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一种改良的亚硫酸氢盐修饰微量DNA的甲基化分析方法
目的 建立一种改良的亚硫酸氢盐修饰微量DNA的甲基化分析方法.方法 应用低熔点琼脂糖包埋不同含量的DNA,进行亚硫酸氢盐修饰,通过MGMT基凶甲基化与非甲基化特异PCR的扩增,与传统的亚硫酸氢盐修饰法进行分析比较.结果 改良法对于低至15.625ng的DNA修饰均可获得MGMT基因甲基化扩增产物,而传统法对于62.5ng及其以下的DNA修饰难以获得MGMT基因甲基化扩增产物.结论 改良的亚硫酸氢盐修饰方法可有效提高甲基化特异PCR的灵敏度,该方法为微量DNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.
关键词： 亚硫酸氢盐修饰 微量DNA 甲基化特异PCR(MSP) -
大肠癌中生长抑素基因甲基化研究
目的 生长抑素( somatostatin,SST)不仅能抑制内分泌肿瘤的增殖,而且对消化系实体性肿瘤亦存在抑制作用.本研究旨在探讨生长抑素基因甲基化与大肠癌发生的关系.方法 采用甲基化特异PCR(MSP)方法在31对大肠癌标本及癌旁正常组织中检测SST基因启动子甲基化状态；用5-aza-dC处理结肠癌细胞系,RT-PCR方法检测SST基因转录水平.结果 MSP检测发现26例(84％)大肠癌标本及10例(32％)癌旁正常组织中SST基因呈甲基化状态.4个结肠癌细胞系中SST基因均为甲基化状态,并且SW1116细胞经5-aza-dC处理后SST基因表达复活.结论 SST基因甲基化与大肠癌发生相关,是大肠癌发生中的甲基化相关基因.
关键词： 大肠癌 生长抑素(SST) 甲基化 甲基化特异PCR(MSP) RT-PCR -
一种改良的亚硫酸氢盐修饰微量DNA的甲基化分析方法
目的 建立一种改良的亚硫酸氢盐修饰微量DNA的甲基化分析方法.方法 应用低熔点琼脂糖包埋不同含量的DNA进行亚硫酸氢盐修饰.通过MGMT基因甲基化与非甲基化特异PCR的扩增,与传统的亚硫酸氢盐修饰法进行分析比较.结果 改良法对于低至15.625ng的DNA修饰均可获得MGMT基因甲基化扩增产物,而传统法对于62.5ng及其以下的DNA修饰难以获得MGMT基因甲基化扩增产物.结论 改良的亚硫酸氢盐修饰方法可有效提高甲基化特异PCR的灵敏度,该方法为微量DNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.
关键词： 亚硫酸氢盐修饰 微量DNA 甲基化特异PCR(MSP)
