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Nestin蛋白作为一过性全脑缺血大鼠海马损伤早期敏感性标志物的研究
目的:研究大鼠一过性全脑缺血后Nestin蛋白在海马中早期表达的变化规律.方法:雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、手术对照组和损伤组.损伤组动物采用四管夹闭脑缺血模型,按照脑缺血术后时间不同再分为1、3、7、14和21日组.应用免疫组织化学法观察Nestin蛋白及GFAP蛋白阳性胶质细胞在海马内的变化规律、计数及形态学分析.结果:细胞计数显示,脑缺血后第1日Nestin蛋白阳性胶质细胞在海马中出现,缺血后第7日达到高峰之后降低并在缺血第14日时恢复至对照组水平;GFAP蛋白阳性细胞在缺血后第3日略有增加,第7日达到高峰之后下调.结论:Nestin蛋白是一过性全脑缺血后大鼠海马损伤的早期敏感性分子标志物.
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骨髓间充质干细胞与胶质瘤细胞非接触共培养后相关生物学特性分析
目的 在体外通过大鼠胶质瘤C6细胞与大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)非接触共培养,以探明BMSCs是否受到肿瘤微环境的作用获得肿瘤细胞的相关生物学特性.方法 通过6孔板结合Transwell小室建立BMSCs和C6胶质瘤细胞的共培养体系,以共培养组为实验组,设单独培养的BMSCs为对照组;相差显微镜下观察培养后2组细胞形态学的改变;核干细胞因子(nucleostemin,NS)检测细胞增殖力的变化;荧光定量PCR和Western blot检测细胞中mdm2、p53 mRNA水平及其蛋白的变化;免疫荧光法检测神经胶质细胞特异的胶质纤维酸蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)在细胞中的定位及表达.结果 共培养后实验组细胞呈现类似胶质瘤细胞样的形态,表达神经胶质细胞特异的GFAP蛋白;NS蛋白反映的细胞增殖能力未发生改变;共培养后实验组p53 mRNA水平明显低于对照组(P<0.01),而p53蛋白的表达水平显著高于对照组[(1.63±0.31) vs (0.85±0.12), P<0.05];实验组mdm2 mRNA及其蛋白的表达水平均明显高于对照组(P<0.05).结论 肿瘤微环境可能会使大鼠骨髓间充质干细胞获得肿瘤细胞的相关生物学特性.
