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门静脉高压症患者脾切除后外周血B7-1/CD28表达的变化
目的 探讨B7-1/CD28对门静脉高压症(portal hypertension,PHT)患者免疫功能的影响和作用.方法 采用流式细胞分析技术对30例门静脉高压症患者进行研究,检测门静脉高压症患者行脾切除前后外周血淋巴细胞中以及脾脏中B7-1/CD28的表达情况,分析其与患者淋巴细胞亚群以及免疲功能的关系.时患者外周血B7-1/CD28和淋巴细胞进行检测.利用免疫组化方法检测B7-1/CD28在脾脏中的表达,与10例外伤性脾破裂行脾切除之脾脏组织进行比较.结果 门静脉高压症患者外周血中淋巴细胞亚群和B7-1/CD28表达较低,脾切除后短期内升高.其脾脏中表达的B7-1/CD28较正常人群高.结论 门静脉高压症患者全脾切除后外周血B71/CD28通路被激活,患者免疫功能得到部分恢复.
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结肠癌患者外周血淋巴细胞CD8和CD28的表达
[目的]探讨结肠癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28的表达及其临床意义.[方法]用流式细胞术对51例结肠癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD8及CD28进行了检测.[结果]结肠癌组CD8+CD28-细胞与对照组比较明显增高(P＜0.05),CD8+CD28+细胞明显低于健康对照组(P＜0.01).结肠癌患者手术后CD8+CD28-细胞与手术前比较明显减低(P＜0.01),手术后CD8+CD28+细胞与手术前比较明显增高(P＜0.05).结肠癌患者淋巴结转移组CD8+CD28+细胞明显低于未转移组(P＜0.01).Dukes'C期结肠癌患者CD8+CD28-细胞与Dukes'A期和Dukes'B期相比明显增高(分别P＜0.01,P＜0.05),随着临床分期的进程,CD8+CD28+细胞、CD8-CD28+细胞逐渐减低(分别P＜0.01,P＜0.05).[结论]检测结肠癌患者的外周血中的CD8和CD28的表达,对了解患者的免疫状况,疾病进展和指导临床对患者进行免疫调节治疗方面有一定的价值.
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B7/CD28在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞中的表达及意义
目的:探讨B7/CD28分子在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血淋巴细胞中的表达及意义.方法:采用流式细胞仪检测69例AS患者和50例健康对照者外周血淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达情况,检测CD28在CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞上的表达以及B7-1和B7-2在CD19+B细胞上的表达情况.用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平.结果:AS患者CD3+、CD3+CD4+、CD19+细胞较正常对照组增高(P＜0.05),CD3+CD8+T细胞较正常对照组降低(P＜0.05);AS患者CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞上的CD28、CD19+B细胞上B7-1和B7-2的表达较正常对照组增高(P＜0.05);AS患者血清中IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高(P＜0.01).结论:B7/CD28分子的异常表达可能与AS患者T淋巴细胞和抗原呈递细胞(APC)的功能变化有关.B7-1低水平与B7-2的高水平表达表明,AS患者T细胞的活化可能主要是通过CD28与B7-2的交联传递共刺激信号,介导以Th2型反应为主的免疫应答反应,产生大量的免疫球蛋白.
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迟发型放射性脑病患者外周血CD4+CD28-T细胞的变化
目的 探讨迟发型放射性脑病(REP)患者外周血CD4+ CD28-T细胞亚群的变化及意义.方法 选择迟发型REP患者45例(迟发型REP组),另选取因脑瘤及鼻咽癌接受放射治疗患者45例(放射对照组)及未接受放射治疗正常对照45例(正常对照组).均采用流式细胞仪检测外周血CD4+ CD28-T细胞占CD4 T细胞比例.结果 迟发型REP组CD4+ CD28-T/CD4T细胞比例明显高于放射对照组及正常对照组(均P＜0.05),放射对照组与正常对照组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 迟发型REP患者外周血CD4+ CD28-T细胞升高,可能在迟发型REP发生、发展中起重要作用.调节T淋巴细胞亚群可能是迟发型REP潜在治疗靶点.
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恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28-表达及意义
目的 探讨恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28-表达及意义.方法 采用流式细胞仪检测35例恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28-及CD8+CD28-.结果 恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28+及CD8+CD28-与正常对照有显著性差异(P<0.05):治疗有效后两者趋于正常(P>0.05);而无效组与正常对照组相比仍有显著性差异(P<0.05).结论 恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28+及CD8+CD28-表达异常,不同治疗效果表达不同,恶性淋巴瘤患者有免疫功能异常,治疗有效后免疫功能恢复正常.
