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NGF基因转染骨髓间充质干细胞治疗脑出血的分析
目的 研究NGF基因转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)对脑出血大鼠运动功能的改善效果.方法 制作Wistar大鼠尾状核脑出血模型,随机分为A组:脑出血模型组;B组:细胞培养液移植组;C组:BMSCs移植组;D组:NGF基因修饰的BMSCs移植组,4组于移植后1、7、14、28 d进行神经功能缺损评分,并经免疫组织化学鉴定了解移植细胞在大鼠脑内的生存及分化情况.结果 C、D 2组的大鼠运动功能改善好于A、B组,并且D组改善又好于C组,免疫组化显示移植细胞生长良好,并且在血肿灶周围聚集融合,免疫荧光双标证实被移植细胞在脑内分化为神经元、星型胶质细胞.结论 NGF基因修饰的BMSCs移植治疗能显著改善脑出血动物的运动功能,是一种很有发展前途的方法,值得进行更深入的研究.
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高原环境下兔眼球钝挫伤后视网膜NGF和Nogo表达的调控
眼球钝挫伤约占眼外伤的1/3.轻度挫伤可引起视网膜震荡,重度者可导致视网膜挫伤,使视网膜的外屏障功能破坏,视力明显下降.研究表明[1],高原环境下眼球钝挫伤后视网膜代谢微环境中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达水平降低,而神经生长抑制因子-勿动蛋白(nogo protein,Nogo)的表达升高,对视网膜的损伤修复产生不利影响.本研究在高原环境下构建兔眼球钝挫伤模型,观察视网膜钝挫伤修复过程中NGF和Nogo表达水平的变化,探讨其变化规律,为高原环境下视网膜钝挫伤的治疗提供理论依据.
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艾灸预处理对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区NGF及其受体TrkA表达的影响
目的 探讨艾灸预处理防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制.方法 健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、假手术组、模型组和预艾灸组.双侧海马一次性注射聚集态Aβ25-35制作AD模型,艾灸"百会"、"肾俞"、"足三里"进行防治,免疫组化SP法观察大鼠海马CA1区NGF及其受体TrkA的表达及艾灸干预的影响.结果 与正常组及假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区NGF及TrkA的表达明显下降,表现为阳性神经元平均灰度值明显上升(P<0.01);与模型组比较,预艾灸组大鼠海马CA1区NGF及TrkA的表达明显增加,表现为阳性神经元平均灰度值明显下降(P<0.01).结论 预艾灸治疗可显著增加海马CA1区NGF及TrkA的表达,从而改善脑内神经元的损伤,起到保护脑细胞的作用.
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神经节苷脂神经生长因子促进周围神经再生的实验研究
目的 研究神经生长因子(Nerve Growth Factor, NGF)联合神经节苷脂(GangliosideM1,GM1)对周围神经再生的作用.方法 硅胶管套接大鼠坐骨神经,将NGF、GM1、生理盐水、GM1+NGF混合液分别加入硅胶管内,术后4周、8周行组织学观察.结果 实验组再生神经有髓神经纤维、髓鞘厚度均高于对照组,GM1+NGF组均高于其他三组,差异有显著性(P＜0.01).结论 NGF、GM1能促进运动神经元轴突再生.GM1介导NGF促进运动神经元轴突再生,表现出良好的生物学效应.
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NGF预防大鼠额叶皮质损伤后基底前脑胆碱能神经元变性
目的为了观察神经生长因子(NGF)对大鼠额叶皮质损伤后基底前脑胆碱能神经元变性的预防效果.方法24只SD大鼠,随机平均分为3组:①实验组(NGF),②对照组(等容量的生理盐水),③正常组(假手术).用外科手术造成双侧额叶皮质局限性损伤.动物的学习、记忆机能及基底前脑含乙酰胆碱酯酶(ACE)活性神经元则分别用Y型迷宫和组织化学方法进行检测.结果额叶皮质损伤4周后,动物的学习、记忆机能明显下降(P<0.01),基底前脑含AChE活性神经元明显减少(P<0.01).NGI治疗可有效地防止额叶皮质损伤大鼠学习、记忆障碍的发生及基底前脑含AChE活性神经元的减少(P<0.05).结论NGF对双侧额叶皮质损伤大鼠的学习、记忆机能障碍及基底前脑胆碱能神经元变性有预防效果.
