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乙醇-硫酸铵双水相体系与微波集成提取石榴皮多酚的实验研究
利用乙醇-硫酸铵双水相体系与微波集成法对石榴皮多酚进行提取分离,通过单因素实验与正交实验得出提取石榴皮多酚的佳条件为:料-醇-水之比为1:12:20,硫酸铵用量为0.325g/ml,微波处理温度为55℃,微波处理时间为60 s,粗多酚提取率为18.33%,初提物中多酚含量为75.36%.
关键词： 乙醇-硫酸铵双水相体系 微波处理 石榴皮多酚 -
石榴皮多酚凝胶的制备及质量控制
目的:制备石榴皮多酚凝胶,建立其质量控制方法并考察其经皮渗透性.方法:以卡波姆-940为基质,甘油为润湿剂,氮酮为透皮吸收促进剂,山梨酸钾为防腐剂,三乙醇胺为中和剂,制备凝胶剂;采用紫外分光光度法测定石榴皮多酚凝胶中总多酚含量,并做小鼠离体皮肤经皮渗透试验.结果:凝胶制备工艺可行;没食子酸在0.024 5～0.245 0 g·L(-1)线性关系良好(r=0.999 6);平均回收率99.56%,RSD 0.58%.没食子酸24 h皮肤透过率为36.95%.结论:石榴皮多酚凝胶的制备方法简单,质量控制方法可靠,且有良好的渗透性.
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石榴皮多酚对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响
[目的]研究石榴皮多酚对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响.[方法]四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测石榴皮多酚对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制作用；流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡.[结果]石榴皮多酚对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖有抑制作用,且呈现浓度和时间依赖性；石榴皮多酚能诱导MDA-MB-231细胞凋亡,使癌细胞周期被阻滞在G2-M期.[结论]石榴皮多酚可抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,诱导癌细胞凋亡,并阻滞癌细胞在G2-M期.
关键词： 石榴皮多酚 乳腺癌 凋亡 MDA-MB-231细胞 -
石榴皮多酚凝胶促进大鼠急性皮肤创伤愈合作用的研究
目的 观察石榴皮多酚凝胶对急性皮肤创伤模型大鼠的影响.方法 在正常大鼠背部皮肤脱毛区域造成单纯性创伤和细菌感染性两种创伤模型,创面外涂石榴皮多酚凝胶,观察创面愈合情况.结果 石榴皮多酚凝胶可使创伤大鼠愈合时间明显缩短；观察期内,创伤完全愈合的动物数明显增加.结论 石榴皮多酚凝胶具有促进大鼠急性皮肤创伤愈合的作用.
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束缚-浸水应激对石榴皮多酚在大鼠主要器官内分布的影响
目的 观察束缚-浸水应激(RWIS)对石榴皮多酚在大鼠主要器官内分布的影响.方法 利用FeCl3与多酚反应显色、与梯度多酚构成色阶,比色法检测多酚在器官内的含量.Wistar雄性大鼠250 ～ 300 g,灌胃给药,随机分为对照Ⅰ组(2 ml去离子水+应激,n=5)；对照Ⅱ组(500 mg/ml石榴皮水提物、未应激)和实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(分别为5,50,500 mg/ml石榴皮水提物+应激)3个剂量组.给药1h后行RWIS 3 h.过量麻醉处死动物后,心脏灌流除血,取脑、心、胃、肺、肝、肾、回肠、结肠匀浆,离心,取上清液与FeCl3反应.结果 检测石榴皮多酚的佳FeCl3浓度为9％.呈色反应的石榴皮水提物浓度为0.2～0.5 mg/ml.在大鼠的脑、心、肺、肝、肾上清液中未观察到呈色反应.实验Ⅲ组胃、结肠上清液与FeCl3反应阳性；而对照Ⅱ组的回肠、结肠也呈阳性,且高于实验Ⅲ组.结论 9％ FeCl3可检测出0.2～0.5 mg/ml石榴皮水提物中的多酚.石榴皮多酚在胃肠壁中分布多于其它器官组织.RWIS使大鼠胃壁中石榴皮多酚含量增多,回肠和结肠壁内含量减少.
