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复合酶提高黄柏水提效率的关键技术研究
目的 探讨提高黄柏水提工艺效率的方法.方法 在黄柏水提工艺程序中,加入纤维素酶-果胶酶-半纤维素酶组成的复合酶,按均匀试验设计考察5因素10水平,用SAS8.2统计分析,测定过滤速度及水提液的浸出物变化作指标,考察酶解工艺条件.结果 每克黄柏取相当于酶活力1万U的纤维素酶,0.5万U的果胶酶,0.1万U的半纤维素酶,调温度37 ℃,pH为3.9的酶解条件下得到的黄柏水提液,分离速度提高5.64倍,黄柏碱与小檗碱收率分别提高2.17、1.14倍.结论 应用复合酶可提高黄柏水提工艺的生产效率.
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正交试验优选甘草酸的复合酶法提取工艺
目的:优选复合酶法提取甘草酸的工艺条件.方法:在单因素试验基础上,以甘草酸提取率为指标,采用正交试验以酶解pH、酶解时间、酶的用量和酶解温度为考察因素优选酶解工艺;采用单因素试验考察浸提工艺中料液比、浸提次数、浸提时间、浸提液pH、浸提温度、乙醇体积分数、氨水体积分数对甘草酸提取率的影响;再采用正交试验以酶解温度、酶的用量、浸提时间、浸提液pH、浸提温度、乙醇体积分数、氨水体积分数为考察因素优选复合酶法提取工艺.结果:优选的提取工艺为40g甘草粉末加入250ml复合酶,40℃下进行酶解,在按料液比为1∶20(m/m)加入70％乙醇,溶剂中氨水的体积分数为0.6％,调pH为8,浸提1.5h,在45℃下浸提3次(溶剂体积比为5∶5∶4).在该工艺条件下,甘草酸提取率可达85.02％.结论:所选工艺操作简单、节约能源,且提取率高,可用于甘草酸的提取.
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酶解法与传统法提取三七剪口中三七三醇皂苷效果的对比
目的 以三七剪口提取液中人参皂苷Rg1、Re和三七皂苷R1的含量及转移率为指标,考察酶解渗漉法、传统渗漉法和酶解回流提取法的优劣.方法 通过采用三种方法得出的结果,进行有效物质提取量、物料使用量及提取时间的对比.结果 传统渗漉与酶解渗漉提取液中Rg1、Re、R1的含量及转移率相当,酶解回流法不能完全提取三七剪口中所含有的Rg1、Re、R1.结论 传统渗漉法与酶解渗漉法效果相当,但酶解法较传统渗漉工艺更节约时间和物料,节约乙醇用量的40％.
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半夏多糖提取工艺优化及其抗氧作用研究
目的:通过响应面法优化复合酶提取半夏多糖的工艺,并评价其抗氧化活性.方法:以半夏多糖得率为响应值,以液料比、酶解温度、酶解时间、复合酶(木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的质量比为2:2:1)添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,优化提取条件;体外抗氧化活性考察半夏多糖对DPPH和02-·自由基的清除能力.结果:通过二次回归模型响应面分析,酶解温度、时间、复合酶添加量、液料比4因素对半夏多糖得率的影响依次减弱;酶解温度与时间优化为54℃和57分钟,复合酶添加量为7.2 mg/mL,液料比例为27:1 mL/g,在此佳工艺条件下半夏多糖得率为27.98％,模型方程理论预测值为28.32％,两者相对误差小于5％.半夏多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和02-·自由基的半数抑制浓度分别为0.987 mg/mL、1.309 mg/mL,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱.结论:采用响应面法优化得到了半夏多糖的佳复合酶提取条件,且半夏多糖有一定的体外抗氧化作用.
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复合酶提取肉苁蓉多糖的工艺优化与动力学分析
目的 优化复合酶提取肉苁蓉多糖的佳工艺,研究酶解后肉苁蓉多糖的传质过程.方法 以酶用量、酶解温度、酶解时间为考察因素,肉苁蓉多糖提取率为考察指标,通过正交试验确定复合酶提取肉苁蓉多糖的佳工艺,对佳工艺条件下多糖得率随时间的动力学变化用Power law模型和Parabolic diffusion模型进行拟合.结果 复合酶提取肉苁蓉多糖的佳工艺条件为复合酶用量0.2％,酶解温度50℃,酶解时间1.5 h;肉苁蓉经复合酶辅助提取后,多糖提取率和扩散速率常数明显提高,提取特征常数、多糖扩散指数明显不同.结论 酶技术作为中药提取的一种新方法,应用于濒危药材肉苁蓉多糖的提取,具有较好的前景.
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复合溶葡萄球菌酶清除烧伤创面细菌效果的对照研究
目的：观察复合溶葡萄球菌酶清除烧伤创面常见耐药菌定植和感染的效果。方法选取2013年1月～2015年6月收治的120例烧伤患者，随机分为观察组和对照组，各60例。观察组用无菌纱布浸湿复合溶葡萄球菌酶后湿敷于创面，对照组用0．5％碘伏纱布湿敷，1次／d，连续使用，直至创面愈合。于换药前及换药后24、72 h取创面分泌物做细菌培养，进行细菌种类鉴定和菌落总数计数；换药前后进行不良反应观察，每例使用前及每隔1周后行肝、肾功能检查等，观察两组患者创面愈合时间及不良反应。结果两组患者创面细菌以MRSA、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌及大肠杆菌为主。换药前两组患者4种细菌载荷量测定均较高（＞105cfu／cm2），换药24、72h后，观察组菌落总数均降到40cfu／cm2以下，而对照组中MRSA、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌的菌落数量仍在103cfu／cm2以上，两组菌落总数有统计学差异（P＜0．05）。观察组创面愈合时间为（18．85±2．53）d，明显短于对照组[（24．01±2．16）d，P＜0．05]。两组肝、肾功能正常，均无不良反应。结论复合溶葡萄球菌酶具有较强的广谱杀菌能力，可以有效清除微生物，促进创面愈合，值得在烧伤慢性创面微生物定植和感染控制等方面推广使用。
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复合酶提取人参的高效液相色谱-电喷雾质谱研究
采用高效液相色谱法和电喷雾质谱联用技术并结合紫外光谱技术对复合酶提取的人参化学成分进行了分析,结果表明复合酶可提高人参的提取效率,提取物中人参皂苷Re、Rg1、Rg2、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rk3、Rh4的含量明显增多,并得到了常规提取方法中不能得到的Rk1、Rg5、20(S)-Rg3和20(R)-Rg3.复合酶法提取天然药物并结合高效液相色谱和电喷雾质谱联用技术进行即时分析具有高效,灵敏和直观的特点,以实现对人参中微量成分的检测,并可指导其他天然药物的研究.
