌污染状况调查分析
目的:了解河北省沿海地区海产品中副溶血弧菌的污染状况.方法:参照GB4789-2003进行菌株分离,生化鉴定采用API-20E.结果:305份样品检出139株副溶血弧菌,总检出率45.6%,秦皇岛59.8%,唐山51.6%,沧州14.1%;不同样品检出率:贝6L 3%,虾55.4%,鱼23.3%,蟹17.0%.结论:河北省沿海地区海产品副溶血弧菌污染程度秦皇岛和唐山高于沧州;贝、虾类海产品高于鱼和蟹.
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一起由副溶血弧菌和变形杆菌引起食物中毒的实验室检测报告
目的:食物中毒的病原菌检测.方法:采集食物中毒职工的肛拭子24份、剩余食物3份及砧板、刀涂抹物各3份等样品参照GB/T4789-2003[1]、WS/T.9-1996[2]、GB17012-1997[2]进行检测.结果:24份肛拭子检出副溶血弧菌14份占 58.33%、检出奇异变形杆菌13份占 54.17%,其中同时检出副溶血弧菌和奇异变形杆菌7 份占 29.13%, 3份剩余食物有1份检出副溶血弧菌占 33.3%.结论:该次食物中毒是由副溶血弧菌和变形杆菌混合引起的感染.
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副溶血弧菌的分离鉴定与菌株毒力研究
副溶血弧菌(Vibvia Parahaemolyticus，以下简称VP)广泛分布于近海岸的海底及海产品(鱼、虾、贝类、梭子蟹等)中，是一种嗜盐性弧菌，人类摄入了被VP污染的海产品易引起VP性急性胃肠炎，该菌是沿海地区夏秋季引起急性腹泻的重要、常见病原菌之一。
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副溶血性弧菌食源性疾病分离株的血清型、毒力基因及PFGE分析
目的 了解义乌市副溶血性弧菌食源性疾病分离株的主要流行血清型和相关生物学特征.方法 对2011年-2013年食源性疾病事件中检出的副溶血性弧菌,采用血清凝集试验进行血清分型;通过PCR方法对直接耐热溶血素(TDH)的基因(tdh)和耐热直接相关溶血素(TRH)的基因(trh)进行检测;对副溶血性弧菌分离株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型.结果 在检出的46株副溶血性弧菌中,腹泻肛拭来源有44株,O3∶K6型菌株有43株;O4∶KUT型菌株1株.食品留样分离株共2株,2株血清型为O3∶K6.所有分离株tdh均阳性,阳性率100％.所有菌株均未检出trh基因.经脉冲场凝胶电泳分析,46株副溶血性弧菌共得到25个带型.同一起食源性疾病副溶血性弧菌分离株经脉冲场凝胶电泳得到的指纹图谱完全相同.结论 引起义乌市食源性疾病的副溶血性弧菌株,是主要以携带tdh基因的O3∶K6型菌株.PFGE分型能显示菌株间的亲缘关系,为流行病学追踪传染源提供依据.
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海产品中副溶血弧菌三种快速检测方法的比较研究
目的 比较三种方法快速测定海产品中副溶血弧菌的专属性和灵敏度.方法 选取荧光定量PCR、LAMP、显色培养基法分别对阳性对照菌和阴性对照菌共13株进行特异性、灵敏度试验,并对结果进行比较分析.结果 PCR、LAMP法检测副溶血弧菌与显色培养基法相比具有更好的专属性；LAMP法的灵敏度高,菌液浓度为10 cfu/ml时即可检出；PCR法次之,为800 cfu/ml；显色培养基法低,为6500 cfu/ml.结论 三种副溶血弧菌快速检测方法中,PCR、LAMP法具有更好的专属性；LAMP法的灵敏度高,PCR法次之,显色培养基法低.
关键词： 副溶血弧菌 荧光定量PCR 环介导等温扩增(LAMP) 快速检测 -
利用LAMP快速检测145例肠道腹泻病人标本中的副溶血弧菌
目的:将环介导等温扩增技术(loop -mediated isothermal amplification,LAMP)应用于肠道腹泻病人标本的检测,评价其作为快速检测方法的可行性和可靠性.方法:利用LAMP技术对采集的145例肠道腹泻病人进行副溶血弧菌检测,同时以GB/T 4789.7 - 2008中使用的方法进行平行对照实验.结果:用LAMP检测到11例副溶血弧菌阳性标本,与用GB/T 4789.7 - 2008中使用的方法结果一致.结论:LAMP方法应用于副溶血弧菌检验,其特异性强、操作简便快捷、检测成本低.
