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分析脑梗塞发病及预后与Fas、Apo2.7、Bcl-2阳性表达率间的关系
目的 研究Fas、Apo2.7、Bcl-2阳性表达率对脑梗塞发病与预后的影响关系.方法 选取2016年10月～2017年10月收治的脑梗塞患者75例作为观察组;并选取同期我院健康体检志愿者75例作为对照组,两组观察对象血浆检查使用流式细胞仪完成,分析两组检验结果.结果 观察组脑梗塞患者血浆血小板中Apo2.7、Bcl-2、Fas等阳性表达率均高于对照组正常体检者,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞膜中Apo2.7、Fas阳性表达高于对照组,而Bcl-2低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 本研究显示,血小板中Fas、Apo2.7、Bcl-2阳性表达率在脑梗塞发病及预后中起到巨大作用,可作为早期诊断脑梗塞的重要依据.
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bcl-2在早期外伤性癫痫大鼠中的表达
目的 研究早期外伤性癫痫大鼠皮层脑组织中bcl-2的表达.方法 将30只成年SD大鼠随机分为正常对照组、实验组、生理盐水组(假手术组).正常对照组大鼠不做任何处理,实验组大鼠皮层注射FeCl3,生理盐水组大鼠注射生理盐水.24小时后检测bcl-2的mRNA表达水平、bcl-2蛋白的表达水平.结果 行为学观察发现,正常对照组和生理盐水组大鼠均未见痫性发作,实验组大鼠可观察到痫性发作;实验组和生理盐水组bcl-2的mRNA和蛋白表达均较正常对照组增高(P<0.05),但实验组较生理盐水组显著下降(P<0.05).结论 bcl-2在PTE大鼠皮层脑组织中表达显著下降,细胞凋亡可能与PTE的形成有关.
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P16、Bcl-2在子宫平滑肌肿瘤中的表达及应用
目的：研究P16、Bcl-2、Ki-67、P53、ER、PR在子宫平滑肌肿瘤中的表达及意义。方法选择2007～2013年我院收治的子宫平滑肌瘤100例，子宫平滑肌肉瘤15例，正常子宫平滑肌壁15例，均采用免疫组化方法检测P16、Bcl-2、Ki-67、P53、ER、PR的表达。结果 P16、Ki-67、P53在肉瘤组的表达高于肌瘤组和对照组，差异具有统计学意义（P＞0.05）；Bcl-2在肌瘤组的表达高于肉瘤组和对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；ER、PR在三组的表达差异无统计学意义。结论 P16、Bcl-2、Ki-67、P53可以作为鉴别良恶性平滑肌肿瘤的指标。
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Taq-Man实时荧光定量RT-PCR
[目的]建立BcL-2 Taq-Man实时荧光定量RT-PCR的方法.[方法]老年肾虚患者与年轻对照组各10例为检测对象,外周血单个核细胞中提取RNA,每份RNA标本分为Bcl-2测定管与β-actin校正管.Roche公司Lightcycle分析软件自动监测PCR每-扩增过程中的荧光强度,并根据不同浓度梯度(103～107)守家基因β-actin的外参照标准曲线自动求出每份标本中Bcl-2与β-actin的浓度值,将每份标本的Bcl-2测定值以β-actin测定值加以校正即可得出Bcl-2的相对含量.[结果]Bcl-2的所测范围为102至106,标准品β-actin实测值与理论值非常接近,所以标准曲线呈良好的线性关系(r=1.00).年轻对照组Bcl-2的相对含量为老年肾虚患者的10倍(P＜0.01).[结论]Bcl-2 Taq-Man实时荧光定量RT-PCR检测方法敏感,准确,简便易行.
