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念珠状链杆菌 Taqman MGB 荧光定量 PCR检测方法的建立与初步应用
目的：建立念珠状链杆菌的实时荧光定量PCR检测方法，实现该菌在多种实验动物中的快速检测。方法根据NCBI公布的念珠状链杆菌序列，设计特异性引物和探针，通过对24株标准参考菌株的扩增，验证其特异性、敏感性和重复性。运用所建立的方法对小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、长爪沙鼠和树鼩的共823份呼吸道样本进行检测。结果用所建Taqman MGB荧光定量PCR方法在小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔中未检出念珠状链杆菌；检出普通级长爪沙鼠和树鼩中念珠状链杆菌的阳性率分别为1．5％（1／65）和61．7％（37／60）。结论本研究所建立的念珠状链杆菌Taqman MGB荧光定量PCR检测方法，能够对实验动物中念珠状链杆菌进行快速准确的检测，敏感性优于国标方法，为实验动物质量检测体系的完善奠定了基础。
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应用16S rRNA基因序列分析与细菌生化反应鉴定膝关节脓液分离的念珠状链杆菌
目的：对我院一名患者左膝关节脓液中分离到的1株少见病原菌进行16S rRNA基因测序鉴定，探讨该方法在临床病原菌鉴定方面的意义。方法：采用16S rRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的Vitek 2全自动细菌鉴定药敏系统、API 20NE、API 20E与API 50CH系统的生化实验进行细菌的表型鉴定。结果：该菌在血平板和巧克力平板生长缓慢，麦康凯平板不生长；血平板上菌落形态呈1～2 mm“油煎蛋”圆形凸起，边缘光滑、半透明、湿润；镜下革兰染色阴性，呈链状排列，菌体1～3μm，呈圆形、卵圆形或梭形等；Vitek 2 GN-13、API 20NE、API 20E均为不能鉴定的细菌；16S rRNA基因序列分析的结果显示该菌与念珠状链杆菌的相似度为100％。结论：该膝关节脓液分离出的病原菌为念珠状链杆菌，16S rRNA基因序列分析能提供有力的遗传学证据，结合细菌的生化反应可准确地鉴定该菌。
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念珠状链杆菌引起鼠咬热1例
目的 通过对一株念珠状链杆菌及其引发的鼠咬热病例的回顾性分析,为临床微生物室和临床医生提供诊治经验.方法 病例回顾性分析:患者因被老鼠咬伤左手拇指引起发热就诊,入院后进行血培养,并用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州滨河微量生化管、梅里埃TM质谱仪和16SrRNA基因测序进行细菌鉴定.临床给予阿莫西林氟氯西林联合左氧氟沙星抗感染治疗12d.结果 血培养分离出革兰阴性呈链状、菌体有念珠状肿胀的L型细菌;该菌用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州滨河微量生化管、梅里埃TM质谱仪均无法鉴定;16sRNA基因测序结果显示该菌与念珠状链杆菌的相似度为100％;临床确诊为念珠状链杆菌型鼠咬热,用阿莫西林氟氯西林联合左氧氟沙星治疗有效.结论 念珠状链杆菌能引起人类鼠咬热,该菌用16sRNA基因测序能准确鉴定,常规细菌鉴定仪和质谱仪均难以鉴定.临床医生对于有鼠咬史的患者,血液中检出革兰阴性呈链状、菌体有念珠状肿胀的L型细菌时需考虑念珠状链杆菌引发鼠咬热的可能..
关键词： 念珠状链杆菌 鼠咬热 鼠 L型细菌 16sRNA基因测序