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不同方法提取石榴皮多酚得率的研究
目的:研究不同方法提取的石榴皮多酚得率.方法:用酒石酸亚铁比色法测定微波处理乙醇-硫酸铵双水相体系及丙醇-硫酸铵双水相体系、电磁搅拌丙醇-硫酸铵双水相体系、乙醇-硫酸铵双水相体系和乙醇水溶液单相体系浸取等方法得到的石榴皮醇层提取液、水层提取液中石榴皮多酚的浓度,计算出多酚得率.结果:微波处理乙醇-硫酸铵双水相体系和乙醇-硫酸铵双水相体系浸取的石榴皮醇层液浓度及多酚得率、多酚总得率较高.结论:微波处理乙醇-硫酸铵双水相体系提取石榴皮多酚得率较高.
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石榴皮多酚对痤疮丙酸杆菌体外抑菌活性的研究
目的 研究石榴皮多酚对痤疮主要致病菌——痤疮丙酸杆菌的抑制作用. 方法 首先用生长抑制试验(牛津杯法)确定石榴皮多酚醇提物对痤疮丙酸杆菌是否存在抑制作用,然后通过药基琼脂稀释法观察它对痤疮丙酸杆菌的MIC来评价该药物对所测细菌的抑制作用. 结果 石榴皮多酚醇提物500、300、100 mg/mL对痤疮丙酸杆菌ATCC11827具有较强的抑菌活性,其对痤疮丙酸杆菌的MIC为20 mg/mL. 结论 石榴皮多酚醇提物在体外具有明确的抑制痤疮丙酸杆菌活性的作用.
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石榴皮多酚对大鼠应激性胃溃疡的保护作用及与Gli1-Gli2-Sufu信号通路和细胞因子水平改变的关系
目的 探讨石榴皮多酚对大鼠应激性胃溃疡的保护作用及与Gli1-Gli2-Sufu信号通路和细胞因子水平改变的关系.方法 选取50只7周龄健康SD雄性大鼠为受试对象,按随机数字表法分为空白对照组、应激性胃溃疡组(模型组)、奥美拉唑+应激性胃溃疡模型组(阳性对照组)、石榴皮多酚组和应激性胃溃疡模型+石榴皮多酚组,每组10只.分别比较各组大鼠胃液pH值和黏膜损伤指数;采用ELISA法测定前列腺素E2 (PGE2)、促肾上腺皮质激素(ATCH)和皮质酮(CORT)的含量,应用化学比色法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD);采用qPCR和Western blot法测定各组大鼠胃组织Gli1、Gli2和Sufu的mRNA和蛋白表达水平;免疫共沉淀法观察大鼠胃组织Gli2和Sufu蛋白复合物的形成情况.结果 与空白对照组比较,模型组大鼠的损伤指数、MDA、ACTH和CORT的含量明显升高,pH值、SOD和PGE2水平显著下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);但阳性对照组和石榴皮多酚+模型组的上述各项指标均较模型组明显改善(P＜0.05);模型组大鼠胃组织的Gli1、Gli2和Sufu的mRNA和蛋白表达均较空白对照组明显升高(P＜0.05);而阳性对照组和石榴皮多酚+模型组的Gli1、Gli2和Sufu的mRNA和蛋白表达水平较模型组却明显降低(P＜0.05);模型组大鼠Gli2和Sufu蛋白复合物水平较空白对照组显著增多,而阳性对照组和石榴皮多酚+模型组的Gli2和Sufu蛋白复合物水平则较模型组明显降低(P＜0.05).结论 石榴皮多酚对大鼠应激性胃溃疡的保护作用可能与Gli1-Gli2-Sufu信号通路活化和MDA、ACTH、CORT、SOD和PGE2等细胞因子水平改变有关.
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新疆石榴皮多酚对实验性结肠炎的药效学研究
目的:研究石榴皮多酚提取物(PPPE)对实验性结肠炎的功效及其机制.方法:三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠建立KM小鼠溃疡性结肠炎模型,i.g给药15 d,观察评价疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)、肠重指数(IWI),脾脏指数(SI)、胸腺指数(THI)、结肠、脾脏组织病理学变化,检测血清溶血素(SH)、结肠组织白介素IL-4、IL-17水平.结果:经PPPE干预后结肠病理状况明显改善,脾脏白髓萎缩状况改善,DAI、CMDI、IWI降低,SH含量显著升高,IL-17水平降低.结论:PPPE能有效改善结肠炎症,可能与提高小鼠体液免疫功能、减少炎性细胞因子水平等有关.
