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黄芪甲甙对急性病毒性心肌炎小鼠IGF-1及相关蛋白表达的作用研究
目的 探讨黄芪甲甙在治疗病毒性心肌炎过程中对胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及相关蛋白的影响.方法 65只4周龄Balb/C小鼠随机分为正常对照、黄芪对照、病毒对照及黄芪小剂量、黄芪大剂量等5组.后3组腹腔接种柯萨基B组病毒(CVB3)病毒.黄芪小剂量、黄芪大剂量每日分别给予0.07、0.6 mg/kg黄芪甲甙液灌胃1次.15d后采血、取心肌组织,用酶标免疫吸附测定法(ELISA)测血浆中IGF-I的表达,用免疫组织化学法检测心肌组织中IGF-1及相关蛋白的蛋白表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织IGF-1基因表达.结果 感染CVB3病毒后小鼠心肌组织IGF-1及相关蛋白明显升高,大剂量黄芪甲甙干预可调节小鼠IGF-1及相关蛋白的表达;小剂量黄芪甲甙则无明显效果.结论 大剂量黄芪甲甙对急性病毒性心肌炎小鼠心肌组织的保护作用可能是通过影响IGF-1及相关蛋白表达的途径来实现.
关键词： 病毒性心肌炎 黄芪甲甙 胰岛素样生长因子-1 小鼠 -
黄芪甲甙对骨髓间充质干细胞分泌干细胞因子的影响
目的 初步探讨中药黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)表达细胞因子的影响.方法 全骨髓贴壁法和单克隆培养法分离培养大鼠MSCs,间接免疫荧光法鉴定其生物学特性,用MTT法检测黄芪甲甙对MSCs增殖的影响,RT-PCR方法检测多种细胞因子的表达及黄芪甲甙对细胞因子的影响.结果 成功分离出大鼠MSCs,有干细胞因子(SCF)、血小板生成素(TPO)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、转化生长因子(TGF-β1)的表达,不表达白介素-3(IL-3);加入不同浓度的黄芪甲甙与MSCs共培养24、48、72 h后,以200 mg/mL黄芪甲甙组72 h增殖作用明显(P＜0.05);RT-PCR分析示黄芪甲甙培养组MSCs分泌SCF mRNA高于未加黄芪甲甙的对照组(P＜0.01),其余细胞因子表达量与对照组相比差异无统计学意义.结论 黄芪甲甙能促进MSCs体外增殖,并可以诱导和促进MSCs分泌SCF,这可能揭示了其促进MSCs增殖和分化的部分机制.
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黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠心肌中TLIA表达的影响及意义
目的:观察黄芪甲甙干预的病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠中TL1A表达的影响,探讨黄芪甲甙治疗VMC的作用机制.方法:取Balb/c小鼠100只,随机分成6组.非感染小鼠腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养液0.1 mL,分为正常对照组10只,以羧甲基纤维素钠0.1 mL灌胃7d;高剂量对照组10只,9％黄芪甲甙0.1 mL灌胃7d;余80只小鼠以腹腔无菌注射0.1 mL内含1×10250％组织感染率(TCID50)柯萨奇病毒B3 (Coxsachievirus B3,CVB3)的Eagle's培养液制作VMC模型.VMC小鼠随机分为心肌炎对照组和低、中、高剂量干预组,分别以生理盐水和1％,3％,9％黄芪甲甙[分别为0.07,0.2,0.6 g/(kg.d)]0.1 mL灌胃7d(每组20只).14d后处死全部小鼠并取其心脏.采用RT-PCR及免疫组织化学分别检测心肌TL1A mRNA及蛋白表达水平.结果:正常对照组和高剂量对照组无小鼠死亡,心肌炎对照组有大量小鼠死亡,死亡率为45％(9/20),低、中、高剂量干预组小鼠死亡率分别为30％(6/20),25％(5/20),10％(2/20),高剂量干预组小鼠死亡率较心肌炎对照组明显降低(P＜0.05),而低、中剂量干预组小鼠死亡率与心肌炎对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);正常对照组和高剂量对照组心肌未见任何病理改变,然而两组心肌中均有一定量的TL1A mRNA及蛋白表达,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05),心肌炎对照组TL1A mRNA及蛋白表达水平明显增加,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),心肌炎小鼠经不同剂量黄芪甲甙干预后,与对照组相比,在高剂量干预组显著下降(P＜0.01),而低、中剂量黄芪甲甙对心肌炎小鼠TL1A mRNA、蛋白表达水平以及心肌病变积分无明显影响(P＞0.05).结论:黄芪甲甙治疗VMC可能通过抑制炎症介质、降低TL1A的表达而起作用.
