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核桃青皮粗提物诱导KYSE150食管癌细胞周期阻滞及凋亡
目的:研究核桃青皮粗提物诱导KYSE150人食管癌细胞周期阻滞和凋亡的作用机制.方法:MTT方法检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞增殖的抑制效果,流式细胞仪检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blot检测核桃青皮粗提物引起的细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的变化.结果:MTT结果显示,核桃青皮粗提物对KYSE150细胞的增殖抑制呈时间和浓度依赖性,当核桃青皮粗提物浓度为100μg/mL时,在24 h,48 h和72 h对KYSE150细胞的增殖抑制率分别为(43.69±1.02)%,(88.73±1.32)%和(93.06±2.34)%;流式细胞术结果表明,核桃青皮粗提物诱导KYSE150细胞周期阻滞和凋亡;Western blot结果表明,核桃青皮粗提物通过上调p53,phospho-p53(p-p53)蛋白的表达,下调cyclinD1蛋白的表达,诱导KYSE150细胞周期阻滞在G0/G1期.另一方面,核桃青皮粗提物通过上调Bax蛋白,下调Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达,从而诱导细胞凋亡.当核桃青皮粗提物浓度为40μg/mL时,可上调p53,p-p53,Bax的表达量分别为对照组的(1.8±0.07),(23.6±0.12)和(1.5±0.02)倍,下调cyclinD1,Bcl-2和Caspase-3的表达量分别为对照组的(0.3±0.02),(0.03±0.005)和(0.1±0.01)倍.结论:核桃青皮粗提物可以引发KYSE150细胞周期阻滞在G0/G1期,并且可以通过线粒体途径诱导KYSE150细胞凋亡.
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miR-100对裸鼠食管鳞状细胞癌移植瘤生长的影响
目的 观察miR-100对裸鼠食管鳞状细胞癌(ESCC)移植瘤生长的影响.方法 将人ESCC细胞株Kyse150皮下注射裸鼠腋部,成瘤后将瘤块接种于21只裸鼠右侧腋下;待肿瘤体积增至200 mm3左右时,将裸鼠随机分为A、B、C组各7只,分别于瘤内注射50 μg/mL的miR-100-mimics、50 μg/mL的mimics-NC、转染剂100 μL,1次/d,连续21d.其间每隔1d测量并记录肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;实验结束后剥离肿瘤组织,称量肿瘤质量.结果 干预后第5～7天B、C组肿瘤快速生长,且随时间延长体积逐渐增大,与A组之间差异无统计学意义(P均＞0.05);而第9天后A组肿瘤生长受到抑制,肿瘤生长缓慢,几乎停滞,体积明显小于B、C组(P均＜0.05).干预后第21天,A组荷瘤裸鼠移植瘤质量为(0.115±0.087)g,明显低于B组的(0.370±0.361)g和C组的(0.289±0.472)g,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 miR-100可以抑制ESCC裸鼠皮下移植瘤的生长.
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壁虎活性组分抑制人食管癌KYSE150细胞增殖及迁移
目的 研究壁虎活性组分(GACs)对食管癌KYSE150细胞增殖、迁移能力的影响及其潜在的分子机制.方法 用不同浓度GACs(0、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5 mg·mL-1)处理KYSE150细胞24、48、72 h,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,根据MTT结果 ,分为正常组,低、中、高3个质量浓度(GACs:0.1,0.15,0.225 mg·mL-1)观察组.GACs作用于KYSE150细胞后,划痕实验观察其迁移能力的改变;免疫印迹法检测GACs对KYSE150细胞E-钙黏蛋白、波形蛋白表达的影响.结果GACs处理KYSE150细胞24、48、72 h后,IC50值分别为0.22、0.18、0.15 mg·mL-1;KYSE150细胞迁移能力减弱.GACs处理后的KYSE150细胞内E-钙黏蛋白表达上调,波形蛋白表达下调.结论 GACs可抑制KYSE150细胞增殖与迁移,其机制可能与E钙黏蛋白表达的上调,波形蛋白表达的下调有关.
