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老年2型糖尿病患者血清胆固醇酯脂肪酸检测
目的：探讨老年2型糖尿病（ diabetes mellitus， DM）患者血清胆固醇酯脂肪酸及相关生化指标变化情况。方法研究纳入2012年8月至12月北京医院老年体检志愿者145例（年龄≥60岁），包括确诊为2型DM患者（ DM组）73例和健康对照者（对照组）72名，抽取空腹静脉血。用液相色谱串联质谱法测定血清11种主要胆固醇酯脂肪酸，计算各脂肪酸脱氢酶及脂肪酸碳链延长酶活性；同时用自动生化分析仪测定空腹血糖（ fasting plasma glucose， FPG）、总胆固醇（total cholesterol， TC）、甘油三酯（triglyceride， TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol， HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（ low-density lipoprotein cholesterol， LDL-C）、载脂蛋白AI （ apolipoprotein AI， ApoAI）、载脂蛋白 B （apolipoprotein B， ApoB）、超敏C反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein， hsCRP）等生化指标，用独立样本t检验、非参数检验、 Logistic 回归等方法对数据进行分析。结果 DM组血清脂肪酸CE14∶0、 CE16∶1和CE22∶6显著低于对照组（P＜0.05），其他脂肪酸成分差异不具有统计学意义；与对照组相比， DM组Δ9-脂肪酸脱氢酶（Δ9-desaturase）活性显著降低（P＝0.001）； Logistic回归分析显示CE22∶6和Δ9-desaturase活性对预测DM患病风险具有统计学意义（P＜0.05）；校正年龄、性别、体重指数（body mass index， BMI）、 TC、 TG、 FPG 因素影响后，与 CE22∶6低四分位数（CE22∶6≤0.47％）相比，高四分位数（CE22∶6＞0.68％）患DM的比值比为0.27（95％CI：0.08～0.86， Wald值4.93， P＜0.05）；与Δ9-desaturase活性低四分位数（Δ9-desaturase活性≤0.12）相比，高四分位数（Δ9-desaturase活性＞0.17）患DM的比值比为0.06（95％CI：0.01～0.22， Wald值17.39， P ＜0.01）。 CE14∶0和 CE20∶3与 FPG呈显著负相关（r ＝-0.18、-0.17， P＜0.05）； CE18∶0与BMI、 TG呈显著正相关（ r＝0.25、0.24， P＜0.01），而与HDL-C和ApoAI呈显著负相关（ r＝-0.39、-0.35， P＜0.01）； CE20∶3与BMI的相关性强（ r＝0.42， P＜0.01）。结论老年2型DM患者血清部分胆固醇酯脂肪酸降低， CE22∶6和Δ9-desaturase可能对2型DM具有保护作用，平衡脂肪酸摄入对防治2型DM具有重要意义。
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内源性ω-3多不饱和脂肪酸对AKT/Ras小鼠肝癌细胞抑制作用
目的:探讨ω-3脂肪酸脱氢酶Fat-1基因对细胞脂肪酸谱的影响,并对AKT/Ras癌基因激活小鼠肝癌细胞的抑制作用. 方法:通过构建pLenti-CMV-Fat-1过表达慢病毒载体,使小鼠AKT/Ras肝癌细胞转染Fat-1基因,以pLenti-CMV-GTP空载体病毒作为对照,观察Fat-1基因对小鼠AKT/Ras肝癌细胞增殖及克隆形成率的影响.Westernblot检测癌基因信号通路p-AKT和p-Erk的表达情况,并检测两组细胞脂肪酸谱的改变情况. 结果:Fat-1基因可明显增加细胞ω-3/ω-6脂肪酸的比率,并抑制AKT/Ras癌基因信号通路,抑制肝癌细胞的增殖和克隆形成. 结论:Fat-1基因通过增加内源性ω-3多不饱和脂肪酸来抑制AKT/Ras肝癌细胞的增殖.
关键词： ω-3多不饱和脂肪酸 Fat-1基因 脂肪酸脱氢酶 肝癌 AKT/Ras信号通路 -
Mucor sp.EIM-10 C18-△~(15)脂肪酸脱氢酶启动子区域的克隆和功能鉴定
应用LA-PCR技术,扩增得到1 291 bp的Mucor sp.EIM-10△~(15)脂肪酸脱氢酶启动子区域的单一产物.对该产物测序,经序列比对分析,发现该序列具有真核启动子序列的基本结构特征,含有TATA盒、CAAT盒、GC盒等元件.根据本中心已构建的质粒PYD15PMCD15和质粒PYGFP,构建启动子功能鉴定阴性质粒PYMCD15,将扩增得到的△~(15)脂肪酸脱氢酶启动子区域序列连接到PYMCD15中,构建重组表达质粒PYMD15PMCD15,转化Saccharamyces cerevisiae尿嘧啶营养缺陷型INVScl.发酵诱导后GC/MS分析,结果表明△~(15)脂肪酸脱氢酶启动子区域能够启动Mucor sp.EIM-10A△~(15)脂肪酸脱氢酶基因的表达.
关键词： Mucor sp.EIM-10 脂肪酸脱氢酶 LA-PCR 启动子
