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恒河猴B病毒血清抗体流行病学调查
目的 摸清B病毒(BV)感染现状,从而有效降低BV在恒河猴群中的感染率.方法 采用ELISA方法对恒河猴血清进行抗体检测.结果 检测样品629份,其中350份呈BV抗体阳性,10份血清呈BV抗体可疑,其余血清为抗体阴性.结论 种猴(≥11周岁)BV感染率89%;青年猴(3～10周岁)BV感染率39.2%;幼龄猴(≤2周岁)BV感染率7.6%.随着年龄的增长,恒河猴群中BV感染率越高.
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B病毒PCR检测方法的建立
目的 建立B病毒核酸的PCR检测方法.方法 设计引物,用PCR方法扩增B病毒,并验证其灵敏性和特异性.结果 引物P1、P2及P3、P4在以B病毒为模板时有特定大小的目的 片段出现,在以其他病毒为模板时无目的 片段出现;引物P5、P6以B病毒和人单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSVI)为模板能扩增出382bp的产物,经SacⅡ酶切后,B病毒产生176bp和206bD的两个片段,HSVI无变化.结论 通过PCR方法成功的区分开B病毒,并且鉴定区分了B病毒和HSVI.
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三种不同抗原对猴B病毒抗体检测结果的比较研究
采用HSV1抗原片、BV抗原片以及BV DIA dot试剂盒对我区灵长类实验动物进行BV抗体检查.结果表明:用HSV1抗原片检测为阳性猴的阳性率与BV抗原片以及BV DIA dot检测为阳性猴的阳性率之间差异极显著(P＜0.01);后两者之间阳性率差异不显著.用HSV1抗原片、Bv抗原片以及BV DIA dot检测为阴性的猴,分别饲养2、4、6个月后,用同一种抗原复检,结果HSV1检测为阴性猴的阳转率与后两者的阳转率之间的差异极显著(P＜0.01).自1999年8月至今,经BV抗原片检测为阴性的猴出口至美国、荷兰、日本、德国等国家累计1389只,均符合客户要求.
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BV EIA、BV ELISA在检测食蟹猴BV抗体中的比较研究
本中心待出口美国、德国的534份食蟹猴血清用国产BV EIA抗原检测片检测后送美国BioReilance公司进行检测.534份血清中,11分为阳性,5份为可疑,518份为阴性.经美国复检514为阴性,8份为可疑,12份呈阳性.两者的检测符合率达95.9%,说明BV EIA检测准确度已达到国际检测水平,可为国内猕猴生产单位控制BV检测质量提供有力的技术保证.
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猴B病毒检测技术研究与应用进展
B病毒是一种人畜共患病原,自然宿主是猕猴.猴感染B病毒后只引起局部或无症状感染,类似于人感染单纯疱疹病毒,而人感染后则会导致脑炎、脑脊髓炎,严重时致呼吸麻痹死亡[1].
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马来西亚食蟹猴B病毒相关抗体检查
引种过程中应选用年龄较小者.
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自繁幼猴感染B病毒的情况调查
目的调查昆明亚灵生物科技有限公司室外猴场食蟹猴和恒河猴群B病毒(猴疱疹病毒Ⅰ型)的抗体情况,以了解B病毒在母猴和幼猴之间的传播.方法对繁殖年龄的雌性和雄性猴血清B病毒抗体进行检测,按照血清抗体B病毒阳性和阴性分开饲养,建立繁殖群.对出生1岁以上的幼猴进行血清病毒抗体检测.结果 检测的137份B病毒阴性群自繁幼猴血清中,没有B病毒抗体呈阳性,阳性率为0％；检测的426份B病毒阳性群自繁幼猴血清中,有27份B病毒抗体呈阳性,阳性率为6.3％.
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两种方法检测猕猴B病毒抗体的初步探讨
用BV DIAdot Kit 和BV EIA抗原片对本中心100份经HSV-1抗原片检测为阳性,150份HSV-1抗体阴性的食蟹猴血清进行B病毒抗体检测.结果发现, BV DIAdot Kit对150份阴性血清的阳性检测出率为8.7%,而BV EIA 的阳性检测率为18.0%,二者的符合率 90.7%.后者阳性检测率明显高于前者.用上述两种方法对100份HSV-1抗体阳性血清 (+～++)进行检测发现,BV DIAdot Kit和BV EIA的阳性检出率均为100%.后者价格低廉且对HSV-1抗体阴性血清的阳性检出率较高,值得在国内猕猴生产和出口单位大力推广.
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免疫印迹技术在B病毒与单纯疱疹病毒鉴别中的应用
目的从免疫学的角度对分离的B病毒147株与单纯疱疹病毒在蛋白多肽水平上进行分析.方法利用Western blot 技术对新分离的B病毒147株及单纯疱疹病毒感染的细胞多肽进行分析.结果得到了八条含有B病毒特异抗原表位的多肽.结论该方法可以明确区别BV和HSV-1、HSV-2,并为寻找特异抗原进行表达奠定了基础.