关键词： 副溶血弧菌 环介导等温扩增技术(LAMP) 快速检测 -
应用筛检方法快速检测小海产品中副溶血性弧菌
目的:研究筛检海产品中副溶血弧菌方法,提高检出率和检测速度.方法:用PCR快速筛检,GB法寻找目标菌,以生化分步筛检作出初步确定,再经系统生化鉴定确认之.结果:356份海产品经筛检检出副溶血弧菌141株,检出率为39.61%,其中PCR一次性检出了141株副溶血性弧菌阳性基因,GB法分离到115株副溶血性弧菌,26株通过二次增菌才分离到,生化筛检与系统特殊化一致率达100%,检出带TDH毒力基因副溶血性弧菌5株,未检出TRH毒力基因.结论:应用发现PCR、GB和典犁生化分步联合的筛检方法,可用于筛检食品中副溶血弧菌,具有快捷、大容量、方便的优点,为进一步开展食品多病原污染物监测工作打下了基础.
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快速LAMP法检测海产品中副溶血弧菌的方法研究
目的:建立LAMP法快速检测海产品中副溶血弧菌的方法.方法:选取副溶血弧菌阳性对照菌和阴性对照菌共13株进行方法的特异性、灵敏度试验,并确定即符合快检要求又有较高检出灵敏度的短培养时间.选取108批海产品,分别用快速LAMP法和国标方法进行测定,对结果进行统计比较分析.结果:快速LAMP法检测副溶血弧菌专属性强,不受其他细菌的干扰;灵敏度高,当菌液浓度为10 cfu/ml时可直接检出,含菌量<1 cfu/ml时,增菌培养4 h后即可检出.108批海产品快速IAMP法的检出率略高于国标法,两种方法无显著性差异.结论:快速LAMP法检测副溶血弧菌准确、灵敏,同时操作简便、检测成本低,可用目测比色判断结果;检测时间短,有望成为快速检测副溶血弧菌的有效手段.
关键词： 副溶血弧菌 快速检测 环介导等温扩增技术(IAMP) -
副溶血弧菌TLH基因检测
目的:对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)临床分离株中不耐热溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)基因进行检测,评价TLH基因在临床检测中的价值,为副溶血弧菌快速检测和新国标方法的建立打下基础.方法:用PCR方法对副溶血弧菌临床分离株的不耐热溶血素(TLH)溶血素基因进行检测.结果:所有副溶血弧菌菌株均可检测到TLH基因.结论:TLH基因在副溶血弧菌的检测中有一定的价值.
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深圳市2007年食物中毒分离副溶血弧菌的实验室分析
目的:分析深圳市2007年食物中毒分离副溶血弧菌血清型,携带毒力基因情况,菌株之间的遗传相关性.方法:对11株副溶血弧菌进行血清学分型,用荧光PCR检测毒力基因tdh,细菌基因组DNA经NotI酶切后进行脉冲场凝胶电泳分析.结果:共有4种血清型,8株菌为血清型O3:K6,所有菌株毒力基因tdh荧光PCR阳性,除两株菌PFGE型相同外,其余菌株有不同的PFGE型.结论:O3:K6血清型菌株是引起副溶血弧菌食物中毒的主要菌型,大部分副溶血弧菌来源分散,实验室分析有助于副溶血弧菌所致食物中毒的预防和控制.
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双重PCR快速检测副溶血弧菌
目的:建立一种快速、敏感、特异的双重PCR方法检测副溶血弧菌.方法:根据GenBank收录的副溶血弧菌tdh、trh、tlh基因序列用vtII软件分别设计引物,应用多重PCR技术同时扩增副溶血弧菌的特异性基因tdh、trh、flh.结果:副溶血弧菌标准株和实验菌株均能扩增一条或两条目的带,扩增产物tdh、trh、tlh片段大小分别为224,466,381 bp.结论:tdh、trh基因分别存在于不同副溶血弧菌株中,而tlh基因在不同副溶血弧菌中都广泛存在,具有种属特异性,因此可以用来特异快速的检测副溶血弧菌.
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副溶血弧菌检测方法的研究进展
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,简称VP)是一种广泛分布于海洋与盐湖中的嗜盐性细菌,海产品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是我国沿海地区食物中毒和夏季腹泻的重要病原.副溶菌致病性源于侵袭性、溶血素和脲酶.
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副溶血性弧菌分子分型和检测研究进展
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种革兰阴性嗜盐杆菌,是引起食源性疾病的重要病原之一[1],可导致患者腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐、发烧等典型胃肠炎反应.
