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细胞外信号调节激酶在丹参单体IH764-3诱导肝星状细胞凋亡中的作用
目的:探讨丹参单体IH764-3对H2O2刺激的肝星状细胞(HSC8)增殖、凋亡等细胞行为的影响及细胞外信号调节激酶1(ERK1)在其中的调节作用.方法:应用体外细胞培养技术,采用直接细胞计数法、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定HSCs增殖；透射电镜、膜联蛋白(Annexin-V)/典化丙啶(PI)双标记流式细胞术测定HSCs凋亡；分别应用Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定ERK1蛋白及其mRNA的表达.结果:①H2O2具有刺激HSCs增殖的作用；②丹参单体IH764-3剂量依赖性抑制H2O2刺激的HSCs增殖；③Annexin-V/PI检测显示,10 mg/L,20 mg/L,30 mg/L及40 mg/L IH764-3干预48h后各组凋亡率分别为6.35％、9.28％、15.10％、19.69％,而H2O2组为2.30％;30 mg/L IH764-3干预HSCs不同时间(12 h、24h、48 h)的凋亡率分别是6.73％、10.34％、15.10％,呈时间依赖性；④丹参单体IH764-3干预组,HSCs的ERK1蛋白及其mRNA表达下调.结论:丹参单体IH764-3可以抑制HSCs增殖并诱导其凋亡；这种作用与其抑制ERK1蛋白和ERK1 mRNA表达有关.
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丹参有效单体IH764-3药理作用研究及其临床应用前景述评
丹参具有“活血化淤,养血宁心,宽胸止痛,安神除烦”等功效.现代药理研究发现丹参含有很多成分,主要有两大类:脂溶性的丹参酮类化合物和水溶性的丹参酚酸类化合物.丹参在临床上应用广泛,其药理学研究表明,丹参对泌尿系统、呼吸系统、消化系统、中枢神经系统等均有有益作用[1].丹参单体IH764-3是中国医学科学院血液病研究所从中药丹参中提取的一种单体(分子量158),它在保护肾脏、阻止肺纤维化、抑制胶原蛋白合成、沉积及抗肝纤维化、保护脑细胞、抗动脉粥样硬化及降压等方面有着显著的药理活性.作者就丹参单体IH764-3近年来药理学研究进展及其临床应用前景进行分析,为进一步开发和利用其药理活性提供理论依据.
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丹参单体IH764-3对血管平滑肌细胞细胞间黏附分子-1和核因子-κB的影响
目的研究丹参单体IH764-3对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的血管平滑肌细胞(SMC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达和核因子-κB(NF-κB)激活的影响,探讨丹参单体IH764-3对动脉粥样硬化(AS)的防治机制.方法体外培养大鼠血管SMC;用流式细胞仪检测血管SMC表面ICAM-1的表达量;免疫细胞化学方法检测血管SMC NF-κB p65的分布情况.结果 TNF-α能使血管SMC ICAM-1表达显著增加,丹参单体IH764-3可使TNF-α的这种作用明显减弱.免疫细胞化学染色显示,TNF-α促使SMC NF-κB向细胞核内转移,丹参单体IH764-3能部分阻止TNF-α诱导的 NF-κB核内转移.结论丹参单体IH764-3抗AS机制之一是通过抑制血管SMC ICAM-1表达,这种抑制作用是通过部分抑制NF-κB的核移位实现的.
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血瘀证实质和活血化瘀药物作用机理的研究
本文从炎症/免疫性炎症、微循环障碍、结缔组织代谢异常及纤维化形成、高粘滞血症等方面研究了血瘀证的实质,指出血管内皮细胞变化是病变的中心环节,认为气血关系与血瘀讧关系密切,活血化瘀以及益气活血中药调节机体气血平衡关系,其作用主要通过调节神经-内分泌-免疫功能来实现.本文对通脉灵及其有效单体(IH764-3)、虎桃(HT)冲剂抗纤维化及其作用机理进行了系列的研究.结果表明,通脉灵及IH764-3对大鼠肺动脉高压、炎症、肺纤维化有明显作用,IH764-3对丙二醛(MDA)升高有抑制作用,对中性粒细胞(PMN)质膜功能酶自由基损伤有保护作用,药物通过抗炎等作用间接达到抗纤维化的结果.HT冲剂预防和治疗组肺纤维化的病理变化有明显改善,肺组织中的ICAM-1,VCAM-1,LFA-1,MCP-1,GM-CSF和TNF-α表达水平明显低于模型组;总胶原,Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及其mRNA水平均明显降低.结果表明,HT冲剂对肺纤维化有明显的预防和治疗效果.
