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钠、钾离子对肌质网囊泡NADH氧化酶和伴生超氧自由基的调控
目的探讨Na+、K+浓度对骨骼肌肌质网囊泡氧化还原系统的调控作用及对Ca2+释放通道的影响. 方法提取肌质网囊泡,分别检测其在不同Na+、K+浓度下还原型辅酶Ⅰ(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)氧化初速率、超氧产率、[3H]-ryanodine结合率和Ca2+释放速率的变化. 结果高浓度的Na+、K+对肌质网 NADH的氧化初速率和伴生的超氧自由基产率均有抑制作用;在[3H]-ryanodine结合实验中,高浓度的Na+、K+也压抑了NADH诱导的受配体结合的升高;同样,在Ca2+释放动力学实验中,不同浓度的K+调控了由NADH诱导的Ca2+释放初速率. 结论骨骼肌肌质网膜上可能存在具有对Na+、K+浓度敏感并中介超氧自由基产生的NADH氧化还原系统,其参与调节Ca2+释放通道的活性.
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变形链球菌活性氧代谢的酶学基础
目的:观察不同培养条件下变形链球菌代谢产生活性氧的情况,研究变形链球菌活性氧代谢的酶学基础,探讨变形链球菌活性氧代谢产物对菌斑微生态的作用.方法:采用化学发光法检测变形链球菌培养液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;采用电子自旋捕捉法检测不同培养条件下变形链球菌产生活性氧的情况及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide reduced,NADH)对次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系和Fe++-H2O2体系产生活性氧的影响.结果:在生理盐水培养条件下,变形链球菌培养液中能检测到特征性的二甲基吡咯氮氧化物(dimethyl pyridine N-oxide,DMPO)-O2-·和DMPO-OH·的电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)信号;外源性糖使变形链球菌培养过程中产生的特征性ESR信号增强;美兰则使ESR信号消失;NADH使得次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系和Fe++-H2O2体系的ESR信号明显减弱甚至消失;在变形链球菌培养液中检测到SOD.结论:不同培养条件下变形链球菌代谢产生O2·和OH·的量不同,NADH氧化酶催化的反应可能是变形链球菌产生活性氧的主要来源.