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共刺激分子CD28/CTLA-4:B7在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞中的表达
目的 探讨CD28、CTLA-4(CD152)、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)共刺激分子在强直性脊柱炎(AS)患者的外周血淋巴细胞上的表达异常与免疫功能紊乱的关系.方法 采用流式细胞仪检测69例AS患者和50例健康对照者CD28和CTLA-4在外周血CD3+、CD4+和CD3+、CD8+T细胞上的表达及CD80和CD86在CD19+B细胞上的表达.用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平.结果 AS患者CD3+、CD4+T和CD3+、CD8+细胞上的CD28和CTLA-4,CD19+B细胞上CD80和CD86的表达较正常对照组显著增高(P＜0.05);AS患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高(P＜0.01).结论 AS患者T细胞上表达过量的CD28,与B细胞的B7结合,激活T、B细胞,产生大量免疫球蛋白,同时刺激激活的T细胞表达CTLA-4,使T细胞不能充分表现效应功能.
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胃癌患者外周血CD25/4、CD28/8的表达研究
机体发生肿瘤时免疫系统能产生抗肿瘤免疫应答,其中细胞免疫在抗肿瘤免疫应答中发挥着重要作用.本文采用流式细胞术对胃癌患者外周血T淋巴细胞CD4、CD25、CD8和CD28的表达进行了检测,探讨胃癌患者围手术期免疫功能变化及其与肿瘤生物学行为的关系,进一步探讨T淋巴细胞在抗肿瘤方面的意义.
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2型糖尿病患者外周血中膜型及可溶性 CD28分子的表达及意义
目的：分析2型糖尿病患者外周血中膜型及可溶性 CD28分子的表达及其意义。方法分别收集2012年12月至2013年12月在北京军区联勤部门诊部就诊的30例2型糖尿病患者（糖尿病组）及同期30名健康体检者（对照组）的外周血，通过溶血及流式细胞术检测其外周血 T 细胞表面 CD28分子的表达，酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中可溶性 CD28的水平，并进行对比分析。结果糖尿病组外周血 CD4＋CD28＋T 细胞和 CD8＋CD28＋T 细胞显著低于对照组[（28．29±7．71）％比（32．77±4．28）％和（12．18±3．17）％比（18．53±3．27）％，均 P ＜0．01]，血清中可溶性 CD28水平显著高于对照组[（2．86±0．96）比（0．61±0．19）μg/L，P ＜0．01]。结论协同刺激分子 CD28很可能参与了2型糖尿病的免疫病理机制。
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慢性丙型肝炎患者外周血Cbl-b、CD28和CTLA-4的表达及其临床意义
目的 探讨慢性丙型肝炎患者外周血E3泛素连接酶Cbl-b及其相关信号分子CD28和CTLA-4的变化规律及其临床意义.方法 选择25例慢性丙型肝炎患者和19例健康对照者,分离外周血单个核细胞,应用RT-PCR法检测Cbl-b、CD28和CTLA-4 mRNA相对表达水平;采用荧光定量RT-PCR检测HCV RNA;采用INNO-LiPA线性探针杂交法检测HCV基因分型.结果 Cbl-b、CD28和CTLA-4 mRNA在慢性丙型肝炎患者中表达升高,较健康对照分别升高1.38倍、1.90倍和2.68倍,其中CTLA4-4的升高表达具有统计学意义(P<0.05);在HCV 1b基因型(n=11)中,Cbl-b和CTLA-4 mRNA水平较HCV 2a基因型(n=14)显著升高,分别升高1.74倍和2.81倍,差异具有统计学意义(P<0.05),而Cbl-b、CD28和CTLA-4水平与HCV RNA和ALT水平均无显著相关性.结论 Cbl-b和CTLA-4可能参与了HCV感染所致的机体免疫耐受,在HCV感染慢性化中发挥重要作用.
