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正常成人肝细胞文献资料
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携带SV40T/HSV-tk基因永生化正常成人肝细胞的构建
目的 构建永生化正常成人肝细胞为生物型人工肝提供安全有效的人肝细胞源.方法 转染包装细胞,获得逆转录病毒；将该病毒感染正常成人肝细胞HL-7702；更昔洛韦毒性实验检测转染后肝细胞内HSV-tk基因；RT-PCR法检测转染后细胞内SV40T的mRNA；Western Blot法和免疫荧光染色检测转染后细胞内SV40T基因的蛋白表达.结果 更昔洛韦检测转染后的肝细胞存活良好,而转染前的肝细胞死亡.RT-PCR法显示转染后的肝细胞内存在SV40T mRNA；Western Blot 法和免疫荧光染色法显示转染后肝细胞内存在SV40T蛋白.结论 转染后的正常成人肝细胞中含有SV40T和HSV-tk基因,并表达相关蛋白.
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体外正常成人肝细胞分离培养的经验
目的为进一步研究病毒性肝炎免疫发病机制、临床治疗和疫苗研制提供接近自然状态的理想细胞模型.方法体外二步灌流法分离正常成人肝细胞并用1640培养液维持培养1个月以上.结果分离较多量正常成人肝细胞可在体外存活1个月以上.结论正常成人肝细胞可在体外被分离培养以供各种肝病基础和临床研究.
