首页 > 文献资料
-
罗格列酮对同型半胱氨酸诱导大鼠肾脏微血管内皮细胞MCP-1和ICAM-1表达的影响
目的了解同型半胱氨酸(Hcy)对肾脏微血管内皮细胞(RMECs)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响及罗格列酮的干预作用.方法将原代培养的大鼠RMECs分为空白对照组、Hey刺激组和罗格列酮干预组.分别采用免疫荧光法和酶联免疫吸附试验检测RMECs表达MCP-1、ICAM-1的能力.结果不同浓度的Hcy刺激后,ICAM-1的水平显著增加(P＜0.05),且呈时间和剂量依赖性,尤其在0.1 mmol/L Hey刺激24～48 h时达高蜂.罗格列酮干预后ICAM·1含量显著降低,且随罗格列酮浓度的增加其抑制作用更加明显;0.1 mmol/L的罗格列酮干预24h后,ICAM-1的水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);MCP-1荧光强度在罗格列酮干预后也减弱.结论罗格列酮能抑制Hcy诱导的RMECs表达MCP-1和ICAM-1.
-
肝素通过下调脂多糖诱导的NO和活性氧表达保护肾脏微血管内皮细胞
目的 观察肝素对脂多糖(LPS)刺激肾脏微血管内皮细胞(RMVECs)形态学改变及一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)表达的影响.方法 采用三步梯度筛网法原代培养大鼠RMVECs,取长势优异的3~4代细胞进行实验,并分为空白对照组、10 mg/L LPS处理组和2.5、5、10 kU/L肝素预处理组(LPS刺激前0.5 h给予相应剂量肝素干预).透射电镜下观察LPS刺激24 h细胞形态学改变;于LPS刺激5、15、30、45 min采用免疫荧光法检测RMVECs内ROS表达;采用硝酸还原酶法检测RMVECs内NO生成情况.结果 ① 空白对照组RMVECs细胞膜完整,细胞内线粒体和内质网清晰可见,核膜完整,核仁明显.LPS刺激24 h后,RMVECs细胞器空泡变性明显,以线粒体为主,且细胞膜产生大量微粒体.经10 kU/L肝素预处理后,细胞器空泡变性明显减轻,细胞膜形态稳定.② LPS刺激5 min即可在RMVECs细胞内检测到ROS表达和NO生成明显增加,并随时间延长逐渐增加,ROS表达30 min达峰值,NO生成45 min达峰值,与空白对照组同期比较差异均有统计学意义〔30 min ROS(平均荧光值):76.2±5.8比1.5±0.1,45 min NO(μmol/L):70.3±8.6比1.8±0.1,均P<0.01〕.随肝素剂量增加,预处理RMVECs后细胞内ROS表达及NO生成逐渐减少,以10 kU/L作用明显,与LPS处理组同期比较差异均有统计学意义〔30 min ROS(平均荧光值):16.8±1.7比76.2±5.8,45 min NO(μmol/L):11.8±8.6比70.3±8.6,均P<0.01〕.结论 肝素可通过下调LPS诱导的NO、ROS表达和稳定细胞形态发挥保护肾脏内皮细胞的作用,以10 kU/L作用明显.
