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程控降温与非程控降温冷冻法对脐带血干祖细胞影响的研究
本研究旨在探讨不同冷冻方法 是否会对脐带血中干祖细胞产生影响.主要采用羟乙基淀粉离心沉淀的方法,去除成熟红细胞及血浆,收集有核细胞悬液,并分别采用标准的程控降温及非程控降温方法 对有核细胞悬液进行冷冻保存,对冷冻前后的细胞悬液进行有核细胞总数检测,CD34+细胞检测,细胞活力以及各系祖细胞集落形成单位检测等.结果:经过对两种冷冻方法 比较:脐带血中有核细胞总数回收率,细胞活率,CD34+细胞回收率,祖细胞集落形成单位的回收率无明显差别.结论:在目前的情况下,两种冷冻方法 都可以进行脐带血标本的深低温冷冻保存.
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深低温保存机采血小板MPV和回收率的检测分析
经过长期临床实践证明,输注血小板可降低再生障碍性贫血、白血病和实体瘤患者血小板减少的发病率和死亡率.用血细胞分离机从单一献血者一次采集足够治疗量的血小板,可以降低受血者同种异体免疫和疾病感染风险.近年来,许多学者对机采血小板的冷冻保存方法做了深入研究[1-3],笔者检测并分析了-80℃非程控降温冷冻保存过程对机采血小板平均血小板体积(MPV)和冻-融回收率的影响,以期建立并完善一项改良机采血小板冷冻保存和融后使用技术,进一步提高冻存机采血小板的存活力和功能的完整性.
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非程控降温保存在自体干细胞移植中的临床疗效观察
我们采用非程控降温保存技术,保存造血干细胞,用于非何杰金淋巴瘤的自体干细胞移植,取得了理想的疗效,现报道如下.
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非程控降温保存造血干细胞在其自体移植中的临床应用
近年来,外周血造血干细胞移植在国内外已得到广泛应用,而体外保存过程中有效地保证造血干细胞的活力是移植成功的关键.非程控降温保存造血干细胞在国内报道较少[1,2].2001年11月～2004年11月,我们采用非程控降温保存技术保存造血干细胞,用于非霍奇金淋巴瘤的自体干细胞移植,取得了理想的疗效,现报告如下.
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-80℃非程控降温保存自体外周血干细胞的应用
目的:观察-80℃非程控降温保存自体外周血干细胞(PBSC)的应用效果.方法:常规方法动员外周血干细胞,血细胞分离机分离采集干细胞,120 g/L羟乙基淀粉、体积分数为10％的DMSO、体积分数为10％的AB型血浆为冷冻保护剂与干细胞以1∶1的比例混合,然后直接将其置于-80℃冰箱保存.测定保存前以及保存后不同时间的单个核细胞(MNC)、CD34+细胞、粒-单核细胞系集落形成单位(CFU-GM)的回收率以及细胞的台盼蓝拒染率.结果:经非程控直接冷冻保存15～720 d,PBSC的台盼蓝拒染率、MNC回收率的变化较小(P＞0.05),而CD34+细胞、CFU-GM回收率在冻存240 d后下降较明显(P＜0.05),但仍分别达82.5％、79.6％.21例患者经相应处理后,回输经-80℃下保存12～46 d(平均29 d)的干细胞,患者于干细胞回输后14～27 d(平均20.5 d)获得造血功能重建.结论:在采用终浓度为60 g/L羟乙基淀粉、体积分数为5％的DMSO及体积分数为5％的AB型血浆组成的冷冻保护剂情况下,-80℃非程控降温法适于PBSC的短期(240 d内)保存,效果理想.
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非程控降温-80℃冷冻保存外周血干细胞的活性观察
目的:观察非程控降温-80℃冷冻保存外周血造血干/祖细胞的活性,为临床自体外周血造血干细胞移植提供方便、有效的冻存方法.方法:常规方法动员外周血干细胞,CS-3000PLUS血细胞分离机采集干细胞,以10%二甲亚砜、10%人AB型血清、RPM11640 培养基为冷冻保护剂,2ml/管冻存干细胞,按第1、2、4周和第2、3月顺序复苏细胞并测定G M-CFU集落数、台盼兰拒染率和CD34+细胞百分率.结果:用该方法冷冻保存的外周血干细胞,在4周内其细胞活性与采集时的细胞活性无明显差别(P＞0.05),冻存至2～3个月时细胞活性则明显降低(P＜0.05).结论:应用血清和DMSO等作为冷冻保护剂、-80℃直接冻存的外周血干细胞,在4周内复苏后其细胞活性无明显降低.
