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大鼠睾丸间质祖细胞移植的实验研究
目的 探讨去势大鼠模型进行睾丸间质祖细胞(progenitor leydig cell,PLC)移植的可行性.方法 制作去势大鼠模型,将经过体外培养、鉴定的PLC移植入肾包膜内,采用RT-PCR及磁分离均相酶联免疫(磁酶免)睾酮定量测定法等技术方法观察其移植后生长分化情况.结果 移植后受体血清睾酮浓度明显高于同期去势对照组(P<0.01).移植12周后实验组精囊的长度和相对重量明显高于对照组(P<0.01).RT-PCR定量检测促黄体生成素受体(LHR)mRNA,对照组阴性表达,实验组第4周LHR mRNA表达较第8周及第12周低(P<0.01),第8周组与第12周组LHR表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 移植的PLC在去势大鼠的肾包膜内可以存活,且逐渐生长分化成熟,可在一定程度弥补生殖功能不足.
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大鼠睾丸间质祖细胞的原代培养及生长状况观察
目的 建立一种睾丸间质祖细胞的纯化培养方法,为细胞移植治疗男性腺功能低下提供实验参考.方法 分离、培养SD大鼠睾丸间质祖细胞(progenitor Leydig cell,PLC),采用酶组织化学染色鉴定,HE染色及电镜技术观察形态,MTT、磁分离均相酶联免疫(磁酶免)睾酮定量测定法观察其体外生长分化情况.结果 体外分离培养PLC,7 d内生长状态良好,第4~6天时细胞增殖快,第6天后,细胞纯度达90%以上.睾酮分泌量在培养24 h高,96 h后明显下降,第5天后趋于平稳.结论 经分离培养可获得纯度高、增值活性强的PLC.培养4~6 d的细胞适于移植.