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CD8阳性T细胞亚群在肺癌外周血的检测及分析
目的 检测肺癌患者外周血清中CD8+T细胞亚群CD28+及CD57+的表达程度,探讨其临床意义.方法 合肥市第二人民医院经细胞学或病理学诊断为肺癌的初次治疗患者30例,TNM分期(UICC,第7版)Ⅲ期12例,Ⅳ期18例.病理类型腺癌15例,鳞癌8例,小细胞肺癌7例.流式细胞仪分别检测肺癌患者组治疗前后及健康对照组人群的血清中CD8+T细胞CD28+和CD57+的表达水平,分析该表达水平变化及与肺癌临床分期和病理学类型之间的关系.结果 肺癌患者治疗前血清中CD28+T细胞亚群比例为(12.34±3.72)％,CD57+T细胞亚群比例为(19.53±5.26)％.而健康对照组血清中CD28+细胞亚群比例为(23.53±4.15)％,CD57+T细胞亚群比例为(11.37±2.73)％,差异有统计学意义(P<0.05),该类指标与肿瘤病理类型无关,而随着不同临床分期增加,CD8+CD57+T细胞未见差异,而CD8+CD28+T细胞表达差异有统计学意义(P 0.05).经两周期化疗后,缓解组(完全缓解+部分缓解)患者血清中CD28+、CD57+T细胞亚群比与健康对照组患者相比,差异无统计学意义(P>0.05),而未缓解组(稳定+进展)患者的CD28+、CD57+T细胞亚群比例分别为(10.62±2.74)％(20.45±4.36)％.与健康对照组差异有统计学意义(P<0.05).结论 肺癌患者血清中CD8+CD28+T细胞表达较正常人群明显减低,而CD8+CD57+T细胞表达较正常人群明显升高,联合该两种T细胞亚群检测不仅可以了解肺癌患者免疫状况,同时可以评估肺癌患者预后,有一定临床应用价值.
关键词： 肺肿廇 CD8阳性T淋巴细胞 抗原 CD28 CD57 -
慢性乙型肝炎患者肝组织中CD8 CD28表达与肝窦病变的关系
目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)肝组织中CD8,CD28在肝细胞中表达与肝窦病变的关系.方法:随机选择解放军第123医院肝病中心慢性乙型肝炎患者肝穿刺组织60例,穿刺肝组织采取免疫组化CD8,CD28双染色法,光镜观察其表达与肝窦病变的关系.结果:CD8,CD28阳性表达与肝窦狭窄、肝窦阻塞、肝窦扩张、肝窦毛细血管化密切相关.提示,肝窦病变较轻时以细胞毒性(杀伤性)T淋巴细胞CD8+,CD28+分子的表达占优势;调节性T淋巴细胞CD8+,CD28-分子少表达.随着肝组织炎症病变加重,炎症坏死区T淋巴细胞CD8+,CD28+分子的表达增强.而当肝组织肝窦毛细血管化较重,坏死修复并形成纤维间隔带或纤维瘢痕时则以抑制性(调节性)T淋巴细胞CD8+,CD28-分子表达为主.CD8,CD28分子在肝窦狭窄、阻塞、扩张、毛细血管化重度时表达均高(P<0.01).表明T淋巴细胞CD8,CD28分子的表达参与慢性乙型肝炎肝窦病变的病理转化.结论:慢性乙型肝炎肝组织中T淋巴细胞CD8,CD28分子的表达变化在肝窦病变的演变中担当一关键角色.
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人B7.1基因cDNA的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建
目的克隆人B7.1全长cDNA及构建相应的逆转录病毒表达载体。方法应用逆转录多聚酶链反应从人B淋巴瘤细胞系Raji中克隆B7.1全长cDNA,再将cDNA插入到质粒pBluescript中,经自动荧光测序证实无误后,再通过定向克隆构建相应的逆转录病毒表达载体PLXSNhB7。结果逆转录多聚酶链反应扩增产物长度与预期的889 bp一致;用M13正、反向引物进行荧光测序证实,克隆出的序列与GenBank的B7.1 cDNA序列完全一致;人B7.1全长cDNA被成功地插入到质粒PLXSN中。结论人B7.1全长cDNA的克隆及相应逆转录病毒表达载体的构建为今后应用B7.1进行肿瘤免疫基因治疗提供了可能性。
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共刺激分子CD28及CTLA-4的表达与不明原因反复流产的相关性研究
目的 探讨CD28、CTLA-4在母胎界面的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系.方法 采集20例诊断为URSA的患者(URSA组)和20例正常早孕妇女(正常对照组)的部分蜕膜组织,采用Real-Time PCR检测蜕膜组织中CD28、CTLA-4 mRNA的表达;流式细胞术检测蜕膜组织CD3+T细胞中CD28、CTLA-4的表达.结果 蜕膜组织中CD28 mRNA的相对表达量URSA组(8.51×10-6±4.97×10-6)较正常对照组高(6.82×10-6±7.02×10-6),但无显著差异.蜕膜组织中CTLA-4 mRNA的相对表达量URSA组(2.35×10-4±3.17×10-4)较正常对照组(2.09×10-5±2.79×10-5)显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);URSA组CD28/CTLA-4比值显著降低(P<0.05).蜕膜组织中CD3+CD28+T淋巴细胞亚群URSA组(65.0±7.15%)高于正常对照组(59.2±4.51%),差异无统计学意义.蜕膜组织中CD3+CTLA-4+T淋巴细胞亚群URSA组(4.54±3.95%)高于对照组(2.11±1.57%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 蜕膜组织中CD28/CTLA-4的表达异常可能与URSA的发病具有密切关系.
