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Hsa-miR202文献资料
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Hsa-miR202通过下调IL-10的表达抑制肺癌A549细胞的增殖
目的：探讨Hsa-miR202（人微小非编码RNA-202）对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制。方法：将Hsa-miR-202序列与ppG/miR/eGFP/Blasitidin质粒定向连接，构建靶向Hsa-miR-202基因的真核表达载体pmiR-202，运用脂质体将pmiR-202转染至A549细胞，WST-8法检测细胞增殖率，RT-PCR检测IL-10、miR-202的相对表达水平，Western blot与ELISA检测IL-10蛋白的表达水平，构建荧光素酶报告基因载体验证miR-202与IL-10的相互结合作用。结果：经DNA测序证实与设计完全一致，测序结果显示成功构建了miR-202的真核表达载体（pmiR-202），pmiR-202对A549细胞的增殖抑制率（24、48、72 h）分别为12%、38%、52%，并具有时间效应关系，较空白对照组及阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；RT-PCR结果显示，转染pmiR-202后，miR-202的表达水平增加；过表达miR-202能下调IL-10基因及蛋白的相对表达水平，其相对水平分别为25%、0.75，IL-10活性的相对表达量为3.26±0.43 pg/mL，较空白对照组及阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）：荧光素酶活性结果显示，克隆IL-10-3'UTR的质粒与miR-202 mimics共转染293T细胞，引起荧光素活性的减低。结论：pmiR-202有效抑制A549细胞的增殖，并具有时间-效应关系，其机制可能是miR-202通过靶向结合IL-10的3'UTR从而下调其在A549细胞的表达有关。
关键词： Hsa-miR202 IL-10 肺癌 A549细胞 增殖
