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半夏凝集素基因文献资料
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四倍体菘蓝转抗虫基因研究Ⅱ.转半夏凝集素基因菘蓝的分子生物学检测
目的获得转基因菘蓝的分子生物学证据.方法对经卡那霉素筛选的抗性再生菘蓝苗进行聚合酶链式反应(PCR),Southern杂交和RT-PCR检测.结果PCR和Southern杂交检测结果表明,外源半夏凝集素基因已经整合到转基因菘蓝的基因组中,RT-PCR结果表明其DNA可以正常转录成mRNA.结论可以利用农杆菌介导的基因转化技术培育抗虫的菘蓝新品系.
关键词: 菘蓝 半夏凝集素基因 聚合酶链反应 Southern blot RT-PCR -
四倍体菘蓝转抗虫基因研究Ⅰ.根癌农杆菌介导的转基因菘蓝
目的将外源半夏凝集素基因(PTA)转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫抗性.方法构建了以CaMV 35S为启动子,新霉素磷酸转移酶(Npt-Ⅱ)为选择标记,带有半夏凝集素基因PTA的pCAMB I A2200植物双元表达载体,应用根癌农杆菌、EHA 105遗传转化四倍体菘蓝.结果菘蓝外植体植株再生率达到95%以上,转化率有10%.结论建立了以6-BA和NAA为主要激素组合的四倍体菘蓝离体分化再生系统和农杆菌介导的转化系统.