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FOXC2调控DLL4／Notch1信号通路对乳腺癌MCF-7细胞血管生成的影响
目的：探讨转录因子 FOXC2对乳腺癌 MCF-7细胞血管生成的影响，阐明 FOXC2促进肿瘤血管生成的作用机制。方法：应用 FOXC2慢病毒基因转染技术将 FOXC2基因和空载体基因分别转染至乳腺癌 MCF-7细胞株中，获得稳定转染细胞株；实验分为未转染组、空载体组和过表达组。采用 Matrigel基质胶血管形成实验和Transwell小室实验检测各组细胞上清作用下人脐静脉内皮细胞（HUVECs）成管能力和迁移能力，RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中 FOXC2、DLL4和 Notch1 mRNA和蛋白表达。结果：与未转染组和空载体组比较，过表达组 MCF-7细胞上清诱导 HUVECs闭合小管数和迁移细胞数增加（P＜0.05）；FOXC2、DLL4和Notch1 mRNA和蛋白相对表达水平明显增加（P＜0.05）。结论：MCF-7细胞中过表达 FOXC2能显著增加HUVECs的成管能力和迁移能力，其机制可能是通过 Notch信号通路来实现的。
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人长链非编码RNA基因H19克隆、表达载体构建及对MCF-7细胞增殖的影响
目的：克隆人长链非编码 RNA H19基因，构建表达载体，研究 H19表达对 MCF-7增殖的影响作用。方法制备乳腺癌 MCF-7细胞总 RNA，RT-PCR 扩增长链非编码 RNA H19全长序列，分子克隆至 pcDNA3．1（－）真核表达载体；分别转染 HEK-293T 和 COS 7细胞并行 Real-time qPCR 验证载体构建是否成功；转染 H19表达载体入 MCF-7细胞株，转染0、24和48 h 后行 MTS 检测 H19表达，同时设计 siRNA 小分子片段干扰 H19的表达，观察对 MCF-7细胞增殖活性的影响。结果成功克隆和构建了 hH19-pcDNA3.1（－）表达载体；转染入 MCF-7细胞48h 后，H19过表达，MTS 检测 H19表达载体组吸光度明显高于空载体组和空白对照组；而转染H19 siRNA 小分子片段后能干扰其表达，同时抑制细胞增殖。结论H19过表达能够促进乳腺癌 MCF-7细胞增殖。
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miR -21通过调控 PTEN 介导乳腺癌他莫昔芬耐药的作用机制
目的：研究 miR -21在乳腺癌他莫昔芬耐药中的作用，寻求逆转他莫昔芬耐药的靶点。方法：荧光实时定量 PCR（RT - QPCR）检测乳腺癌 MCF -7细胞与乳腺癌他莫昔芬耐药细胞株 MCF -7/ TAM 细胞中miR -21的表达；将 miR -21 mimics 转染到 MCF -7细胞内，将 miR -21 inhibitors 转染到 MCF -7/ TAM 细胞内，并应用 RT - QPCR 分别检测细胞内 miR -21的表达变化，给予细胞4-羟他莫昔芬（4- hydroxytamoxifen， OHT）处理后，利用 MTT 法检测细胞增殖的变化；转染 MCF -7/ TAM 细胞 miR -21 inhibitors 及 mimics，利用RT - QPCR 检测细胞中 PTEN 的表达变化。结果：miR -21在 MCF -7/ TAM 细胞表达高于 MCF -7细胞，转染 miR -21 mimics 的 MCF -7细胞 miR -21高表达，PTEN 表达降低，转染 miR -21 inhibitors 的 MCF -7/TAM 细胞 miR -21表达降低，PTEN 表达增高；过表达 miR -21的 MCF -7细胞给予 OHT 处理后，细胞的增殖抑制不明显，而沉默 miR -21的 MCF -7/ TAM 细胞给予 OHT 处理后，细胞增殖明显受到阻滞；转染耐药细胞 miR -21 inhibitors 后，PTEN 表达增高，转染 miR -21 mimics 后，PTEN 表达降低。结论：miR -21通过调控PTEN 的表达在乳腺癌 TAM 耐药中发挥重要作用。
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用细胞学方法评价10种抗生素的寒热药性
目的：评价10种常用抗生素的寒热药性。方法用噻唑蓝(MTT)比色法检测10种常用抗生素对 SMMC7721以及 MCF-7细胞体外增殖的影响，并用倒置显微镜观察其对细胞形态特征的影响。结果氨苄西林、头孢克肟、头孢泊肟酯、头孢克洛、头孢氨苄、阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素、多西环素、土霉素共10种抗生素均表现为寒性。形态学观察也表明这些药物可使细胞密度减小，固缩变圆。结论细胞学方法能够用于西药寒热药性的评价，这为西药中药化提供了一种简单实用的评价寒热药性的方法，必将促进西药中药化研究的进程。
