您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
Ccd1基因文献资料
-
GST-Ccd1融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备
目的:利用大肠杆菌DH5a表达GST-Ccd1融合蛋白,并用亲和层析分离纯化,进行动物免疫制备多克隆抗体.方法:利用本室构建好的pGEX-5X-1-Ccd1-N原核表达重组质粒,转化大肠杆菌DH5a,经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达.经谷胱甘肽Sepllarose 4B介质填充的层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫动物,得到Ccd1的兔源多克隆抗体.结果:ELISA结果显示血清抗体效价可以达到1:40 000.免疫组化分析表明自制的抗体能特异性与Ccd1蛋白相互作用,可以用于实验分析.结论:制备了效价高特异性良好的抗Ccd1多克隆抗体.经实验验证获得的抗体能够满足针时Ccd1的免疫印迹和免疫组化检测的实验要求,为今后深入研究Ccd1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有用的实验工具.
