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薏苡仁脂干预MCF-7/DOX细胞中荧光药物动力学及部分耐药蛋白表达
本文从薏苡仁脂干预耐药乳腺癌细胞的荧光药物动力学以及对耐药基因和蛋白表达量的影响两方面着手,研究薏苡仁脂逆转乳腺癌细胞耐药的机制.首先通过建立稳定过表达荧光素酶的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DOXFlus,应用生物发光成像技术(bioluminescence imaging,BLI),实时监测细胞内ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白底物D-荧光素钾的外排动力学过程,检测薏苡仁脂干预前后D-荧光素钾的胞内动力学变化.结果表明,与空白组相比,薏苡仁脂明显减少MCF-7/DOXFluc对D-荧光素钾的外排,增加胞内累积量.此外,采用实时定量基因扩增荧光检测系统和蛋白免疫印迹技术,研究薏苡仁脂干预后MCF-7/DOXFluc中ABC转运子的基因及蛋白表达的变化.结果显示,薏苡仁脂处理后可下调MCF-7/DOXFluc细胞中P-糖蛋白(P-gp/ABCB1)、多药耐药相关蛋白1 (MRP1/ABCC1)以及乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2)等耐药基因和蛋白的表达.后将薏苡仁脂联合多柔比星对薏苡仁脂逆转乳腺癌耐药效果进行体外评价,结果证明薏苡仁脂可增强多柔比星抑制MCF-7/DOX细胞增殖的作用,其佳联合比例为薏苡仁脂∶多柔比星=25∶1.薏苡仁脂可以通过抑制ABC转运蛋白的外排功能和下调ABC转运蛋白在肿瘤细胞表达水平,双管齐下逆转化疗药物多柔比星的肿瘤多药耐药.
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薏苡仁脂调控凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Survivin增强胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的研究
目的 研究薏苡仁脂增强胰腺癌细胞系BXPC3对吉西他滨化疗敏感性的分子作用机制.方法 MTT法检测不同浓度薏苡仁脂与吉西他滨对BXPC3细胞系增殖活性的影响;Annexin V-FITC/PI双染料标记-流式细胞技术检测不同药物对BXPC3细胞系凋亡率;Western bolt技术检测不同药物处理对BXPC3细胞系Caspase-3、Bax、Bcl-2及Survivin蛋白表达影响.结果 薏苡仁脂可明显降低吉西他滨杀伤BXPC3细胞的IC50,增强吉西他滨诱导细胞凋亡作用,逆转吉西他滨诱导的Bcl-2、Survivin蛋白表达上调,提高Bax/Bcl-2比值.结论 薏苡仁脂可通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin表达,增强促凋亡蛋白Bax表达,增强胰腺癌细胞BXPC3对吉西他滨的化疗敏感性.
