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  • 过表达α2,3-唾液酸转移酶基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响

    作者:梁文举;王勤;刘莹;孙尚国;崔红霞

    目的 研究过表达α 2,3-唾液酸转移酶(ST3GalⅢ)基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响.方法 构建ST3 GalⅢ慢病毒表达载体,转染MDA-MB-231细胞.将转染细胞分为空白组(未转染,Mock cells,M)、对照组(转染对照慢病毒,Parent cells,P)和实验组(转染慢病毒载体,ST3 GalⅢ,ST3).用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染后ST3 GalⅢmRNA及蛋白表达,流式细胞术分析转染后ST3GalⅢ催化形成下游产物唾液酸化Lewis抗原(SLeX)变化;用细胞黏附实验、Transwell小室检测MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响.结果 RT-PCR与Western bolt显示对照组和实验组中ST3GalⅢmRNA相对表达量分别为0.91 ±0.04,1.85 ±0.08;蛋白相对表达量分别为0.94±0.04,1.96±0.10;实验组mRNA和蛋白表达分别为对照组1.84倍和1.76倍(P<0.05);实验组细胞表面SLeX含量为92.86±4.41,为对照组的1.61倍,含量明显升高(P<0.05).细胞黏附检测结果表明,空白组、对照组和实验组的OD570nm分别为0.32 ±0.02,0.29±0.01和0.46±0.03;细胞侵袭能力结果表明,空白组、对照组和实验组的OD570 nm分别为0.93±0.02,0.81±0.01和1.46±0.13,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 过表达ST3 GalⅢ基因可提高MDA-MB-231细胞侵袭能力.

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