关键词： Taq-Man lightcycle RT-PCR Bcl-2 -
初治急性白血病Bcl-2和Bax表达的研究
[目的]研究初治急性白血病(AL)患者预后与Bcl-2和Bax的关系,提高初发AL的早期完全缓解(CR)率.[方法]用流式细胞仪检测85例初治AL患者骨髓或外周血白血病细胞Bcl-2和Bax的阳性率,并计算Bcl-2/Bax的比值.[结果]在初发AL中,不管是非难治组还是难治组中Bcl-2的表达两者相比差异无统计学意义(P＞0.05);非难治组Bax明显高于难治组(P＜0.001),且难治组Bcl-2/Bax比值均＞1.0.[结论]初治AL的预后与Bcl-2的表达无明显相关,而与Bax的表达有明显相关性,Bcl-2/Bax比值是判断AL预后的一项敏感指标.
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Survivin、p53和bcl-2在脑星形细胞肿瘤中的表达及相关性研究
背景与目的:近年来发现胶质瘤生长、分化有着其特定的分子机制,胶质瘤恶性程度与特定基因的突变、丢失或扩增表达有密切的关系.本研究探讨凋亡抑制基因Survivin、抑癌基因p53和癌基因bcl-2在人脑星形细胞肿瘤中的表达、相互关系及其意义.方法:按制定的入组标准选择45例脑星形细胞肿瘤标本,应用免疫组化技术检测Survivin、p53、bcl-2在不同级别脑星形细胞瘤中的表达.结果:45例脑星形细胞肿瘤标本中33例表达Survivin蛋白,阳性率为73.3%,并随星形细胞肿瘤病理分级的增加而增高(P＜0.05);胶质母细胞瘤的p53阳性水平要高于星形细胞瘤:bcl-2阳性水平星形细胞瘤显著高于胶质母细胞瘤;Survivin表达与p53表达密切相关,与bcl-2表达无相关性.结论:Survivin高表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关;Survivin的表达与脑星形细胞瘤中p53异常表达密切相关.
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小鼠脑爆震伤中PI3K/Akt通路及相关凋亡蛋白表达情况
目的 探讨小鼠脑爆震伤后不同时间点磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路及相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达情况.方法 将50只雄性小鼠通过随机数字表法分为对照组(n=10)和模型组(n=40),再将模型组根据造模成功后时间分为3 h组、6 h组、12 h组和24 h组,每组各10只.测定各组脑组织含水量与伊文思蓝含量,并采用Western blot以及实时荧光定量PCR等技术检测各组小鼠脑组织中PI3K、Akt、Bcl-2、Bax的含量和mRNA的表达变化.结果 模型组各时间点脑组织含水量与伊文思蓝含量较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot检测与实时荧光定量PCR检测结果一致.Akt、PI3K和Bcl-2表达,3 h组、6 h组均较对照组显著降低,6 h组达到低,差异均有统计学意义(P<0.05);12 h组、24 h组较6 h组有所升高,但仍低于对照组,且与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).Bax表达,3 h组、6 h组、12 h组均较对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);24 h组较12 h组有所降低,但仍高于对照组,且与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 颅脑爆震伤中PI3K/Akt通路和凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达变化对其判断和治疗有一定提示作用.
关键词： 颅脑爆震伤 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路 Bcl-2 Bax -
凋亡相关因子在原代肝细胞和肝癌细胞的表达差异
目的:本实验通过研究自然状态下大鼠原代肝细胞和大鼠肝癌细胞系CBRH7919细胞在不同周期时相细胞凋亡的差异,以及细胞凋亡相关因子的表达差异,探讨自然状态下大鼠肝细胞和CBRH7919细胞不同周期时相的凋亡以及凋亡因子差异的意义.方法:应用改良的两步灌流法获取原代肝细胞,原代肝细胞经过流式细胞分选仪分析,经DNA荧光染料Hoechst33342染色的CBRH7919细胞分为G0/G1群、S群、G2/M群三群同步化细胞,流式细胞分析细胞凋亡的程度和原代肝细胞周期组成,应用RT-PCR检测bcl-2、bax、bcl-xl的表达.结果:原代肝细胞细胞周期组成以G0/G1为主.流式细胞仪分选后CBRH7919细胞的周期分布图显示呈单峰,细胞纯度较高.基础状态下各群细胞凋亡有差异,bcl-2家族成员RT-PCR检测结果:bcl-2 mRNA水平有周期依赖性;bcl-2与bax mRNA水平的比值即bcl-2/bax以G2/M期为低.结论:1.与原代肝细胞相比CBRH7919细胞在G2/M期细胞凋亡数量较多,S期次之,G0/G1期相对较少.2.bcl-2的mRNA水平在各群细胞均有周期依赖性,可能参与细胞凋亡及细胞周期的特异性调节.3.bax mRNA在CBRH7919细胞各期与原代肝细胞相比显著增高,可能是凋亡周期差异的重要调节因素.
