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膝沟藻毒素Gonyautoxins的分离纯化
目的从微小亚历山大藻(Alexandrium mimutum Halim)Amtk 2中分离纯化膝沟藻毒素gonyautoxins. 方法用凝胶色谱、离子交换色谱等方法从人工培养的微小亚历山大藻Amtk 2酸酒精萃取物中分离纯化膝沟藻毒素.结果从100 L Amtk 2培养液中获得(6.74±0.31)×109个藻细胞,其酸酒精萃取物经凝胶色谱分离首次在国内得到膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3和GTX-2混合物(29.59±0.28) mg.从此混合物中取出4.06 mg经两次离子交换色谱纯化得到纯GTX-4(0.40±0.002) mg, GTX-1(5.95±0.03)×10-2 mg,GTX-3(6.92±0.05)×10-4 mg和GTX-2(0.11±0.005) mg.结论人工培养的微小亚历山大藻Amtk 2酸酒精萃取物通过凝胶色谱和两次离子交换色谱分离能够得到纯的膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3和GTX-2.
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从两株微小亚历山大藻中分离纯化膝沟藻毒素
目的从两株微小亚历山大藻(Alexandrium minutum Halim)中分离纯化膝沟藻毒素(Gonyautoxins).方法用胶滤层析、离子交换层析等方法从人工培养的两株微小亚历山大藻酸酒精萃取物中分离纯化膝沟藻毒素,再用HPLC法对毒素进行定性定量测定.结果从两株藻株培养液中均分离得到膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3,GTX-2,其中Amtk4藻株的毒素含量为Amtk2的近10倍.结论微小亚历山大藻Amtk4藻株适于制备膝沟藻毒素.
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高效毛细管电泳法测定膝沟藻毒素2和3
目的:建立膝沟藻毒素(gonyautoxin,GTX)2和3的毛细管电泳分析方法.用毛细管电泳法分析和定量GTX免疫原.方法:用磷酸氢二钠-柠檬酸为运行缓冲液的区带毛细管电泳紫外检测法,对GTX2和3进行检测.结果:GTX2在0.5～118.0 μmol/L,GTX3在0.5～39.0 μmol/L时,有良好的线性关系.GTX2低检测限为0.38 μmol/L,GTX3低检测限为0.36 μmol/L(S/N≥3).日内精密度为:GTX2是2.5%,GTX3是2.6%;日间精密度是:GTX2为5.6%,GTX3为6.3%.用该法定量GTX 2&3免疫原中GTX2的浓度为325.8±32.8 μmol/L,GTX3的浓度为287.6±15.1 μmol/L.结论:用磷酸氢二钠-柠檬酸为运行缓冲液的高效毛细管电泳法,可对GTX2&3相关样品进行快速而又灵敏的分析和定量.
