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肝细胞/细胞学文献资料
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原代培养大鼠肝细胞分离方法的比较研究
目的探讨体外原代培养大鼠肝细胞的分离方法.方法以Wistar大鼠做为肝细胞供体,分别采用直接分离法与胶原酶消化法分离获取肝细胞并进行原代培养;以台盼蓝染色法测细胞存活率,在位相差倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测培养细胞活性,并检测不同时期培养上清液中白蛋白的含量.结果直接分离法获取的肝细胞活性及功能欠佳,而胶原酶消化法所获取的肝细胞形态完整、贴壁良好、活性高、功能强.结论经胶原酶消化分离获取肝细胞的方法优于直接分离法.
关键词： 肝细胞/分离与提纯 胶原酶消化分离/方法 肝细胞/细胞学 -
高表达过氧化物酶体增殖子激活受体γ诱导小鼠原代肝细胞发生脂肪变性
目的：研究外源过氧化物酶体增殖子激活受体（ PPAR ）γ高表达对小鼠原代肝细胞脂肪变性的影响。方法：从5～6周龄C57BL／6J小鼠分离培养原代肝细胞，分别用LacZ腺病毒（ Ad／LacZ）或PPARγ腺病毒（ Ad／PPARγ）感染细胞48 h，油红O染色检测原代肝细胞脂肪积聚情况；实时定量PCR和蛋白质印迹法分析PPARγ、成脂相关基因aP2和CideA等mRNA和蛋白表达水平。结果：原代分离培养的小鼠肝细胞透光度好，胞核圆且透亮，细胞呈圆形生长，有双核，连接成片状或岛状。用Ad／LacZ或Ad／PPARγ感染48 h后，Ad／LacZ组肝细胞几乎无脂肪积聚，而Ad／PPARγ感染肝细胞中有大量脂肪滴沉积。外源PPARγ刺激作用下，肝细胞中PPARγ、aP2、FGF21、CideA mRNA表达增加，而adiponectin mRNA表达下降（均P＜0.05）。 Ad／PPARγ感染后，PPARγ和aP2蛋白表达也增加。结论：高表达PPARγ诱导小鼠原代肝细胞脂肪变性和脂肪相关基因表达。