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与骨肉瘤相关凋亡因子
分子生物学的发展,使我们的认识从解剖学的整体水平扩展到以细胞生物学、免疫学、遗传学为基础的细胞水平、核酸和蛋白质水平上,来阐明肿瘤的发生、发展和转归.近年来国内、外学者对多种骨肉瘤相关的分子生物学标记物进行研究.目前已证实骨肉瘤的发生、发展与细胞凋亡有关[1].细胞凋亡,又称细胞程序死亡(Programmed cell death),是由细胞自身基因调控引发的细胞死亡方式.
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一氧化氮在急性出血坏死性胰腺炎时对肝脏枯否细胞凋亡的作用机理
目的：探讨一氧化氮在急性出血坏死性胰腺炎时对肝脏枯否细胞bcl-2和BaX基因的作用调控肝脏枯否细胞的凋亡。方法：通过对SD大鼠支撑胰腺炎模型后，不同的处理手段，采点处死后，对肝脏枯否细胞bcl-2和BaX基因表达的评分、肝脏枯否细胞凋亡指数、淀粉酶和一氧化氮关系的比较。结果：一氧化氮可以通过早期启动肝脏枯否细胞的凋亡基因的激活，抑制抑凋亡基因的表达，促使枯否细胞的凋亡。结论：NO通过调节BaX、bcl-2等凋亡相关基因，调控肝脏枯否细胞的凋亡。
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胎膜早破与细胞凋亡调控基因Bcl-2、Bax和细胞色素-C的相关性研究
目的：研究细胞凋亡增加是否为胎膜早破的一个发病机理和危险因素。方法：随机选择经阴道分娩的足月初产妇60例的胎膜，其中胎膜早破30例作为研究组，余30例为对照组。结果：采用免疫组化法检测两组胎膜组织中细胞凋亡调控因子（Bax、Bcl-2）及细胞色素C（Cyt-C）的表达情况的阳性表达率高于对照组（p＜0.005），但抑凋亡蛋白的Bcl-2阳性表达率两组间无统计学差异（p＞0.005）。结论：胎膜早破的发生与促凋亡蛋白Bax、Cyt-c表达的增强相关，基因调控下胎膜细胞凋亡增加可能是胎膜早破的一个重要发病机制。
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内异症患者增生期内膜组织基质金属蛋白酶-2、血管生长因子、凋亡细胞调节基因水平表达的相关性研究
目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管生长因子(VEGF)、凋亡细胞调节基因(Bcl-2和Bax)在增生期子宫内膜异位症(内异症,EMs)患者中的水平表达的相关性.方法:采用免疫组化法检测内异症56例异位内膜、40例在位内膜和48例对照组的增生期子宫内膜中MMP-2、VEGF、Bcl-2和Bax的表达.结果:①MMP-2表达异位内膜组高于在位内膜组和正常内膜组,差异有统计学意义(p＜0.05);②VEGF表达异位内膜组强于在位组和对照组内膜,差异有统计学意义(p＜ 0.05);③Bcl-2和Bax蛋白表达各组间差异无统计学意义(p＞0.05),但Bcl-2表达在异位内膜增生期强;④MMP-2、VEGF、Bcl-2和Bax各指标之间均存在等级相关性.结论:MMP-2、VEGF、Bcl-2和Bax可能相互影响,共同参与子宫内膜异位症的发生发展.
