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卵巢癌抗独特型单链抗体6B11scFv/hGM-CSF融合蛋白质的表达及活性测定
目的:为提高卵巢癌抗独特型抗体的免疫原性,构建表达6B11scFv/hGM-CSF融合蛋白质,并对其活性进行测定.方法:用DNA重组技术,将以前构建的6B11scFv-Linker-hGM-CSF融合基因克隆至pET16(a+)表达载体,表达可溶蛋白质.用ELISA分析技术和细胞增殖试验测定融合蛋白质的抗体和细胞因子活性.结果:融合蛋白质实现可溶表达,能与COC166-9单抗和小鼠抗人GM-CSF单抗特异结合,并能刺激GM-CSF依赖株增殖.结论:融合蛋白质保留了2种蛋白质的活性,为进一步研究其功能和临床应用提供基础.
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抗卵巢癌单链免疫毒素的载体构建及高效表达
目的:构建抗卵巢癌单链抗体183B2ScFv 与假单孢外毒素(peudononas exotoxin, PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白183B2ScFvPE38,为卵巢癌导向治疗打下基础.方法:采用基因工程技术,经过3次亚克隆,将编码单链抗体的基因及编码毒素的基因亚克隆至原核表达载体pET30a(+)上,并在IPTG的诱导下进行表达.采用直接ELISA及细胞杀伤对抗体及毒素部分的活性进行检查.结果:表达蛋白183B2ScFvPE38具有较好的抗体活性及毒素活性.结论:抗卵巢癌单链免疫毒素183B2ScFvPE38 具有良好的免疫学活性及生物学活性,可能有良好的应用前景.
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宫颈癌组织中Hpa与DEK基因表达的相关性研究
目的 研究DEK与Hpa基因在宫颈癌组织中的表达及二者的相关性.方法 采用免疫组织化学方法对宫颈癌石蜡标本45例、宫颈上皮内瘤样病变( CIN) 45例、正常宫颈组织10例进行Hpa及DEK基因检测.结果 (1)DEK在宫颈癌组织、CIN、正常宫颈组织中阳性表达率分别为88.9%、24.4%、10.0%.宫颈癌组织中DEK阳性表达率高于CIN组织和正常组织(x2=38.05,P<0.01;x2=5.77,P<0.05);Hpa基因在宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为75.6%、24.4%和10.0%,宫颈癌组织中Hpa阳性表达率高于CIN组织和正常组织(x2 =31.69,12.94,P<0.01).(2)在宫颈癌组织中DEK基因表达与Hpa基因表达呈正相关(r=0.617,P=0.001).结论 宫颈癌组织及CIN组织中DEK、Hpa的表达共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生和发展.
关键词: 宫颈肿瘤/代谢 肝素裂合酶/代谢 重组融合蛋白质类/代谢 -
肿瘤血管内皮标志物TEM8与肿瘤的研究进展
TEM8是肿瘤内皮标志物(TEMs)之一,TEM8在肿瘤血管和某些恶性肿瘤细胞中高表达,在正常组织的血管及正常组织中表达较少或者不表达,这种差异性的表达提示TEM8在肿瘤血管生成的过程中起着非常重要的作用.