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  • p185HER-2蛋白胞外区的表达及其结合肽的筛选

    作者:王清明;范国才;陈吉中;曾庆银;陈惠鹏

    目的:构建p185HER-2蛋白胞外区的原核表达载体,实现p185HER-2蛋白胞外区的表达.以纯化p185HER-2蛋白胞外区为靶,从噬菌体肽库中筛选其结合肽,用于肿瘤导向治疗.方法:从含有HER-2全长cDNA的质粒psv2-cerbB-2中克隆了人p185HER-2蛋白胞外区cDNA,将此cDNA克隆到pET-30a+表达载体中,构建p185蛋白胞外区的表达载体.表达的p185HER-2蛋白胞外区通过Zn2+螯合层析柱进行纯化.以纯化的p185HER-2蛋白胞外区为靶,通过淘洗方法进行噬菌体肽库筛选.结果与结论:构建了p185HER-2蛋白胞外区的原核表达载体,实现了p185HER-2蛋白胞外区的高表达.通过Zn2+螯合层析柱实现一步纯化,p185HER-2蛋白胞外区的纯度达到95%.从噬菌体随机环七肽库中找到了一组具有核心序列p185HER-2蛋白胞外区结合肽.这些p185HER-2蛋白胞外区结合肽有可能成为肿瘤治疗的新的候选分子.

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