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酸性肽对AD大鼠学习记忆能力及Aβ表达的影响
目的:研究酸性肽(acidic peptide,AP)对AD大鼠学习记忆能力及Aβ表达的影响.方法:雄性SD大鼠84只,随机分成7组,每组12只.Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ组为AD模型组,Ⅲ组为AD模型+生理盐水组,Ⅳ组为AD模型+谷氨酸0.3g/kg治疗组,V组为AD模型+AP15 mg/kg治疗组,Ⅵ组为AD模型+AP30mg/kg治疗组,Ⅶ组为AD模型+AP 60 mg/kg治疗组.采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术,用鹅膏蕈氨酸(IBO)损毁大鼠双侧基底核(nbM),建立AD动物模型,手术后用不同剂量AP对AD大鼠进行治疗,测定与学习、记忆有关的行为学指标及脑内与AD密切相关的AB水平的变化.结果:与模型组相比,酸性肽高、中剂量组均能显著提高AD大鼠的学习、记忆能力,并能显著降低Aβ的沉积.结论:AP能减少皮质中AB的沉积,对AD具有治疗作用.
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成年SD大鼠的NGF药代动力学研究
采取静脉注射和皮下注射两种给药方式,对清洁级成成年SD大鼠分别于给药后不同时间采取尾静脉血,通过双抗体夹心型ELISA方法检测了血清NGF的含量,并求出了得主要药代动力学参数.
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COPD合并抑郁症患者血清NGF、S100B蛋白水平的观察
目的:探讨COPD合并抑郁症患者血清NGF(人神经生长因子)、S100B蛋白浓度与健康人比较有无差异.方法:采用酶联免疫(ELISA)方法检测20例诊断为COPD合并抑郁症肺脾气虚证患者、20例肺肾两虚证患者以及20例健康人血清NGF、S100B蛋白浓度,比较3组间血清NGF及S100B蛋白浓度的差异.结果:肺脾气虚证组、肺肾两虚证组NGF、S 100B蛋白浓度高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);肺脾气虚证组和肺肾两虚证组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:COPD合并抑郁症患者血清NGF及S100B浓度都高于正常对照组;肺脾气虚证组和肺肾两虚证组相比差异无统计学意义.
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GM1和NGF对神经干细胞体外增殖的影响
目的 探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)、鼠神经生长因子(NGF)对神经干细胞(NSCs)体外增殖的影响.方法 ①体外分离培养NSCs;②将含有表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的NSCs完全培养基及不含bFGF、EGF的DMEM/F12培养基作为两种不同的培养介质,分别加入不同浓度的GM1和NGF,进行NSCs体外增殖研究;③以MTT法和细胞球计数观察NSCs增殖情况;以免疫组化法观察分化条件下药物对NSCs增殖的影响.结果 ①在含有bFGF、EGF的NSCs完全培养基中,较高浓度GM1条件下,NSCs增殖明显(P<0.05);②含血清的分化培养液中,随GM1浓度增加,NSCs增殖明显;随NGF浓度增加,神经元及胶质细胞比例增高.结论 高浓度GM1能促进NSCs增殖,NGF能促进NSCs分化.[中国当代儿科杂志,2009,11(10):841-845]
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神经生长因子和脑源性神经营养因子在脑胶质瘤内的表达
目的研究NGF(Never Growth Factor,神经生长因子)、BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor,脑源性神经营养因子)在脑胶质瘤内的表达,探讨它们与肿瘤病理分级、实体肿瘤部位的关系,以及它们在肿瘤发生过程中的作用.方法 通过免疫组织化学S-P染色方法检测70例胶质瘤和5例正常脑组织中NGF和BDNF的表达.结果 NGF和BDNF阳性细胞表达率明显高于正常脑组织内的表达,有统计学意义(P＜0.05);在不同病理级别胶质瘤之间阳性细胞表达率也有差异,分别是:Ⅰ级16.56%,11.24%;Ⅱ级32.45%,1 8.23%;Ⅲ级40.91%,21.44%;Ⅳ级24.71%,15.39%,正常脑组织内的表达率为7.06%,5.98%,且有统计学意义(P＜0.05).NGF和BDNF阳性细胞表达率在不同部位胶质瘤内各不相同,分别为:颞叶42.57%,24.19%;顶叶35.62%,20.09%;小脑28.67%,16.17%;额叶21.45%,12.42%,差异有显著性(P＜0.05).结论 NGF和BDNF在脑胶质瘤内高表达;NGF和BDNF阳性细胞表达与胶质瘤的病理级别、肿瘤部位有关;NGF和BDNF可能参与了胶质瘤的发生.
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大鼠脊髓全横断后TrkA和NGF在运动皮质的免疫组化研究
目的探讨脊髓全横断后神经营养因子及相应受体在运动皮质内的分布规律,为临床应用神经生长因子治疗脊髓损伤提供实验依据.方法用免疫组化方法和图像分析技术检测脊髓全横断后不同时相运动皮质内,神经生长因子(NGF)及其高亲和性受体TrkA的表达和分布.结果各组运动皮质中TrkA和NGF阳性神经元主要分布在第5层;脊髓全横断3 d后,运动皮质内TrkA表达上调,损伤后7 d到达高峰,21 d回到正常水平;NGF表达在损伤后7 d上调,峰值出现在损伤后7 d,21 d回到正常水平.结论 NGF表达增高迟于TrkA,提示在损伤早期给予外源性NGF可能有利于受损的皮质脊髓束神经元的存活与再生.