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石榴皮多酚对人前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨石榴皮多酚对前列腺癌PC-3细胞株增殖和凋亡的影响.方法 采用MTT法测定不同质量浓度组石榴皮多酚作用不同时间对PC-3细胞生长的影响,应用流式细胞仪检测石榴皮多酚作用72 h后PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况.结果 石榴皮多酚明显抑制PC-3细胞的生长,抑制效应呈时间依赖型和浓度依赖型.流式细胞仪检测结果显示,石榴皮多酚可将PC-3细胞阻滞于G1期,并诱导PC-3细胞凋亡.结论 石榴皮多酚在体外对前列腺癌PC-3细胞株有明显的生长抑制和诱导凋亡的作用.
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大鼠在体单向肠灌流模型研究石榴皮多酚中鞣花酸的肠吸收动力学
目的：考察石榴皮多酚中鞣花酸的大鼠在体肠吸收动力学特征。方法采用大鼠在体单向肠灌流模型，选用 HPLC 法测定灌流液中鞣花酸在大鼠不同肠段以及在不同质量浓度下的吸收情况。结果鞣花酸在不同肠段均有吸收，在实验浓度范围内，大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠中鞣花酸单体的吸收速率常数（Ka）分别为4．44×10－2～7．11×10－2／min、6．58×10－2～8．60×10－2／min、5．61×10－2～7．02×10－2／min、3．92×10－2～5．95×10－2／min；石榴皮多酚精制物中鞣花酸的 Ka 分别为7．00×10－2～7．81 ×10－2／min、6．32×10－2～7．96×10－2／min、4．97×10－2～5．58×10－2／min、3．50×10－2～4．68×10－2／min。鞣花酸单体和石榴皮多酚精制物中的鞣花酸的 Ka 和表观渗透系数（P app ）差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论鞣花酸在大鼠肠道内不存在特殊“吸收窗”，石榴皮多酚精制物中的其他成分可能对鞣花酸的吸收有促进作用，在不同肠段鞣花酸的质量浓度对 Ka 和 P app 值影响不大，吸收机制可能为主动转运。
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石榴皮多酚提取物亚急性毒性实验研究
目的 研究石榴皮多酚提取物的亚急性毒性作用.方法 将120只小鼠随机分为空白对照组和石榴皮多酚提取物高、中、低剂量组,给药剂量依次为1600、800、500 mg/kg体质量,每组30只.连续喂养30 d,末次给药后24 h剖杀2/3小鼠,剩余小鼠恢复观察2 w后剖杀,摘眼球采血作血常规及生化指标测定,取出心、肝、脾、肺、肾称重,观察小鼠各器官、病理变化情况.给药结束和恢复期结束时各检查1次,共计2次.对恢复期小鼠的肝脏进行病理组织学检查.结果 给药期结束时,各组小鼠生长活动正常,各剂量组小鼠体质量变化、食物利用率与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);小鼠血液指标高、中剂量组小鼠RBC值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);高、中、低剂量组小鼠WBC值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);中、低剂量组小鼠Neu、Lym值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);高、中剂量组雌鼠的Eos值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),中、低剂量组雄鼠的Eos值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).高、中、低剂量组小鼠血液生化指标TG、UREA值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).各剂量组小鼠肝脏系数与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);雌鼠空白组的肝脏系数为5.2,高、中、低剂量组小鼠的肝脏系数依次为4.8、4.3、4.4,雄鼠空白组的肝脏系数为5.2,高、中、低剂量组小鼠的肝脏系数依次为5.1、4.6、4.5;高剂量组小鼠的肾脏系数与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).恢复期结束时,各组小鼠生长活动正常,各剂量组小鼠体质量变化、食物利用率与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);小鼠血液指标差异无统计学意义,高剂量组小鼠血液生化指标TG值与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),恢复期高、中剂量组小鼠的脏器系数与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),雌鼠空白组的肝脏系数为4.8,高、中剂量组小鼠的脏器系数分别为4.7、5.1,雄鼠空白组的肝脏系数为4.3,高、中剂量组小鼠的脏器系数分别为5.5、5.0.结论 石榴皮多酚提取物未表现出明显毒性,高剂量或者不合理用药均会对小鼠健康产生不利影响.
