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胜利油田702名采油作业工作人员麻疹抗体水平调查
目的 查明胜利油田采油作业工作人员麻疹保护性抗体水平,为防治麻疹提供科学依据.方法 随机抽取采油工作人员702名,采用间接酶联免疫法(ELISA)检测麻疹IgG抗体进行麻疹保护水平评价.结果 702名调查对象中,具有人群保护水平的抗体为36.9％,性别差异无统计学意义(x2=0.1,P＞0.05),不同年龄间差异有统计学意义(x2=16.61,P＜0.01).明确免疫史人群与无免疫史或免疫史不详人群比较,抗体水平差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 人群保护性抗体水平较低,不能形成有效的保护屏障.因此,必须加强对人群的麻疹疫苗接种工作,尤其是20 ～30岁年龄组工人.
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汉滩病毒截短核蛋白在大肠杆菌中表达及其抗原分析
目的体外克隆表达肾综合征出血热病毒部分核蛋白编码基因,筛选病毒核蛋白在人体体液应答中的主要抗原决定簇区,以期获得高质量核蛋白抗原,为研制新型HFRS基因工程诊断试剂奠定基础.方法利用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶酶切的方法分离汉滩病毒76-118S片段部分编码基因(SA、SB和SC),并分别克隆入T7原核表达载体,在大肠杆菌中表达;免疫印迹试验和酶联免疫吸附反应分析重组抗原活性.结果截短核蛋白得到有效表达,分子量分别约为4.5KD(rSA)、2 5kD(rSB)和15.5kD(rSC),Western-blot分析表明25kD截短核蛋白具有较好的抗原活性;粗提抗原Dot-ELISA方法检测HFRS患者血清结果与IFA法一致;25kD重组小片段抗原与抗HFRSV单克隆抗体5H5、B11及H7可发生特异性反应.结论汉滩病毒核蛋白的主要抗原决定簇主要集中在氨基端;原核表达的截短核蛋白在HFRSV感染的血清学诊断中具有一定的价值.
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去氢甲睾酮单克隆抗体的制备与鉴定
目的:制备去氢甲睾酮(DMT)的单克隆抗体(mAb),为采用免疫法分析食品中该激素的残留提供基础.方法:通过采用碳二亚胺法合成的完全抗原DMT-KLH免疫BALB/c小鼠,经过效价测定,ELISA方法建立,细胞融合、筛选和亚克隆,建立了去氢甲睾酮mAb杂交瘤细胞株,并采用ELISA方法测定mAb纯化后的效价、IC50、交叉反应率和抗体亲和力等参数,以及对猪肉样品中的DMT加标含量进行测定.结果:经过3次亚克隆成功建立1株分泌去氢甲睾酮mAb的杂交瘤细胞株,纯化后抗体的蛋白浓度为0.87 mg/mL,效价为1∶32 000,IC50值为7.57 μg/L,亲和常数为3.09×109L/mol与丙酸睾酮酯、群勃龙的交叉反应率均小于1％,猪肉样品中平均加标回收率为97.73％.结论:成功筛选到分泌DMT mAb的杂交瘤细胞株,并对其产生的mAb的效价、IC50值、特异性、稳定性、IgG亚类和亲和力等特性进行了鉴定,为下一步开展DMT免疫学检测方法研究奠定了基础.