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CD28的表达在乙型肝炎病毒感染免疫耐受机制中的作用
目的探讨乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞上的CD28表达在乙肝病毒感染免疫耐受机制中的作用以及影响其CD28表达的可能因素.方法选择其血清中HBsAg、HBeAg、抗HBc-IgM和HBVDN均为阳性的乙肝病毒携带者(肝功能正常)35例;正常对照组11例以及急性乙型肝炎患者5例.分别采用流式细胞学、细胞RNA提取和RT-PCR等技术,检测实验对象外周血单核细胞上的CD4、CD8、CD28和CD25等蛋白分子的表达情况,CD28 mRNA的含量以及外周血单核细胞中HBVDNA的存在情况.结果(1)乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞(CD4和CD8 T淋巴细胞)上CD28的表达低下,尤以CD8 T淋巴细胞更为明显(CD25/CD4为14.42%,CD28/CD8为7.39%);而正常对照组(CD28/CD4为24.57%,CD28/CD8为29.54%)和急性乙型肝炎组(CD28/CD4为26.25%,CD28/CD8为18.42%)则均有较高的表达.其与乙肝病毒携带者的结果相比较,有着显著或非常显著之差异(P＜0.05,P＜0.01).同时,通常用于表示T淋巴细胞激活状态的CD25在乙肝病毒携带者的外周血T淋巴细胞上的表达也低下(CD25/CD4为9.10%,CD25/CD8为7.93%),特别是以CD8T淋巴细胞上的表达低下尤为明显.其与正常对照组的相应结果(CD25/CD4为4.2%,CD25/CD8为1.48%)相比较,差异显著或极为显著(P＜0.05,P＜0.01).(2)乙肝病毒携带者外周血单核细胞内CD28 mRNA的水平也较正常对照组的更低.(3)乙肝病毒携带者外周血单核细胞中HBVDNA的检出率(60.0%)明显高于正常对照组(0%),两者相比差异极为显著(P＜0.01).结论乙型肝炎病毒持续感染者的外周血中T淋巴细胞,尤其足CD8 T细胞上的激活受体CD28表达水平较正常人明显降低,其细胞中CD28 mRNA水平也降低,均可能造成T淋巴细胞激活所必需的第二信号产生减少,使T淋巴细胞的激活受影响,导致机体细胞免疫功能降低.从而诱导机体对乙型肝炎病毒感染免疫耐受的产生.造成乙肝病毒感染持续存在,迁延不愈.而HBV对T淋巴细胞的感染可能是造成其细胞上CD28表达水平低下的原因之一.
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肺癌患者外周血中T淋巴细胞及亚群CD28的表达变化分析
目的 分析肺癌患者外周血中的T淋巴细胞和亚群CD28表达变化.方法 选择2014年2月-2015年2月收治的肺癌患者64例作为研究组,选取同期接受健康体检的70名健康人为对照组.所有对象均行三色免疫荧光标记流式细胞术检测,分析其T淋巴细胞及亚群CD28的表达情况.计量资料采用t检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 研究组CD3+、CD4+、CD8+细胞、CD4+ CD28+、CD8+ CD28+、CD8+ CD28-T细胞亚群分别为(48.20±13.11)％、(29.78±6.30)％、(15.39±6.60)％、(43.80±14.21)％、(16.90±4.02)％、(20.40±7.18)％,对照组分别为(59.03±8.69)％、(35.60±8.27)％、(24.09±7.30)％、(55.20±12.02)％、(20.69±4.88)％、(11.79±8.10)％,两组比较差异均有统计学意义(t =5.681、4.550、7.212、5.028、4.881、6.487,均P＜0.05).结论 对肺癌患者进行外周血T淋巴细胞及亚群CD28表达的测定可帮助了解其机体免疫水平、疾病情况和抗肿瘤能力,对其临床诊治具有重要价值.