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副溶血弧菌PFGE分型、毒力基因及其耐药性分析
目的:了解通州区副溶血弧菌的分型、毒力基因特点及其耐药性状况.方法:对2009年-2011年103株副溶血弧菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,并应用PCR方法扩增不耐热直接溶血素(TLH)、耐热直接溶血毒素(TDH)、耐热直接溶血毒素相关溶血素(TRH).同时采用微量肉汤稀释法,测定了60株菌株对抗生素的小抑菌浓度.结果:103株副溶血弧菌进行PFGE电泳后共得到39种带型编码.103株菌均含有TLH基因.菌株对阿莫西林、氨苄西林、盘尼西林和多粘菌素4种抗生素的敏感性较低.结论:所有菌株均含有TLH基因.通州区副溶血性弧菌的耐药不严重.菌株耐药与PFGE型别无必然联系.
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不同来源副溶血性弧菌分离株的耐药性和毒力分析
目的:了解广东省副溶血性弧菌水产品分离株与食物中毒分离株携带毒力基因和耐药情况及差异.方法:对132株副溶血性弧菌用纸片扩散法进行耐药检测,对487株副溶血性弧菌以PCR方法进行毒力基因测定.结果:副溶血性弧菌菌株对14种抗生素都有耐药.同时对5种以上抗生素耐药的有60株,占45.5％.多重耐药株的构成比以海虾分离株和食物中毒株为主,占50％.耐药谱分析结果显示,副溶血性弧菌分离株对青霉素类、庆大霉素、连霉素等,普遍有较高的耐药率.487株副溶血性弧菌的tdh和trh基因检测,食品分离株毒力基因的携带率明显低于食物中毒分离株.而食物中毒分离株中以携带tdh基因为多,占93.75％.结论:为防止超级耐药株的产生,应尽快立法加强对兽药使用的监控.复合PCR基因检测能缩短检测周期,有应用前景.
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散发肠道腹泻病人中副溶血弧菌表型及基因型特征分析
目的 分析广州市海珠区散发腹泻病人中副溶血弧菌临床分离株的表型及基因型特征,对缺乏聚集性信息的病例开展实验室分析.方法 进行表型鉴定,同时进行毒力基因分析及PFGE分子分型.结果 广州市海珠区腹泻病人中存在两种血清型:O3:K6(90.9％)和O1:KUT(9.09％,尿酶阳性);所有菌株至少对8种抗生素敏感,对氨苄西林耐药;毒力基因检测:tlh+,tdh+,trh-(81.81％),tlh+,tdh+,trh+(9.09％),tlh+,tdh-,trh-(9.09％);11株均不携带blaTEM基因;分为4种PFGE型别,分属于3个克隆群.结论 海珠区腹泻病人中潜在流行的血清型是O3:K6,主要携带tdh基因,少数携带trh基因,PFGE图谱显示,该区域散发腹泻病人中副溶血弧菌有63.6％来自同一克隆起源.
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一起由副溶血弧菌引起的食物中毒的实验室检测
目的:对一起可疑食物中毒的病原菌相关实验室检测.方法:参照GB/T7489、WS/T.9-1996对食物中毒患者肛拭子进行致病菌检测,并对分离的可疑致病菌进行毒力基因检测、随机扩增多态性分析(RAPD)和药敏试验.结果:11份患者肛拭标本中,8份(占72.7%)分离出副溶血弧菌,血清分型均为03:K6;毒力基因检测为tdh阳性,trh阴性;RAPD结果显示,8株副溶血弧菌具有相似的RAPD图谱.结论:结合流行病学资料、可疑致病菌检测、毒力基因检测及随机扩增多态性分析结果,证实该起食物中毒是由副溶血弧菌引起,致病毒素主要为tdh编码的TDH.
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一起由两种致病菌引起的食物中毒
2005年8月28日,九江市某酒店发生了一起食物中毒,经流行病学调查、实验室检查证实为致病性大肠埃希菌和副溶血弧菌引起,调查分析结果如下:
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奇异变形杆菌、副溶血弧菌混合感染引起的食物中毒的调查分析
2005年5月1日中午,北京市某海鲜大酒楼举行婚宴,后发生了集体食物中毒事件.经流行病学调查、临床资料分析、实验室检验,证实是一起由奇异变形杆菌、副溶血弧菌混合感染引起的食物中毒.现将调查分析和检验结果报告如下.
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一起由副溶血弧菌引起的食物中毒事故调查分析
2003年7月26日上午9时,青岛市卫生局卫生监督所值班室接到某医院举报:某旅行社有20多名客人发生可疑食物中毒.接到报告后,市卫生局监督所立即派卫生监督员及实验室检验人员前往该医院及客人就餐的甲、乙酒店进行调查.经过现场流行病学调查和实验室诊断确诊,是一起由副溶血弧菌引起的游客集体食物中毒事故,现将有关情况分析如下:
