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核酸杂交的二次酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析
目的 建立一种超灵敏的用于核酸杂交分析的方法.方法 通过二次酶放大、PCR扩增、Tb螯合物和时间分辨测量技术,测定前列腺特异抗原(PSA)DNA.结果 靶PSA DNA测定的标准曲线线性范围大于两个数量级;灵敏度为10pmol/L(0.5fmol/孔);当靶PSA DNA为10、30和60pmol/L时,准确度和精密度分别为77%～95%和12.9%～15.3%.结论 本法是一种超灵敏的、简捷和快速的全新分析方法,有很好的应用前景.
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血清甲胎蛋白水平对肝硬化肝癌诊断价值的评价
目的检测血清肿瘤标志物甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)评价肝脏疾病的诊断价值.方法采用时间分辨荧光检测75例肝脏疾病患者的AFP和200例健康成人血清肿瘤标志物AFP、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)的水平.结果肝癌组血清AFP(541.3±580.6)U/ml比肝硬化组(9.53±11.09)U/ml明显升高(P＜0.01),而肝硬化组比健康人组低度升高.AFP佳工作点诊断肝癌敏感性和特异性分别为76.0%和88.3%.结论时间分辨荧光检测血清肿瘤标志物具有超敏感特性,增强AFP对肝癌的特异性、敏感性,有助于肝脏疾病的诊断和鉴别诊断.
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超敏感hAFP、CEA对消化系良恶性疾病诊断的评价
目的用时间分辨荧光检测血循环中肿瘤标志物评价消化系疾病的诊断价值.方法采用时间分辨荧光检测245例消化系良恶性疾病患者和200例健康成人血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)和甲胎蛋白(hAFP)的水平.结果消化系恶性肿瘤组血清CEA(79.57±224.5)比消化系良性疾病组(4.03±4.6)明显升高(P《0.01)增加20倍;良性疾病组比健康对照组(2.24±1.22)低度升高《2倍.亚组分析CEA对结直肠癌有较高的特异性和敏感性,分别为68.1%和60%.hAFP佳工作点诊断肝癌敏感性和特异性分别为76%和88%.肝癌病人hAFP明显升高(平均值》500 U/ml)比肝硬化组增加90倍,而肝硬化比健康人增加《6倍.结论时间分辨荧光检测血循环中的肿瘤标志物具有超敏感特性,增强hAFP和CEA对恶性肿瘤特别肝癌、结直肠癌的特异性、敏感性和阳性率,有助于消化系良恶性疾病的诊断和鉴别诊断.
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电化学发光法和酶联免疫法检测低水平HBsAg
目的 比较电化学发光免疫分析(electro-chemiluminescence immunoassay,ECLIA)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测低值乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的结果,为选择佳临床检测策略提供依据.方法 先以时间分辨免疫荧光(time resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)试剂盒进行血清标本HBsAg定量,再分别用ECLIA进口试剂盒、ELISA国产试剂盒做定性检测,并对结果进行统计分析.结果 在348例TRFIA法检测乙肝病毒表面抗原浓度介于(0.5 ～1.0)ng/ml的临床标本中,ECLIA和ELISA 2种方法检测HBsAg皆为阳性的有310例；电化学发光检测阳性有340例,ELISA检测阳性有312例,二者阳性符合率90.8％.对32例二者不符合的标本用时间分辨免疫荧光分析复查,ECLIA(+)ELISA(-)的30例TRFIA复检仍为阳性；ECLIA( -)ELISA(+)的2例TRFIA复检亦为阳性.ECLIA与ELISA在对低水平HBsAg的检出差异有统计学意义(x2=22.781,P＜0.01).结论 ECLIA比ELISA的特异性好和敏感度高.在临床诊治与检测低水平的乙肝病毒携带者建议用具有更高灵敏度和特异性的方法.
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FQ-PCR和TRFIA联合检测乙肝标志物的临床价值
目的：探讨乙肝标志物不同血清模式与HBV-DNA结果者之间的关系及临床意义。方法收集2014年6月~8月乙肝患者标本251例,采用时间分辨免疫方法(TRFIA)和实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)分别检测乙肝病毒血清标记物和病毒DNA,比较它们之间的关系。结果 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组79例,HBV DNA定量阳性共72例；HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组101例,HBV DNA定量阳性63例,HBV DNA定量阴性38例；HBcAb阳性,其余全阴组35例,HBV DNA定量阳性19例,HBV DNA定量阴性14例；五项全阴组36例, HBV DNA定量阴性36例。HBV DNA在HBcAb阳性组与HBcAb阴性组间相比,有显著的统计学差异(﹤0.05)。FQ-PCR法和TRFIA法诊断乙肝的敏感性分别为71.6%和100%,符合率为85.8%。结论 FQ-PCR法和TRFIA法在HBcAg阳性组有良好的相关性,两种方法分别检测乙肝病毒感染机体不同状态,它们之间能互为补充,不能相互替代。
