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Notch胞内段文献资料
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表达小鼠Notch1胞内段基因慢病毒载体的构建及鉴定
目的 Notch信号通路在进化中高度保守,在细胞的生长和分化方面起重要作用.构建小鼠Notch胞内段(NICD)慢病毒载体,为Notch信号通路的研究奠定了基础.方法 从C57BL/6J小鼠脊髓组织提取总RNA,逆转录合成cDNA,用PCR方法获取NICD的基因序列,构建慢病毒表达NICD载体,感染HEK293T细胞,实时定量PCR和Western blot分析NICD基因在靶细胞的表达.结果NICD基因在靶细胞的表达水平升高.结论 成功构建表达小鼠NICD基因的慢病毒载体,为今后相关实验研究奠定了基础.
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激活Notch1信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响
目的探讨转染人Notch1受体胞内段（NICD）质粒激活Notch1信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法构建带免疫荧光的NICD质粒与对照质粒，细胞转染后荧光激发显微镜下观察转染效率，Real-time PCR检测靶基因Hes1表达水平变化；CCK-8法计算NICD质粒转染后胰腺癌细胞增殖的影响；caspase 3试剂盒检测NICD转染后凋亡通路关键酶caspase 3活性的变化。结果荧光激发显示NICD转染效率在60%~80%之间；NICD转染可促进靶基因Hes1表达，提示激活Notch1信号通路。NICD转染可显著促进胰腺癌细胞生长增殖；caspase 3活性在NICD转染后明显下降，差异均具有统计学意义。结论应用NICD质粒转染激活Notch1信号通路活性可通过抑制凋亡而促进胰腺癌细胞生长增殖。