关键词： 黄芪甲甙 TNF配体相关因子1A 病毒性心肌炎 小鼠 -
黄芪甲甙下调CaSR对异丙肾上腺素诱导的缺血缺氧心肌损伤的保护作用
目的 探讨黄芪甲甙介导钙敏感受体(CaSR)对缺血缺氧心肌的保护作用及机制.方法 将32只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组(IS0)、黄芪甲甙低剂量组(ISO+AST IV 10 mg/kg)、黄芪甲甙高剂量组(ISO+AST IV 20 mg/kg);HE染色光镜下观察不同组别心肌组织的病理学改变,检测不同组别血清肌酸激酶及肌酸激酶同工酶含量;Western blotting法检测CaSR蛋白的表达.结果 与模型组相比黄芪甲甙低、高剂量组能不同程度减轻心肌病理改变,降低血清肌酸激酶以及肌酸激酶同工酶含量,下调CaSR蛋白表达水平(P＜0.05).结论 黄芪甲甙对异丙肾上腺素诱导大鼠缺血缺氧心肌有保护作用;其机制可能为下调CaSR蛋白表达减轻CaSR对心肌损伤的作用.
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黄芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用的机制
目的 观察黄芪甲甙对Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的影响,探讨黄芪甲甙抗心肌细胞凋亡的可能机制.方法 Balb/C小鼠50只随机分5组(每组10只).空白对照组:腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7天;病毒性心肌炎对照组:小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50 CVB3 的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Eagle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7天;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组:在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙[具体剂量分别为0.07、0.2、0.6 mg/(kg·d)]0.1 mL灌胃,共7天.采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bcl-2、Bax基因的表达,并利用图像分析系统测量平均光密度值进行半定量分析.结果 与空白对照组比较,病毒性心肌炎对照组心肌细胞凋亡发生率增高;抑制凋亡因子Bcl-2基因及蛋白表达下降,而促进凋亡因子Bax基因及蛋白表达增强,Bcl-2/Bax mRNA比值降低.与病毒性心肌炎对照组比较,黄芪甲甙高剂量干预组能降低CVB3病毒性心肌炎心肌细胞的凋亡指数,Bcl-2基因及蛋白水平表达增强,Bax基因及蛋白水平表达下降.结论 黄芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用机制可能是促进了抑制凋亡基因Bcl-2表达,抑制了促凋亡Bax基因表达.
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黄芪甲甙对实验性肺纤维化大鼠瘦素表达的影响
目的 研究黄芪甲武对肺纤维化大鼠的治疗作用及对肺组织中瘦素表达的影响.方法 36只SD大鼠,随机分为对照组、模型组和黄芪甲甙干预组.模型组和干预组气管内注射博来霉素( BLM,5 mg/kg)诱导肺纤维化,对照组在相同条件下给予生理盐水.第二天起干预组大鼠每天经胃管灌服0.1 g/L黄芪甲甙2mL,其余两组相同条件下给予生理盐水.治疗的第7天和第28天,处死动物取出肺组织,进行病理学观察;用免疫组化和RT-PCR观察各组鼠肺组织瘦素蛋白及mRNA表达的水平.结果 病理学观察显示:与模型组比较,干预组肺泡炎和纤维化程度均减轻；与模型组比较,干预组瘦素蛋白及mRNA表达显著降低.结论 黄芪甲甙可能通过抑制瘦素的过度表达,对实验性大鼠肺纤维化具有良好的治疗作用.
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黄芪甲甙治疗胸壁放射性皮炎的疗效
目的：观察黄芪甲甙治疗乳腺癌并发胸壁放射性皮炎的临床疗效。方法60例行胸壁放疗并发胸壁放射性皮炎患者，随机分为治疗组和对照组，治疗组采用黄芪甲甙均匀喷涂创面，对照组采用3%硼酸水或1%碘伏等常规治疗。结果治疗组皮肤创面愈合时间明显短于对照组，且治疗组有效率也高于对照组，差异有统计学意义（=0.012）。结论黄芪甲甙能有效治疗乳腺癌患者放疗后并发的胸壁放射性皮炎，创面愈合期较短。
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归芪补血胶囊中黄芪甲甙与微量元素的含量测定
对归芪补血胶囊中黄芪甲甙与微量元素的含量进行了测定.结果显示,5批样品黄芪甲甙平均含量为11.67×10-3,Mg、Ca、Fe、Mn等元素含量较高.可见此法简便准确,结果满意,可用于本品的质量控制.
