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  • 基因工程的下游技术

    作者:周思翔;华慧;王正荣

    基因工程的下游技术是现代生物技术的关键技术,它的重要性已越来越为人们所重视.生物技术产品的下游处理技术包括基因工程产物的分离、纯化及分析鉴定.本文综述了基因工程产物的分离、纯化及鉴定的具体方法及鉴定标准.

  • 肺腺癌组织中HSP70多肽复合物的分离及纯化

    作者:李杰;梁守沛;陆皓泉;孙鹏辉;王小龙;许东;姚武;周舫

    目的:探讨肺腺癌组织中HSP70多肽复合物分离及纯化的可行性方案.方法:采用裂解液裂解、超声破碎、ConA-sepharose亲和层析和DEAE阴离子交换层析方法,从肺腺癌组织中分离纯化HSP70蛋白复合物;通过SDS-PAGE电泳、Western blot检测获得蛋白;运用Bradford法对其进行定量分析.结果:通过该实验方法可以从1 g肺癌组织中获取110 μg左右的HSP70多肽复合物,其相对分子质量为70 000.结论:采用ConA-sepharose亲和层析和DEAE阴离子亲和层析相结合的蛋白纯化法可以获取高纯度的HSP70多肽复合物.

  • 人源细胞色素C在大肠杆菌中的重组表达和分离纯化

    作者:蔡华伟;万琳;杨浩;陈利弘;卢晓风

    细胞色素C在电子传递、缺氧应激和细胞凋亡的过程中起重要作用.通过人源细胞色素C和酵母细胞色素C亚铁血红素裂解酶共表达,从大肠杆菌中获得了可溶性的重组人源细胞色素C蛋白.细菌经过超声破碎后,获得的上清经350 g/L硫酸铵沉淀去除杂蛋白,再经过两次SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析,获得了纯度大约为80%的人源细胞色素C.每升菌可产出10 mg以上重组细胞色素C.人源细胞色素C的重组表达和纯化有助于细胞色素C功能的深入研究和应用.

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