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MnSOD基因文献资料
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锰对肉鸡心肌细胞MnSOD基因转录调控机制的研究
目的 研究锰对内鸡心肌细胞MnSOD基因的转录调节.方法 将144只1日龄肉公鸡随机分为3组,分别饲喂不添加锰的基础饲粮(对照组)或添加100、200 mg/kg锰(试剂级硫酸锰)的饲粮组,饲喂21d.采用全谱直读型ICP发射光谱仪分析心肌锰含量;用RT-PCR技术分析心肌细胞MnSOD基因的mRNA水平;用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测转录因子Sp-1和AP-2的DNA结合活性.结果 心肌锰含量(P＜0.002)和MnSOD mRNA水平(P＜0.0001)随饲粮锰添加水平的升高而显著升高.心肌细胞转录因子Sp-1的DNA结合活性随饲粮锰添加水平的升高显著升高(P＜0.0001),而其AP-2的DNA结合活性则随饲粮锰添加水平的升高显著降低(P＜0.002).结论 锰可以调节控肉鸡心肌细胞MnSOD基因的转录.
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PCR-RFLP方法检测锰超氧化物歧化酶基因V(16)A多态性的实验条件研究
目的:确定PCR-RFLP技术检测锰超氧化物歧化酶基因(MnSOD)V(16)A多态性的适实验条件.方法:对影响MnSOD基因PCR反应以及用限制性内切酶BsawI切割主要因素进行了系统研究.结果:适退火温度为55℃;适引物浓度为0.25μmol/L;适Mg2+浓度为1.5 mmol/L;适dNTP浓度为0.20 mmol/L;以0.6 U为适Taq酶量.酶切体系为15μL体系中加8μL产物用2 U的酶消化,为后续研究奠定了实验基础.
关键词： 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 MnSOD基因 实验条件