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5-脂氧合酶抑制剂治疗Jurkat细胞移植瘤裸鼠的实验研究
目的:观察5-脂氧合酶抑制剂NDGA(去甲二氢愈创木酸)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞系Jurkat细胞在裸鼠体内生长的影响.方法:选用Jurkat细胞裸鼠体内接种成瘤后,腹腔注射给药观察其对肿瘤生长的影响.Westem检测细胞细胞周期蛋白p-ERK,Bcl-2/Bax的变化.结果:NDGA能抑制肿瘤的生长(P＜0 01),使Jurkat细胞凋亡增加(P＜0.05).Jurkat细胞p-ERK,Bcl-2/Bax表达明显下调(P＜0.05).结论:NDGA能抑制Jurkat细胞移植瘤的生长,促进Jurkat细胞的凋亡.其作用机制与p-ERK,Bcl-2/Bax表达明显下调有关.
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姜黄素经p53途径调控bcl-2诱导黑色素瘤A375细胞凋亡的研究
目的:研究不同浓度姜黄素黑色素瘤A375细胞凋亡的诱导作用,并探讨p53、Bcl-2在姜黄素诱导的黑色素瘤A375细胞凋亡中的表达作用.方法:将对数生长的黑素瘤细胞A375用不同浓度姜黄素干预,MTT法检测细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测p53-siRNA对细胞的影响;westen bolt检测相关凋亡蛋白p53和Bcl-2变化.结果:姜黄素抑制黑色素瘤A375细胞增殖和促进细胞凋亡;MTT法检测结果显示随着姜黄素浓度的增大和时间的延长,细胞增殖抑制率升高;流式细胞仪检测结果显示随姜黄素浓度的增大,细胞凋亡率升高;姜黄素通过上调p53基因而抑制Bcl-2的表达,预先经p53-siRNA处理后,细胞凋亡减少,P53蛋白表达下降.结论:姜黄素可经p53途径下调Bcl-2促黑色素瘤A375细胞凋亡.
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婴幼儿喘息性疾病外周血嗜酸性粒细胞Bcl-2的表达及意义
目的 检测婴幼儿喘息性疾病患儿外周血嗜酸性粒细胞中Bcl-2的表达,探讨其在外周血嗜酸性粒细胞凋亡中的作用.方法 选取婴幼儿喘息性疾病患儿120例作为试验对象,分别为2个月至1岁组45例；～2岁组35例；～3岁组40例.健康对照组30名,均为健康体检婴幼儿,年龄4个月至3岁.每组入选病例均取空腹静脉抗凝血,分别进行嗜酸粒细胞计数及嗜酸性粒细胞中Bcl-2表达的检测.结果 各试验组与对照组比较,试验组标本中嗜酸粒细胞明显升高,试验组嗜酸粒细胞中Bcl-2表达水平明显升高(P＜0.05).结论 喘息性婴幼儿外周血中Bcl-2表达水平升高,可能存在某种因素激活了抗凋亡因子,引起外周血嗜酸粒细胞凋亡减少从而导致外周血嗜酸粒细胞升高.
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槲皮素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及相关蛋白表达的研究
目的 探讨槲皮素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的作用.方法 将Eca-109细胞随机分为两组:①槲皮素(Q)组;②不加药物对照(C)组,同时培养48h,分别进行Bcl-2、Bax和XRCC1免疫组化和免疫斑点印迹检测.以TUNEL法检测各组细胞凋亡率.结果 细胞凋亡率,C组为4%,Q组为35%(P＜0.001);Q组的Bcl-2和XRCC1的免疫反应性(IR)皆低于C组(P＜0.001),Bax高于C组(P＜0.001);Bcl-2与XRCC1呈显著正相关,与Bax呈显著负相关.结论 槲皮素可诱导Eca-109细胞凋亡,同时下调Bcl-2和XRCC1的表达,上调Bax表达.