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NGF和BDNF在脊髓全横断后大鼠运动皮质的表达和分布
目的探讨脊髓全横断后神经营养因子在运动皮质内的分布规律,为临床应用神经生长因子治疗脊髓损伤提供实验依据.方法用免疫组化方法和图像分析技术检测脊髓全横断后不同时相运动皮质内,神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达和分布.结果各组的运动皮质中NGF和BDNF阳性神经元主要分布在第V层;脊髓全横断后NGF和BDNF的表达均增高,NGF的表达高峰在脊髓全横断后7天,21天回到正常水平;BDNF表达在脊髓横断后21天到达高峰,28天回至正常水平.结论脊髓损伤后大鼠运动皮质内NGF表达上调早于BDNF.
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NGF在哮喘大鼠模型中的表达及柴朴汤的干预研究
目的 通过观察NGF在哮喘大鼠模型中的表达变化,并用柴朴汤进行干预,探讨柴朴汤在哮喘大鼠中的治疗作用,为哮喘的预防及治疗提供进一步的思路.方法 健康SD大鼠40只,随机分为对照组、哮喘组、NGF-抗体组及柴朴汤组.以卵清白蛋白致敏及反复激发复制哮喘大鼠模型,柴朴汤及NGF抗体进行干预,常规切片观察气道内管壁厚度及气道平滑肌厚度;RT-PCR检测NGFmRNA的表达;免疫组化法检测NGF蛋白的表达.结果 哮喘组大鼠支气管及血管周围大量炎症细胞聚集,总气管壁、气管内壁及气道平滑肌增厚,肺组织NGFmRNA及NGF蛋白的表达增高,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).柴朴汤组及NGF-抗体组与哮喘组相比炎症细胞浸润程度下降,气道壁结构改变如平滑肌增厚减轻,气道重塑程度降低,大鼠肺组织内NGF蛋白的表达降低.结论 柴朴汤可减轻哮喘大鼠气道重塑,其机制可能与下调NGF的表达有关.
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Ⅲ型前列腺炎NGF与TNF-α的作用及相关性研究
目的 观察神经生长因子(NGF)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在Ⅲ型前列腺炎中的表达及相关性,并探讨其作用机制.方法 采用免疫组化检测HI型前列腺炎患者及健康男性前列腺液中NGF和TNF-α水平,并对数据进行统计学分析.结果 病例组NGF及TNF-α水平表达明显高于正常对照组(P<0.01),NGF水平与TNF-α呈正相关(r=0.42,P<0.01).结论 ①NGF和TNF-α可能在Ⅲ型前列腺炎的发生、发展过程中起重要作用.②前列腺液中NGF水平和TNF-α水平呈正相关,提示促炎性细胞因子(TNV-α等)与神经内分泌介质存在关联,这可能是Ⅲ型前列腺炎发病机制中的一个重要环节.
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人参皂甙对大鼠急性脊髓损伤的影响实验研究
目的探讨人参皂甙对大鼠急性脊髓损伤的疗效和作用机制.方法取60只SD大鼠,采用改良Allen's重物打击法制作SCI模型.显露后,切除T12的全椎板.将一10 g重物自5 cm高处垂直下落打击硬膜表面,致伤能量为50 g/cm,造成脊髓全瘫模型,分别给予人参皂甙、甲基强的松龙(methylprednisolon,MP)注射液治疗.于术后12 h,24 h,7 d,14d取脊髓测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素(ET)的含量及神经生长因子(NGF)的表达;脊髓行常规组织切片染色.结果损伤组脊髓中MDA升高,SOD减低,ET升高,而各治疗组上述指标均有改善,各组各指标比较差异有显著性(P＜0.01);组织学检查损伤组有神经细胞变性,坏死,各治疗组损伤程度减轻;人参皂甙引起了脊髓中表达NGF的雪旺细胞阳性细胞百分率升高,间接地促进了神经损伤的修复.结论早期使用人参皂甙对脊髓损伤有一定保护作用,在脊髓继发性损伤的修复中起着重要的作用.
