首页 > 文献资料
-
β-巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响
目的研究β-巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响.方法将18 d虫龄的日本血吸虫童虫细胞联合法接种于小盖玻片上.实验被随机分为4个组,分别为对照组、β-巯基乙醇组、肝基质组、β-巯基乙醇+肝基质联合处理组.培养第7天,对各组细胞进行核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)与乳酸脱氢酶(LDH)细胞化学染色,并结合图像分析比较4个组培养细胞的AgNORs水平及LDH活性.结果与对照组比较,肝基质组、β-巯基乙醇组、β-巯基乙醇+肝基质联合处理组培养细胞的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度以及LDH的平均光密度等4个参数均有不同程度升高(P＜0.01).其中,以β-巯基乙醇组培养细胞的4个参数升高显著,β-巯基乙醇+肝基质联合处理组次之,肝基质组升高幅度小.统计学分析显示,除β-巯基乙醇+肝基质联合处理组与β-巯基乙醇组之间的AgNORs及LDH平均光密度两两比较差异无显著意义(P＞0.05),其余组间3个参数两两比较差异均有显著意义(P＜0.01或P＜0.05).结论β-巯基乙醇与肝基质均能促进日本血吸虫培养细胞的增殖、代谢,但β-巯基乙醇的作用比肝基质显著;二者联合使用对培养细胞的增殖无协同作用.
-
肝纤维化
肝纤维化是各种原因所致肝损伤的共同结果.现代观点认为肝纤维化的发生是一个动态过程,是肝脏对损伤的一种创伤愈合反应.其过程主要涉及肌成纤维样细胞的动员和局部增生以及肝基质的再塑.肝纤维化研究中主要的进展之一是认识到肝星状细胞(HSC)在肝损伤和损伤修复中发挥中心作用.随着分子探针、细胞产物、HSC纯化和培养技术的发展,对肝纤维化分子机制的认识已取得了很大的进展.本文重点就现今有关肝纤维化的一些认识,如HSC的作用、肝纤维化的细胞介质和基质成分的变化等内容作一综述.
-
肝基质对日本血吸虫培养细胞生长的影响
目的研究肝基质对日本血吸虫培养细胞形态、增殖的影响.方法联合法将虫龄为21 d的日本血吸虫童虫细胞接种于预先铺敷有肝基质(实验组)和未铺敷肝基质(对照组)的小盖玻片上,培养于常规培养基中,用高碘酸雪夫(PAS)法染色培养细胞,Olympus-BH2显微镜下观察并拍照;并将接种第3天的实验组和对照组培养细胞用胶银法进行核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)染色,HPIAS 2000图像分析仪测定AgNORs平均光密度值进行图像分析.结果实验组中的培养细胞其细胞质突起和分裂细胞增多,AgNORs的平均光密度值显著高于对照组细胞(P＜0.01).实验组的细胞分裂方式除常见的一分为二方式外,还观察到一分为三的多极分裂方式;而对照组未观察到分裂细胞.结论肝基质可明显影响日本血吸虫培养细胞的形态,显著促进培养细胞的增殖.
-
肝基质与MNNG对日本血吸虫成虫培养细胞糖细胞化学作用的研究
目的研究肝基质与甲基硝基亚硝基胍(MNNG)对日本血吸虫成虫培养细胞糖类物质的影响.方法日本血吸虫成虫细胞分别接种于普通小盖玻片(实验1组)和铺敷有肝基质的小盖玻片上(随机分为实验2组和3组),培养于含20%小牛血清及常量抗生素的RPMI-1640常规培养基中.培养第4d,实验1组和3组细胞分别在含3μg/ml MNNG的常规培养基中培养48h,彻底清洗后继续用常规培养基培养;实验2组细胞用不含MNNG的常规培养基处理相同时间.培养第4w,均换用含5%小牛血清的低血清培养基培养.培养第5～7w,每周取各组细胞进行高碘酸雪夫(PAS)染色和唾液淀粉酶处理后的PAS染色,观察培养细胞内糖类物质的含量及分布变化.取培养第6w(MNNG作用后第5w)的各组染色细胞,用HPIAS-2000图像分析仪测定细胞内代表糖含量的光密度,并作统计学分析.结果实验3组细胞与实验1、2组比较,PAS染色显示的四种类型细胞其着色均显著增强,淀粉酶处理后的PAS染色显示细胞内糖原含量增多,差异均具显著性(P＜0.01).培养过程中,第二类细胞数目逐渐增多,体积增大;分裂细胞增多.这种状况在MNNG处理后第5w为明显.结论肝基质和MNNG联合可显著增强日本血吸虫培养细胞的糖代谢和分裂增殖能力,二者具协同作用能力.