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HPLC-示差折光检测法测定黄芪中黄芪甲甙的含量
本文建立了采用示差折光检测器检测,以甲醇-水(67:33)为流动相的HPLC法测定黄芪根中黄芪甲甙含量.Hypersil ODS2(4.6×200m,5μ)为色谱柱,流速为1 ml/min.线性范围:1μg～5μg,r=0.9999.加样回收率为98.3%,RSD=1.79%(n=6).本法简单准确,重复性好,灵敏度高.
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壮骨口服液中黄芪甲甙的含量测定
目的:测定壮骨口服液中黄芪甲甙的含量.方法:高效液相色谱法,C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水(1:2.1),检测波长203nm,样品用水饱和的正丁醇萃取.结果:黄芪甲甙的进样量在1.044～10.44μg范围内有良好的线性关系,r=0.9995,加样回收率为99.3%,RSD 2.0%.结论:该法简便,准确可靠,可用于本品的质量控制.
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喂饲补阳还五汤大鼠血清中黄芪甲甙的固相萃取-化学衍生化-荧光分光光度法测定
目的建立一种测定黄芪甲甙的方法.方法采用固相萃取小柱对血清样品进行预处理,利用茴香酸在硫酸介质中与黄芪甲甙反应产生强烈荧光物质的特性来测定血清中的黄芪甲甙.结果经固相萃取处理后的血清样品无干扰,黄芪甲甙与茴香酸的反应产物的大激发波长为λec=310nm,大发射波长为λec=376nm,黄芪甲甙在1～10μg/ml浓度范围内与荧光强度呈线性关系,相关系数r=0.999 9.测定样品平均回收率为97.1%,RSD=2.6%(n=5).结论此方法灵敏、准确,选择性好,可用于测定鼠血清中的黄芪甲甙.
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黄芪甲甙对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用
目的 观察黄芪活性成分黄芪甲甙对大鼠在体肺缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用.方法 建立大鼠在体肺缺血再灌注模型,SD大鼠30只随机分成假手术组(A组)、缺血再灌注组(I/R组)和黄芪甲甙组(B组).缺血45 min,再灌2 h后,处死大鼠,摘取左肺,测肺组织湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)的含量,并进行肺组织病理学检查.结果 肺组织W/D、MDA含量及MPO活性变化:I/R组各项指标均明显高于A组,差异有显著性(P<0.01);B组各项指标均较A组高(P<0.05),但均低于I/R组,差异有显著性(P<0.05);HE染色显示B组肺瘀血、肺灶性出血、肺泡间隔的改变比I/R组减轻.结论 黄芪甲甙对于实验性大鼠的在体缺血再灌注损伤具有一定的保护作用.
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高效液相色谱法测定消糖复康胶囊中黄芪甲甙的含量
采用高效液相色谱法测定消糖复康胶囊剂中黄芪甲甙的含量.色谱柱为Shim-pack ODS柱(6.0mm×150mm),以甲醇-乙腈-0.02 5mol/L磷酸(20:4:76)为流动相,检测波长250nm,黄芪甲甙与其他组分的色谱峰得到基线分离,加样回收率为98.1%,RSD为2.0%.同时,测定了黄芪不同种中黄芪甲甙的含量,为黄芪药材及含黄芪成药的质量评价提供了实验数据与可靠的方法.
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人参黄芪片含量测定的实验研究
人参黄芪片,为中药制剂,由人参、黄芪膏粉组成,吸载于全国医药产品大全之中[1],具有扶正固本,补气升阳,强心固脱、补虚生津之功效.用于体虚欲脱、肢体倦怠、神疲乏力,多梦健忘等症.本文采用双波长飞点扫描法对方中两味中药有效成分人参的人参皂甙Rg\-1和黄芪的黄芪甲甙,进行含量测定,效果良好,报道如下.
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薄层扫描法测定补气安神胶囊中黄芪甲甙的含量
补气安神胶囊是以黄芪为主药组成的复方制剂,具有补中益气、宁心安神的功能,用于气血不足,神疲乏力等症.本法用薄层扫描测定黄芪中黄芪甲甙的含量.实验中采用甲醇超声提取,经大孔吸附树脂柱净化后测定,结果满意,现报道如下.
