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重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的作用及辐射敏感性的影响
目的 探讨重组人053腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及其辐射增敏性.方法 利用四氮唑盐(MTT)比色法分析重组人p53腺病毒注射液、放射治疗以及两者联合应用对人淋巴瘤细胞Raji和Daudi的抑制作用;通过蛋白质的Western印迹分析法(Western blotting)分析淋巴瘤细胞内P53蛋白的表达;应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测淋巴瘤细胞内p53基因的mRNA表达.结果 MTT结果显示重组人053腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞具有一定的抑制作用,但抑制作用不显著,Raji及Daudi细胞大剂量的抑制率分别为27.5%±4.1%和28.1%±1.6%,也未见明显的辐射增敏效应.Western blotting和RT-PCR结果表明,外源性p53蛋白和p53基因的mRNA均有所表达,但未见高效表达和明显的辐射增敏性.结论 重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及辐射增敏性不显著.
关键词： 重组人p53腺病毒注射液 p53基因 人淋巴瘤细胞 放射治疗 -
昆虫抗菌肽对人淋巴瘤细胞杀伤作用及筛选
目的 筛选对人淋巴瘤细胞Daudi有抑制或杀伤作用的昆虫抗菌肽.方法 针刺感染大肠埃希菌以诱导昆虫(家蝇幼虫、成虫、蛹)产生抗菌肽,再经研磨、离心、层析等步骤提取其血淋巴中抗菌肽.将所提取的抗菌肽作用于肿瘤细胞Daudi,以流式细胞仪检测其作用效果.结果 3种抗菌肽对肿瘤细胞Daudi均有杀伤力,家蝇成虫的荧光吸收率为97.86%,幼虫为85.45%.以家蝇成虫的效果更为明显.结论 家蝇成虫抗菌肽可作为潜在的抗人淋巴肿瘤药物开发.
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难转染悬浮细胞 OCI -LY8慢病毒过表达稳定细胞株的构建
目的：探讨难转染悬浮细胞慢病毒过表达稳定细胞株的构建方法。方法选用人弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞株OCI-LY8为研究对象，分别用Fbw7基因的慢病毒原液、慢病毒浓缩液、慢病毒浓缩液加入终浓度为5μg/mL的1，5-二甲基-1，5-二氮十一亚甲基聚甲溴化物（polybrene）、慢病毒浓缩液加入终浓度为10μg/mL的polybrene 4种方式进行感染。因慢病毒载体含有绿色荧光蛋白报告基因，故通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光的数量及强度来评判上述4种方式的感染效率，并用Real-time PCR和Western blot进行验证。结果慢病毒原液的感染效率极低，仅在少许细胞中看到极微弱的荧光；慢病毒浓缩液的感染效率尚可，约有60％的细胞可以观察到微弱的荧光；慢病毒浓缩液中加入5μg/mL polybrene的感染效率较高，约90％的细胞可以观察到较强的荧光；慢病毒浓缩液中加入10μg/mL polybrene的感染效率极高，几乎全部细胞均可以观察到很强的荧光。结论慢病毒浓缩液中加入合适浓度的polybrene是感染DLBCL细胞株OCI-LY8较为有效的方法。慢病毒的感染效率与细胞的状态、感染复数、polybrene的浓度密切相关。
