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时间分辨荧光免疫技术在乙型肝炎病毒血清学检测中的应用
我国是乙型肝炎病毒(HBV)的高感染国家,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的携带者约占10%,而且HBV是引起肝硬化和肝癌的主要原因[1].因此HBV标志物的变化是评估感染后病情转归的重要依据,也是抗病毒治疗的考核指标之一.传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)具有方法简单、快速、方便等优点,因而在临床上广泛使用[2].但其受到无法定量,相对灵敏度低等无法完成HBV感染的动态监测,及低水平HBV感染的指标检测等缺点,无法满足临床医学迅速发展的客观要求.时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)是一种特异性高、灵敏度强、可定量分析的方法,对乙型肝炎的诊断、药物疗效及病情动态监测具有重要意义[3].本文采用ELISA和TRFIA同时对我科收集的185例血清进行测定,报告如下.
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HBsAg阳性母亲所生儿童预防接种乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白后仍有较高的隐匿性乙肝病毒感染的发生率
隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染作为一种临床疾病已经得到很好的认识,其特征为血清和(或)肝脏中的HBV-DNA为阳性而血中HBsAg为阴性,诊断取决于HBsAg和HBV-DNA检测的相对灵敏度。为了探讨高危儿童接受免疫预防后隐匿性HBV感染的发生率,本研究纳入75例儿童作为受试对象,其母亲均为HBsAg阳性,且出生后接受乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白的免疫预防方案。对这75例儿童的血清采用实时聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA,随后用敏感的标准PCR对样品进行了检测,后者带有独立的全HBV基因组引物,并且采用直接序列测定法进行分析。结果:28%(21/75)的儿童中可检测到HBV-DNA,所测值介于77~9240 copies/ml。所有样本的抗-HBs均为阳性。24%(5/21)儿童的抗-HBc为阳性,但没有发现抗-HBc单一阳性的儿童。38%(8/21)儿童没有突变。62%(13/21)的感染儿童至少含有一个突变,其所在的区域与功能性和(或)免疫性表位活性有关,10个儿童有G145R突变。由此研究人员得出结论,HBsAg阳性母亲所生的儿童中隐匿性HBV感染的发生率较高,HBsAg阴性并不能完全除外HBV-DNA的存在。以上发现强调了低流行地区中隐匿性HBV感染的重要性。