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g3p文献资料
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人CD20胞外区与噬菌体pⅢ融合基因在E.coli中的可溶性表达
目的:克隆人CD20胞外区基因(cdw)和丝状噬菌体(M13K07 )G3蛋白N端结构域(pⅢN1)基因,并在大肠杆菌中进行高效融合表达.方法:利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD20胞外区基因和pⅢN1基因,然后将二者融合克隆入pTIG-Trx表达载体,在大肠杆菌中进行可溶性表达.结果:可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的约25%,表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体识别.结论:成功地表达并鉴定了人CD20胞外区蛋白,为利用噬菌体抗体库进行抗CD20抗体的筛选奠定了基础.
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人CD20跨膜区与g3pN端融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
目的:构建g3pN1-hCD20跨膜及胞外区基因表达载体,并在大肠杆菌中进行高效融合表达.方法:利用反转录PCR和PCR方法,分别从Daudi细胞和M13K07噬菌体中扩增hCD20基因和编码g3pN1蛋白Nl端的基因,并重组到pTIGTrx表达载体中,在大肠杆菌中融合表达.结果:表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体(mAb)识别.结论:成功地表达并鉴定了目的蛋白.