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带状疱疹患者外周血淋巴细胞B7/CD28的表达
目的: 检测带状疱疹患者外周血淋巴细胞表面(PBLC)协同刺激信号B7/CD28的表达.方法: 利用流式细胞仪检测35例带状疱疹患者外周血淋巴细胞表面的CD80、CD86及其受体CD28的表达,并以20名正常人作为对照.结果: 带状疱疹患者外周血淋巴细胞表面CD80、CD86及其受体CD28的表达水平显著低于正常对照(P<0.05);不同病情组间的表达无统计学差异.结论: 带状疱疹患者外周血淋巴细胞表面CD80、CD86及其受体CD28的表达下调,通过影响B7/CD28协同刺激通路,抑制T细胞尤其CD4+T细胞活性功能,参与带状疱疹的发病.
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窄谱UVB治疗对银屑病患者外周血单一核细胞CD28和CD80表达的影响
目的: 观察311 nm窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常型银屑病后对患者外周血单一核细胞(PBMC)CD28和CD80表达的影响.方法: 50例患者采取NB-UVB照射治疗,利用流式细胞仪检测光疗患者PBMC中CD28和CD80水平.结果: 光疗前患者PBMC中CD28和CD80阳性细胞数较正常人显著升高(P＜0.01),光疗后患者PBMC中CD28和CD80阳性细胞数较光疗前显著下降(P＜0.01,P＜0.05).结论: NB-UVB治疗可下调寻常型银屑病患者外周血单一核细胞CD28和CD80表达,这可能是NB-UVB治疗寻常型银屑病的机制之一.
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CD28噬菌体展示载体的构建及鉴定
目的:构建CD28分子胞外区噬菌体展示载体,并对其展示的CD28抗原性进行检测.方法:采用RT-PCR方法扩增CD28胞外区,将其重组于噬菌粒载体pComb3HSS,构建的重组载体与辅助噬菌体VCSM13共转染受体菌,使CD28胞外区展示在噬菌体表面.用ELISA和流式细胞仪检测展示在噬菌体上CD28的抗原性.结果:成功构建了CD28的重组噬菌体展示载体pComb3HSS-CD28.噬菌体展示的CD28可与抗CD28抗体结合,也可与Jurkat T细胞表面的CD28竞争性结合抗CD28的抗体.结论:噬菌体展示的CD28具有抗原性.
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B7-CD28共刺激通路与系统性红斑狼疮的相关性研究
目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞(PBLC)CD28、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)的表达及其意义,探讨SLE患者共刺激通路是否异常.方法 采用流式细胞仪检测30例SLE患者外周血淋巴细胞的CD28、B7-1及B7-2,并以15例正常人作为对照.结果 SIE患者外周血淋巴细胞中B7-1的表达水平与正常对照组差异无显著性,而B7-2的表达水平明显低于正常对照组(P＜0.01);SLE患者外周血淋巴细胞中CD28的表达水平明显低于正常对照组(P＜0.05).结论 SLE患者PBLC上的B7.2及CD28的表达降低,影响B7-CD28共刺激通路,可能与SLE的发病有关.
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急性乙型肝炎患者外周血CD28分子的表达
目的 探讨CD28分子在急性乙型肝炎发病过程中的表达机制.方法 按病人选取标准选取40例病人和10例健康查体者,每例取外周血5ml,应用流式细胞仪检测病人外周血中CD28+细胞所占比率.应用ELISA法检测急性乙型肝炎之间CD28+/CD8+T,CD28+/CD4+T表达的差异.结果 急性乙型肝炎病人CD28+细胞所占比例显著高于健康对照组和慢性乙型肝炎组,差别有统计学意义(P＜0.01).结论 急性乙型肝炎病人CD28分子表达强弱与HBV感染密切相关,CD28+ 淋巴细胞对清除HBV感染有重大意义.
