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几种典型介水传播病毒流行现状及检测技术研究进展
介水传播病毒给人类健康带来巨大威胁.水中病毒检测是控制和预防介水传播病毒危害的重要手段之一.本文从几种典型的介水传播病毒(诺如病毒、轮状病毒、肠道病毒71型和戊型肝炎病毒)入手,就其流行现状、水中病毒富集及检测技术等研究进展进行综述,为水中病毒检测和控制提供参考.
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水体中诺如病毒富集技术的研究
目的 评估不同实验条件下NanoCeram-PEG富集法对水中诺如病毒(NV)的富集效果,以获得较优的富集方法.方法 构建诺如病毒阳性标准质粒,以此为模板,应用荧光定量RT-PCR方法绘制病毒定量标准曲线;将含诺如病毒粪便悬液加入纯净水中,在不同实验条件下经富集操作,富集液经荧光定量RT-PCR方法进行绝对定量并计算终回收率,从而确定优富集方法.结果 通过病毒定量标准曲线确定荧光定量RT-PCR方法对水中诺如病毒的检测灵敏度为100 copy/μl.本实验通过正交设计方法考察了洗脱液pH值、洗脱速度和PEG浓度3个因素对终病毒回收率的影响,终确定在洗脱液流速为300 ml/min,洗脱液pH值为9.5,PEG6000浓度为13%的条件下病毒回收率高,达到26.55%.结论 证明NanoCeram-PEG富集法具有较好的病毒回收率,加以发展将为水源性诺如病毒疫情的溯源提供可靠的实验室依据.
关键词: 病毒富集 诺如病毒 回收率 NanoCeram滤器 -
水中诺如病毒富集及定量检测研究
目的 评估MCE-PEG富集法(混合硝酸纤维素膜第一次富集和PEG沉淀第二次富集)对水中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供有效的实验室检测方法.方法 把含有诺如病毒的粪便加入纯净水中,用MCE-PEG方法富集后,荧光PCR绝对定量检测富集前后水的病毒浓度,评估该方法的病毒回收率.同时梯度稀释粪便悬液,分别加入纯净水中,评估该方法的灵敏度.结果 经过混合硝酸纤维素膜第一次富集后待滤水被浓缩100倍,病毒平均回收率为56.12%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为10拷贝/μl.PEG沉淀第二次富集后,浓缩倍数为1000倍,病毒平均回收率为42.47%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为1拷贝/μl.结论 MCE-PEG富集法操作简单、材料价格实惠、易于购买、病毒回收率及灵敏度较高,可望进一步优化后广泛应用于不同水中病毒富集浓缩检测,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供了有效的实验室检测方法.