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鞘内注射反义蛋白激酶Cγ寡核苷酸对慢性吗啡耐受大鼠痛觉过敏的影响
目的探讨鞘内注射反义蛋白激酶Cγ(PKCγ)寡核苷酸对慢性吗啡耐受大鼠痛觉过敏的影响.方法24只雌性SD大鼠随机分为四组,每组6只,分别为正常组、耐受组、正义组和反义组.正常组不行任何处理;耐受组、正义组和反义组每日2次分别于鞘内注射40μg吗啡,连续5 d,建立吗啡耐受模型.此后每日继续给予吗啡,耐受组、正义组和反义组经鞘内分别注入20 μl生理盐水、正义或反义的PKCγ寡核苷酸20μg,每日一次,连续6 d,断头处死大鼠,分离L2～6脊髓,RT-PCR方法检测脊髓PKCγ、PKCα的mRNA表达,Western blot法测定PKCγ、PKCα的蛋白表达.分别于置管前2 d、注射反义PKCγ寡核苷酸后2、4、5 d测定辐射热痛阈值.结果正常组、反义组注射反义PKCγ寡核苷酸后4、6 d痛阈值长于正义组(P＜0.05).四组脊髓背角PKCα mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).与耐受组比较,反义组脊髓背角PKCγmRNA和蛋白表达降低(P＜0.05).正义组和反义组脊髓背角PKCγ蛋白表达低于耐受组,反义组脊髓背角PKCγ蛋白表达低于正义组(P＜0.05).结论反义PKCγ寡核苷酸通过下调脊髓背角PKCγ蛋白的表达,能够逆转吗啡耐受大鼠痛觉过敏.
