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地西他滨体外对小鼠急性粒-单核白血病细胞WEHI-3的抗肿瘤作用及机制探讨
目的 探讨去甲基化药物地西他滨对于小鼠急性粒-单核白血病细胞WEHI-3的凋亡、细胞周期的影响及其作用机制.方法 急性粒-单核白血病细胞(WEHI-3)采用小剂量地西他滨0.25μmol/L连续体外处理3d.采用瑞氏吉姆萨染色法观察细胞形态变化,AnnexinV-PI法检测WEHI-3不同时间的凋亡情况,流式细胞术检测细胞周期变化情况,Q-PCR检测处理前后mRNA的表达情况.结果 地西他滨处理后,WEHI-3细胞体积明显增大,胞质增多,形态不规则,染色质浓缩、边缘化;PBS处理的WEHI-3细胞G1期占39.64％,S期占49.43％,G2期占8.74％,地西他滨处理后WEHI-3细胞G1期增加至78.02％,S期减少至15.86％,G2期减少至2.91％,可见地西他滨处理后WEHI-3被阻滞于G1期;经地西他滨处理后WEHI-3细胞中MMD、TSG101、TAF7L、CITED2 mRNA表达水平显著提高(P均＜0.01).结论 地西他滨可上调MMD、CITED2、TAF7L、TSG101基因表达,诱导小鼠急性粒-单核白血病WEHI-3细胞凋亡、细胞周期阻滞.
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CITED2基因SGJ序列插入突变与先天性心脏病发病
目的 分析先天性心脏病 (congenital heart defects, CHD) 患者的CITED2基因编码链基因突变的情况.方法 收集101例散发型CHD患者和104例正常健康新生儿血液进行DNA抽提、PCR扩增,应用变性高效液相色谱仪进行CITED2基因全部编码序列的突变检测,对有异常峰型的DNA进行直接测序,并与GeneBank进行比较.结果 首次在动脉导管未闭的患者发现CITED2基因的一种新的插入突变,在CITED2基因编码链碱基483位起始处插入一个重复9肽(c483_484ins27),导致蛋白的丝氨酸-甘氨酸富含区(SGJ)插入9个氨基酸p.Ser161-Gly162ins9.对照组中未检测到此突变.在CITED2基因的EP300结合基序未发现突变.结论 中国先心病患者中存在CITED2基因突变,新发现的CITED2基因的重复9肽插入突变c483_484ins27可能是导致动脉导管未闭发生的原因之一.
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多囊卵巢综合征CITED2基因表达变化的临床意义
目的:探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)与CITED2基因表达变化的相关性.方法:收集新疆维吾尔自治区人民医院北院2014年5月至2016年12月收治的PCOS患者114例,另取新疆维吾尔自治区人民医院北院正常月经周期的健康育龄期女性80例作为对照组.使用电化学发光法测定卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteotropic hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)及雌二醇(estradiol,E2)水平.稳态模型测定胰岛素分泌指数(homeostasis model assessmentβ,HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR).荧光定量PCR检测CITED2基因表达.结果:PCOS患者CITED2基因的2?△Ct值为0.146±0.032,对照组为0.097±0.022,两组间差异具有统计学意义(t=3.135,P=0.032).CITED2基因表达与PCOS患者FSH呈负相关(r=?0.216,P=0.041),与LH(r=0.382,P=0.022),T(r=0.394,P=0.016),E2(r=0.375,P=0.026),HOMA-β(r=0.351,P=0.031)和HOMA-IR(r=0.326,P=0.033)呈正相关.结论:PCOS患者CITED2基因高表达,这可能是PCOS患者性激素紊乱和胰岛素抵抗的主要影响因素.
