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Chr20、Chr2上4个位点单核苷酸多态性与湖北汉族雄激素性脱发易感性的关系研究
目的 探讨Chr20上rs6047844、rs1160312和Chr2上rs9287638、rs7349332位点的单核苷酸多态性与湖北汉族雄激素性脱发易感性的关系.方法 采用病例对照研究,应用Sanger双脱氧直接测序法对50例雄激素性脱发患者(病例组)和49例健康对照者(对照组)rs6047844、rs1160312、rs9287638和rs7349332位点的单核苷酸多态性进行基因分型,分析这4个位点单核苷酸多态性与湖北汉族雄激素性脱发易感性的关系.结果 在显性模型、隐性模型和共显性模型下,2组rs6047844、rs1160312、rs9287638和rs7349332位点的基因型频率和等位基因频率比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 rs6047844、rs1160312、rs9287638和rs7349332位点的单核苷酸多态性与湖北汉族雄激素性脱发易感性无关.
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腺相关病毒AAV2/8-CaMKⅡα-ChR2-mCherry的组织学及通道功能鉴定
目的 对腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry在大鼠内侧前额叶谷氨酸能神经元中表达的组织学及通道功能予以鉴定.方法 以立体定位注射技术将腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry注射到SD雄性大鼠内侧前额叶,当病毒注射3～4周后,采用免疫荧光组织化学技术检测标记蛋白(mCherry)在谷氨酸能神经元(特异启动子CaMKIIα)的表达情况;利用在体细胞外记录技术观测谷氨酸能神经元所表达的通道蛋白(ChR2)对不同光刺激频率的电生理反应特性.结果 病毒成功注射到内侧前额叶并特异表达通道蛋白于谷氨酸能神经元的细胞膜上,表达成功率为(94.6±0.9)％;表达ChR2通道蛋白的谷氨酸能神经元对蓝光(470 nm,20 mW/mm2,5 ms波宽,5～80 Hz)产生稳定的光激活反应,并且对低频光刺激(5、10、20 Hz)的反应性优于高频光刺激(40 Hz和80 Hz;P ＜0.001).结论 腺相关病毒AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry能成功表达在谷氨酸能神经元的细胞膜上,对光刺激有频率选择性.
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应用光遗传学技术在体记录小鼠纹状体D1中型多棘神经元的活动模式
目的:建立光遗传-在体多通道光电极记录系统,用其对直接通路中型多棘神经元(D1-MSN)的活动模式进行在体记录.方法:首先向D1-Cre转基因小鼠纹状体背外侧注射携带光敏阳离子通道channelrhodopsin-2(ChR2)基因的腺相关病毒,使ChR2在D1-MSN上通过Cre重组酶的同源重组而特异性表达.之后通过光刺激和电生理记录相结合的方式在体记录D1-MSN的活动模式.结果:D1-Cre小鼠纹状体在注射病毒后通过荧光显微镜观察,可发现明显的荧光信号,证明病毒正常表达.通过光遗传-在体多通道光电极记录系统,本研究成功地在纹状体内用光刺激诱发了MSN的电活动.通过对记录的电信号进行数据分析,证明了光刺激诱发的电信号确实来自于D1-MSN,成功地对D1-MSN活动模式进行了在体记录.结论:结果提示光遗传-在体多通道光电极记录系统是一种对纹状体D1-MSN电活动模式记录的可选新方法.
