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二溴乙腈致人源性肝细胞的氧化应激作用
目的 研究二溴乙腈(dibromoacetonitrile,DBAN)对3种人源性肝细胞的氧化应激作用.方法 取处于对数生长期的人肝癌(HepG2)细胞、人正常肝(Chang Liver)细胞和人胚胎肝(L-02)细胞,分别暴露于含终浓度为0(对照)、0.5、1、5、10、20、50、100 μmol/L DBAN染毒溶液中孵育24h.检测细胞活性及细胞内活性氧(ROS)、总谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力.将稳定转染ARE荧光素酶报告基因质粒的HepG2细胞分别暴露于0(对照)、0.5、1、5、10 μmol/LDBAN染毒溶液孵育6h,测定抗氧化响应元件(ARE)报告基因活性.结果 与对照组比较,50、100μmol/LDBAN暴露组HepG2细胞及100 μmol/L DBAN暴露组Chang Liver细胞和L-02细胞的存活率均较低,而1、5μmol/LDBAN暴露组Chang Liver细胞的存活率均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着DBAN暴露浓度的升高,3种细胞的存活率均呈先上升后下降的趋势.与对照组比较,50、100 μmol/L DBAN暴露组HepG2细胞和L-02细胞及各浓度DBAN暴露组Chang Liver细胞内ROS的含量均较高,差异均有统计学意义(R0.05);随着DBAN暴露浓度的升高,3种细胞内ROS的含量均呈上升趋势.与对照组比较,10、20 μmol/L DBAN暴露组HepG2细胞和10 μmol/L DBAN暴露组Chang Liver细胞及各浓度DBAN暴露组L-02细胞内GSH的含量均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);随着DBAN暴露浓度的升高,3种细胞内GSH的含量呈先上升后下降趋势.与对照组比较,10、20 μmol/L DBAN暴露组HepG2细胞及20 μmol/L DBAN暴露组Chang Liver细胞内SOD活性均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05);而各浓度DBAN暴露组L-02细胞内的SOD活力均无明显改变;随着DBAN暴露浓度的升高,3种细胞内SOD的活性总体呈先上升后下降趋势.与对照组比较,5、10μmol/LDBAN暴露组HepG2-ARE报告基因活性均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);随着DBAN暴露浓度的升高,HepG2-ARE报告基因的活性均呈上升趋势.结论 DBAN可通过氧化应激对3种人源性肝细胞产生较强的细胞毒性;其中,Chang Liver细胞对DBAN毒性更为敏感.
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二溴乙腈对L5178Y细胞的遗传毒性及促凋亡作用
目的:研究饮用水中消毒副产物二溴乙腈对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞的遗传毒性及促凋亡作用.方法:以L5178Y细胞为靶细胞,采用胞质分裂阻滞微核组学法(CBMN-cyt)和流式细胞术(FCM)分别检测不同浓度(0.1、1、5和10 μmol/L)二溴乙腈对L5178Y细胞的遗传毒性及凋亡诱导作用.结果:与阴性对照比较,1和5μmol/L二溴乙腈染毒L5178Y细胞的微核率显著升高(P＜0.05);1和10 μmol/L二溴乙腈染毒L5178Y细胞的核质桥率显著升高(P＜0.05);10 μmol/L二溴乙腈染毒L5178Y细胞的核芽率升高(P＜0.05);5和10 μmol/L二溴乙腈染毒L5178Y细胞的核分裂指数率显著下降(P＜0.05).二溴乙腈各剂量组L5178Y细胞凋亡率均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P均＜0.05).结论:二溴乙腈可致L5178Y细胞遗传毒性并诱导其凋亡.
关键词： 二溴乙腈 遗传毒性 凋亡 胞质分裂阻滞微核组学 流式细胞术