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B病毒抗原片在猕猴B病毒抗体检测中的应用
目的建立B病毒玻片免疫酶法(BVEIA).方法与HSV-1玻片免疫酶法(HSV-1 EIA)及美国生产的B病毒DIA dot(BV DIA dot)试剂盒进行比较.结果 BV EIA法的阳性检出率比HSV-1 EIA法提高18.10%,比BV DIA dot法提高7.90%,达到国外同类产品的水平.结论建议在临床上推广应用B病毒抗原片.
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人工驯养条件下食蟹猴B病毒抗体水平变化规律研究
目的 研究人工驯养条件下食蟹猴B病毒抗体水平变化规律,便于有效控制自繁食蟹猴的BV感染率.方法 随机选取409只对不同月龄自繁食蟹猴,采用BV ELISA法进行BV抗体监测.结果 新生仔猴刚出生时均携带不同程度的BV抗体,但随着月龄的增加,BV抗体水平开始下降,至5月龄时BV抗体阳性率降至低(12.3%),之后BV抗体水平逐渐升高.结论 人工驯养条件下食蟹猴B病毒抗体水平呈由高到低再升高的趋势,5月龄时断奶可大限度地获得BV抗体阴性猴.
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B病毒感染的预防和治疗方法
B病毒是一种P4级传染性病原, 能引起人脑脊髓炎, 其天然宿主为猕猴, B病毒侵染猕猴后无症状或症状轻微, 但它却能致人死亡.人被B病毒感染途径主要包括被动物咬伤、抓伤或被B病毒污染过的材料感染,人被BV感染后,若及时采取预防和治疗措施能提高生存机率.本文综述BV预防和治疗方法.
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猕猴血清B病毒抗体三种检测方法的比较
目的 对B病毒(B virus)抗体检测的3种方法进行比较,寻求准确、可靠、经济的检疫方法.方法 对以HSV-1为抗原的玻片酶免疫法、B病毒为抗原的玻片酶法(EIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)的猕猴血清B病毒抗体检测结果进行比较.结果 HSV-1为抗原的EIA与B病毒为抗原的EIA、ELISA检测结果符合率分别为97.7%和95.5%.结论 HSV-1为抗原EIA的检测结果与B病毒抗原EIA和ELISA的检测结果一致性较好,可以做为初筛手段,且检测效果较好,投入资金相对低,达到节约成本的目的.
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关于现行《国标》两个问题的思考
大群饲养的实验用猴，B病毒抗体阳性率高达60％～70％。现行《实验动物国家标准》规定，B病毒为普通级实验猴必检项目，并且要求“被测猴血清中的BV抗体”为阴性。作为国家标准，如果脱离了该国行业的实情，那就要权衡修订。实验动物饲料硬度／松脆度没能作为一个指标被列入《国标》，而这个指标可以大大影响了实验动物饲料的摄入和受试动物的生理状况。建议将该指标吸纳进《国标》，进行通盘考量。
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B病毒糖蛋白的原核表达及ELISA检测方法的建立
目的 表达B病毒糖蛋白,筛选出具有较好检测敏感性和特异性的抗原或抗原组合,用以检测猴血清中的抗体.方法 原核表达B病毒糖蛋白C,D和G,经纯化、复性后用蛋白印记验证其抗原性,建立ELISA法,对方法进行评价.结果 3个表达抗原反应特异性较好; 以BV-ELISA为标准,各抗原的检测敏感性分别是: BVgC-ELISA 84.6%,BVgD-ELISA 88.5%,BVgC+gD-ELISA 96.2%, 检测特异性分别是: BVgC-ELISA 93%, BVgD-ELISA 85.7%, BVgC+gD-ELISA 64.3%.结论 表达的3个BV重组抗原都具备作为替代抗原检测BV抗体的潜力.
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实验猕猴B病毒抗体检测结果分析
目的 研究实验猕猴B病毒抗体阳性情况.方法 选取安徽省实验猕猴中心400只猕猴,各采集静脉血5 mL, 3000 r/min离心10 min后,抽取上层血清,采用酶联免疫吸附试验与免疫酶试验检测血清B病毒抗体,观察B病毒抗体阳性率.结果 400份有效样本中,B病毒抗体阳性率为36.50%;雌性猕猴B病毒抗体阳性率为36.74%,雄性为为36.22%,两者差异无统计学意义(χ2=0.012,P=0.913).幼年猕猴B病毒抗体阳性率为30.68%,青年猕猴B病毒抗体阳性率为32.34%,成年猕猴B病毒抗体阳性率为66.67%,差异有统计学意义(χ2=26.200,P=0.000).结论 实验猕猴B病毒抗体阳性率处于较高水平,雌性猕猴B病毒抗体阳性率高于雄性猕猴,成年猕猴B病毒抗体阳性率较高.因此,需加强实验猕猴的管理,以减少B病毒感染,生产出安全性更高的实验猕猴.