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凤凰牌成长乐胶囊对儿童生长发育的影响
凤凰牌成长乐胶囊是以黄芪、山楂、枸杞子等为主要原料制成的保健食品,其功效成分主要是总黄酮、黄芪甲甙、粗多糖等.经功能试验证明,成长乐胶囊具有促进动物生长发育的作用.本研究旨在观察成长乐胶囊对儿童生长发育状况的影响,以了解其是否具有促进儿童生发育的作用.
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薄层扫描法测定复明口服液中黄芪甲甙的含量
采用薄层扫描法[1]对复明口服液中的黄芪甲甙进行定量,结果:黄芪甲甙[2]样量在1～5μg,呈良好的线性关系,回收率96.78%.结论:建立了复明口服液的含量测定方法,方法准确、可靠、重现性好.
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白细胞介素-17在病毒性心肌炎中的表达及黄芪甲甙干预对其的影响
目的：探讨白细胞介素-17（IL-17）在病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌中的表达及黄芪甲甙干预对其表达的影响。方法60只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及低、高剂量干预组，每组15只，后3组小鼠经腹腔接种0．1mL柯萨奇病毒B3（CVB3），低、高剂量干预组接种后当天分别以0．01、0．09g/L黄芪甲甙0．1mL灌胃，第15天处死小鼠，计算各组小鼠死亡率及心脏质量/体质量（HW/BW），通过HE染色判断炎症细胞浸润与心肌坏死病理积分，荧光实时定量PCR、Westernblot检测IL-17mRNA、蛋白表达，ELISA测定心肌组织IL-6和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果高剂量干预组死亡率、炎症细胞浸润与心肌坏死病理积分明显低于模型组（P＜0．05）。模型组HW/BW、心肌IL-17mRNA及蛋白表达水平、心肌IL-6、TNF水平均明显高于对照组（P＜0．01）。与模型组比较，高剂量干预组HW/BW、心肌IL-17mRNA及蛋白表达水平、心肌IL-6、TNF水平明显降低（P＜0．05）。结论IL-17可能参与VMC发病过程，黄芪甲甙对VMC的治疗作用可能与其抑制IL-17介导的炎症反应有关。
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黄芪甲甙对香烟烟雾暴露大鼠肺组织Nrf2表达的影响
目的 探讨熏烟对大鼠肺组织Nrf2表达的影响以及黄芪甲甙(AS-IV)干预对Nrf2表达的调控作用.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Ctrl),高剂量黄芪对照组(AH),熏烟模型组(CS),熏烟+低剂量黄芪组(CS+AL),熏烟+中剂量黄芪组(CS+AM),熏烟+高剂量黄芪组(CS+AH),每组5只大鼠.除Ctrl组和AH组外,其它各组大鼠接受染毒柜被动吸烟4周,建立熏烟模型.CS+AL组、CS+AM组和CS+AH组在熏烟前分别给予1.2 mg/(kg·d)、2.4 mg/(kg·d)、3.6 mg/(kg·d)黄芪甲甙灌胃.AH组给予3.6 mg/(kg·d)黄芪甲甙灌胃.造模结束后留取肺组织,采用HE染色观察肺部形态学改变,免疫组化、RT-PCR、Western blot方法检测Nrf2的表达.结果 吸烟诱导大鼠气道上皮Nrf2阳性表达升高,同时吸烟上调大鼠肺组织Nrf2基因和蛋白水平的表达.黄芪甲甙能剂量依赖性降低Nrf2在熏烟大鼠气道上皮和肺组织的表达.结论 吸烟可以引起大鼠肺组织Nrf2表达升高,黄芪甲甙可以下调吸烟诱导的Nrf2 的高表达.
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黄芪甲甙联合蜂蜜促进褥疮创面愈合的机制与疗效研究
目的 探讨在常规治疗褥疮的基础上,进一步应用黄芪甲甙与蜂蜜促进褥疮刨面愈合的机制与疗效.方法 将66例Ⅱ～Ⅲ期褥疮患者随机分为治疗组和对照组各33例,治疗组,在常规治疗褥疮的基础上,根据创面大小及深浅,再应用黄芪甲甙联合蜂蜜治疗,对照组,仅采用常规治疗褥疮的方法,同样疗程结束后,或痊愈后分别对两组患者疗效及痊愈时间进行比较.结果 (1)治疗组疗效总有效率明显优于对照组;(2)褥疮创面愈合时,治疗组比对照组提前7 d.结论 黄芪甲甙联合蜂蜜治疗褥疮疗效好,创面愈合速度快,不留疤痕.