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流式细胞术检测苦参素对人胃癌细胞系MGC-803凋亡的作用
目的:运用流式细胞术检测苦参素对人胃癌细胞系MGC-803的凋亡作用.方法:运用流式细胞术检测细胞凋亡率及凋亡相关基因蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果:苦参素1mg/ml、2mg/ml作用24h后,流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率与阴性对照组相比,差异具有显著性(P＜0.05);Bcl-2表达量明显减少,Bax表达量明显增加,差异具有显著性(P＜0.05).结论:苦参素对人胃癌细胞系MGC-803有诱导凋亡作用,其机制与上调Bax和下调Bcl-2表达有关.
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宫颈鳞状上皮癌化疗前后Bcl-2、eIF-4E和VEGF的变化
目的:宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,严重威胁患者的生命安全.近年来随着分子生物学技术的发展,以癌基因的激活、抑癌基因的失活以及其相关蛋白表达异常在发病机制方面的研究日益受到重视并取得很大的进展.本实验目的在于探讨宫颈鳞状上皮癌(SCC)化疗效果与组织标本中的Bcl-2、eIF-4E及VEGF的关系.方法:以肿瘤直径大于4cm的宫颈鳞状上皮癌患者48例(Ⅰb期:12例,Ⅱ期:36例)为对象,采用奈得铂、异环磷酰胺、硫酸培洛霉素(SIP疗法)治疗1～2个疗程,磁共振成像判断疗效;采用免疫组化法(SP法)测量组织标本中的Bcl-2、Eif-4及VEGF的阳性率.结果:48例患者治疗1个疗程后,有效28例,无效20例,有效率58.8%,有效病例1疗程结束时肿瘤体积较治疗前明显缩小,Bcl-2及VEGF明显降低.结论:1疗程结束后组织标本中的Bcl-2及VEGF的变化可以预测宫颈鳞状上皮癌术前化疗效果.
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心肌缺血-再灌注损伤与细胞凋亡
目的:探讨不同时间心肌缺血-再灌注损伤和心肌细胞凋亡的关系.方法:制备不同缺血时间的家兔心肌缺血-再灌注损伤的模型,用deadEnd比色法、Annexin-V-Flous流式细胞仪定量检测细胞凋亡以及对凋亡抑制基因Bcl-2的检测,了解心肌细胞凋亡情况.结果:细胞凋亡检测结果:三种不同方法检测结果示随着缺血时间延长,凋亡的心肌细胞数目逐渐增多,同正常组相比较有显著意义,p﹤0.05.结论:心肌缺血-再灌注损伤与缺血时间有一定相关性,随着缺血时间的延长,再灌注损伤的程度逐渐减轻;心脏在经缺血预处理后,心肌缺血-再灌注损伤程度明显减轻;缺血-再灌注损伤伴有凋亡.
关键词： 心肌缺血-再灌注损伤 细胞凋亡 Bcl-2 -
清热化瘀滋阴法对系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞bcl-2Mrna表达的影响(附15例报告)
目的: 探讨清热化瘀滋阴法对系统性红斑狼疮(SLE)早期患者外周血淋巴细胞bcl-2 mRNA表达的影响.方法: 用清热化瘀滋阴法治疗SLE患者15例,抽取患者服药前后肘静脉血.淋巴细胞分离液分离其外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,采用一步法RT-RCR技术,检测服用清热化瘀滋阴中药对bcl-2 mRNA的表达的影响.结果: 用药前后均可见bcl-2 mRNA的表达.服用清热化瘀滋阴中药后bcl-2 mRNA的表达明显低于用药前(P<0.01).结论: 清热化瘀滋阴中药可能通过下调患者外周血淋巴细胞bcl-2 mRNA的表达发挥对SLE的治疗作用.