-
鼠胚胎成纤维细胞饲养层及其与肝基质联合对日本血吸虫童虫培养细胞LDH、ACP影响的研究
目的以乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)为评价指标,研究鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层及其与肝基质联合对日本血吸虫童虫培养细胞代谢的影响.方法实验分MEF与肝基质联合组(后简称联合组)、MEF组、肝基质组和对照组4组.联合组与肝基质组预先铺敷肝基质,MEF组和对照组未铺敷肝基质,将虫龄21 d的日本血吸虫童虫细胞分别接种于预先铺敷或未铺敷肝基质的小盖玻片上.肝基质组和对照组细胞培养于RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素的常规培养基中,联合组与MEF组的细胞培养于有MEF饲养层的常规培养基中.培养第7d,运用酶细胞化学方法对日本血吸虫童虫培养细胞进行LDH、ACP染色,Olympus BX-51显微镜下观察并拍照,HIPAS-2000图像分析仪测定其含量,并作统计分析.结果 4组童虫培养细胞其LDH、ACP活性不同.LDH、ACP着色按联合组、MEF组、肝基质组、对照组依次变浅.定量分析显示,培养细胞的LDH含量,各组之间两两比较差异具显著性(P<0.01);联合组、MEF组、肝基质组培养细胞的ACP含量两两比较存在显著差异(p<0.01),联合组、MEF组与对照组之间比较差异具统计学意义(P<0.01),而肝基质组与对照组之间差异无显著性(P>0.05).结论 MEF饲养层能促进日本血吸虫童虫培养细胞的代谢,并能与肝基质协同促进培养细胞代谢.
关键词： 日本血吸虫童虫细胞培养 MEF饲养层 肝基质 乳酸脱氢酶 酸性磷酸酶 -
肝基质和MNNG对日本血吸虫成虫培养细胞糖细胞化学作用的研究
本文主要研究肝基质和MNNG共同作用对日本血吸虫成虫培养细胞增殖及细胞内糖类物质的影响.方法:将虫龄为32天的日本血吸虫成虫细胞,分别接种于普通盖玻片(实验Ⅰ组)和铺敷有肝基质的盖玻片上(随机分为实验Ⅱ和Ⅲ组),细胞培养基为RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素.培养第4天,实验Ⅰ组和Ⅲ组细胞分别在含3μg/ml MNNG的培养基中培养48小时,彻底清洗后继续用含20%小牛血清的RPMI-1640培养.实验Ⅱ组细胞用不含MNNG的培养基处理相同时间.
-
细胞移植替代肝脏移植的潜力
人肝细胞移植用于治疗肝源性代谢缺陷和急性肝衰竭已显示出在早期有望改善肝功能,但是其作为长期有效的治疗还未取得成功.运用干细胞移植替代肝脏移植来恢复人体肝功能至今也尚未成功.目前,正在将干细胞作为肝细胞移植的细胞源加以研究.肝脏的肝细胞外基质为干细胞分化成肝细胞以及细胞移植提供了理想的支架材料,新颖的肝脏脱细胞后得到肝细胞外基质的技术为肝细胞的成熟和移植提供了潜力巨大的支架材料,并促进了可移植入体内的工程再造肝脏的发展.
关键词： 肝脏移植 肝细胞移植 干细胞移植替代肝脏移植 肝基质
