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肝部分切除术后Tmub1蛋白与securin蛋白的相互作用研究
目的 探讨肝部分切除术后Tmub1蛋白与securin蛋白的相互作用.方法 SD大鼠30只,随机分为肝切除术后0、24、48h组,每组10只.0h组行肝切除术后直接灌注肝脏并取原代肝细胞,后两组分别于术后24、48h灌注肝脏提取原代肝细胞.每组肝细胞中一部分行原代肝细胞培养,并通过免疫荧光及激光共聚焦实验检测Tmub1蛋白与securin蛋白的共定位情况;另外一部分肝细胞经裂解后提取蛋白,行免疫共沉淀及Western blotting检测Tmub 1/securin共沉淀蛋白的表达.结果 激光共聚焦实验结果显示,肝切除术后0h细胞核内几乎没有Tmub1和securin蛋白表达,术后24h及48h Tmub1与securin蛋白大量共定位于细胞核内;免疫共沉淀及Western blotting检测结果显示,术后0h Tmub1/securin蛋白条带较弱,术后24～48h明显增强(P＜0.01),但24h与48h之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Tmub1在正常肝细胞中几乎不与securin结合,但在肝切除术后从胞质进入细胞核,与securin蛋白相互结合,从而抑制肝细胞的增殖.
