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HPLC-TQ-MS/MS测定加味败藤浸膏中6种有效成分的血药浓度及其药动学研究
目的 建立HPLC-TQ-MS/MS分析方法同时测定大鼠血浆中的小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷,并用于研究大鼠口服加味败藤浸膏后的药动学.方法 色谱柱为Agilent Poroshell 120EC-C18柱(3.0 mm×100 mm,2.7 μm),流动相为0.05％甲酸-乙腈(含0.05％甲酸),按程序梯度洗脱.质谱检测方式为多反应离子监测(MRM),采用正、负离子模式切换及时间分段扫描方法.用于定量分析的离子反应分别为m/z 335.9→m/z 319.9(小檗碱,ESI+),m/z 639.1→m/z 160.9(大车前苷,ESI-),m/z 779.3→m/z 617.4(柴胡皂苷a,ESI-),m/z 356.0→m/z 192.0(延胡索乙素,ESI+),m/z 449.1→m/z 121.1(芍药苷,ESI-),m/z 456.1→m/z323.1(苦杏仁苷,ESI-),m/z 323.9→m/z 126.9(格列齐特,内标,ESI+)和m/z 321.9→m/z 170.1(格列齐特,内标,ESI-).大鼠单剂量口服加味败藤浸膏(3.1 g· kg-1)后眼底静脉丛取血,血浆经甲醇预处理后进入HPLC-TQ-MS/MS分析.用DAS统计软件计算加味败藤浸膏中活性成分的药动学参数.结果 经方法学考证,血浆中小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷的线性范围分别为0.59～ 292.50,0.68 ～ 168.75,6.05 ～1 512.50,0.68 ～ 337.50,6.70～1 675.00和5.60～1 400.00 ng·mL-1,定量限分别为0.59,0.68,6.05,0.68,6.70和5.60 ng·mL-1,精密度、回收率及稳定性均良好,符合生物样本的分析要求.结论 本实验所建HPLC-TQ-MS/MS分析方法灵敏、简便、可靠,适用于加味败藤浸膏的药动学研究.
关键词： 加味败藤浸膏 高效液相色谱-质谱联用 大鼠血浆 药动学 -
加味败藤浸膏对大鼠体内头孢克洛药动学的影响
目的 研究加味败藤浸膏对大鼠体内头孢克洛药动学的影响,探讨联合用药的合理性.方法 大鼠随机分为2组:头孢克洛单用组和头孢克洛+加味败藤浸膏联用组,头孢克洛剂量均为125 mg/kg.各组大鼠给药后于不同时间眼底静脉丛取血,血浆经甲醇预处理后进行HPLC-TQ-MS/MS分析.DAS统计软件计算头孢克洛的药动学参数,并对其药动学参数进行统计学分析.结果 单用组头孢克洛的主要药动学参数分别为:Cmax=(31.58±9.72)μg/mL,AUC=(37.48± 14.34)μg/(mL.h),t1/2=(0.94±0.10)h,Tmax=(0.50±0.16)h,C1=(3.95±2.12)L/(h·kg);联用组头孢克洛的主要药动学参数分别为:Gmax=(27.76±5.62)μg/mL,AUC=(35.53± 11.62)μg/(mL.h),t1/2=(1.35±0.20)h,Tmax=(0.83±0.13)h,C1=(3.69±1.13)L/h/kg.同时服用加味败藤浸膏时,大鼠体内头孢克洛的t1/2与Tmax显著性延长(P＜0.05).结论 加味败藤浸膏可延缓头孢克洛的消除速度,延长其体内持续作用时间,联合用药具有一定合理性.
