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  • 人源化Fab段噬菌体抗体库的构建

    作者:张效云;董明纲;刘洁;常晓彤;侯丽娟;韩瑞;李彪英;宋桂芹

    目的 构建人源化Fab噬菌体抗体基因库.方法 利用反转录PCR和PCR技术从B细胞淋巴瘤患者外周血淋巴细胞中扩增人IgG抗体重链Fd基因及κ、λ轻链基因,将之克隆入噬菌体载体pComb3,构建人源性Fab噬菌体抗体库,并进行鉴定.结果 构建完成了库容量为6.0×108的噬菌体抗体库.结论 成功地构建了人源化噬菌体抗体库,为下一步抗CD20抗体的筛选和表达奠定了基础.

  • 人CD20跨膜区与g3pN端融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

    作者:张效云;孙志伟;俞炜源;程建贞

    目的:构建g3pN1-hCD20跨膜及胞外区基因表达载体,并在大肠杆菌中进行高效融合表达.方法:利用反转录PCR和PCR方法,分别从Daudi细胞和M13K07噬菌体中扩增hCD20基因和编码g3pN1蛋白Nl端的基因,并重组到pTIGTrx表达载体中,在大肠杆菌中融合表达.结果:表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体(mAb)识别.结论:成功地表达并鉴定了目的蛋白.

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