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加味射干麻黄汤对小儿哮喘肺功能改善及血清LTD4、NGF炎性因子水平的影响
目的:选取2014年1月到2015年10月在贵州航天医院就诊的哮喘患儿,给予加味射干麻黄汤干预,探讨药物改善疾病的相关机制.方法:哮喘患儿随机分为观察组和对照组,观察组给予加味射干麻黄汤干预,对照组给博利康尼及可迪美干预,比较两组患儿干预后的中医中医症状评分、证候疗效临床疗效,肺功能及血清EOS比值和TNFα、IL-6、LTD4、NGF水平.结果:观察组患儿喘息、咳嗽、咳痰、胸闷及哮鸣症状评分及总积分显著低于对照组(P＜0.05);两组患者中医证候疗效和综合临床疗效差异无统计学意义(P＞0.05);观察组患者FEV1、FEV1％、PEF、PEF％均显著高于对照组(P＜0.05),EOS比值及血清IL-6、TNF-α、LTD4、NGF含量显著低于对照组(P＜0.05).结论:加味射干麻黄汤可调节哮喘患儿血清炎性因子LTD4、NGF水平及改善肺功能.
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施万样细胞对大鼠脊神经节NGF和BDNF表达的影响
目的 观察施万样细胞对坐骨神经损伤(sciatic nerve injury,SNI)大鼠脊神经节NGF和BDNF表达的影响,初步探讨施万样细胞对脊神经节的保护作用.方法 先将脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)诱导分化为施万样细胞并对后者进行鉴定,后将二者分别植入脱细胞神经移植物(ANA)中,构建组织工程神经.大鼠随机分为正常对照组、ADSC组和施万样细胞组.后两组建立SNI模型并用相应的组织工程神经桥接损伤的神经.术后4周采用Western Blot和Real-time PCR检测各组大鼠脊神经节神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白和mRNA的表达.结果 ADSCs能够诱导分化为施万样细胞并表达施万细胞标记物S100β和GFAP蛋白.施万样细胞组大鼠脊神经节内NGF和BDNF蛋白及mRNA表达量均高于ADSC组(P<0.05).结论 施万样细胞可上调脊神经节NGF和BDNF的表达,对SNI所致的脊神经节内神经元损伤有保护作用.
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不同状态巨噬细胞对RSC96细胞NGF及Laminin表达的影响
目的 研究不同活化状态的巨噬细胞与雪旺细胞株(RSC96)共培养条件下雪旺细胞神经营养因子(NGF)及层粘连蛋白(Laminin,LN)的表达情况.方法 利用Transwell建立大鼠腹膜腔巨噬细胞和RSC96细胞的共培养体系,分别将RSC96细胞与未激活巨噬细胞、激活态巨噬细胞共培养；采用Real-time PCR检测、Western blot分析、以及酶联ELISA测定等研究手段,比较各组NGF及LN的表达差异. 结果 与未激活巨噬细胞共培养组RSC96细胞NGF表达增强,激活态组表达明显增强；而各组LN表达差异不明显. 结论 巨噬细胞对RSC96细胞NGF表达有促进作用,受其活化状态的影响,激活状态的巨噬细胞的促进作用更明显；对影响RSC96细胞迁移功能的LN的表达作用不明显,无统计学意义,有待进一步研究.
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复合FK506/NGF/RGD缓释膜应用于同种异体神经移植的实验研究
目的:探讨复合FK506/NGF/RGD缓释膜对冷冻处理下的同种异体神经的移植效果.方法:选择SD大鼠作为动物模型.在建市动物模型3周前取8只SD大鼠作为供体,切取双侧坐骨神经,冷藏于-196℃液氮中.另取40只SD大鼠随机分为:A单纯冷冻异体神经移植组;B冷冻异体神经联合应用FK506/RGD缓释膜移植组;C自体神经移植组;D冷冻异体神经联合应用FK506/NGF/RGD缓释膜移植组.术后12周进行大体观察、电生理、小腿三头肌恢复率、组织学、超微结构等测定.结果:术后12周内,4组大鼠均未发生急性移植排斥反应.D组运动神经传导速度和肌肉湿重恢复率明显优于A、B、C组(P<0.05).组织学测定发现D组移植段神经纤维形态为饱满,神经纤维直径大,髓鞘厚,成熟度高.结论:复合FK506/NGF/RGD缓释膜能更有效地促进神经生长.
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周围神经损伤后雪旺细胞生存与凋亡的动态平衡
周围神经损伤后雪旺细胞增殖,轴突再生.雪旺细胞在周围神经损伤再生时至关重要.本文综述雪旺细胞在周围神经损伤后生存和凋亡的调节:①大量分泌NGF,②表达P75,③分泌IGF-2、PDGF-BB、NT-3及CNTF,④假设在增殖的雪旺细胞群中存在着维持其生存和凋亡的动态平衡.进一步提出是否需重新评价外源性NGF在周围神经中促进轴突再生的价值的问题.
关键词： Schwann cells NGF p75 凋亡 神经再生
