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SOX10基因在内耳发育中的作用
SOX10基因(性别决定区盒基因,SRY-box 10)是调控神经嵴发育的关键转录因子.人类SOX10基因突变会导致神经嵴性疾病,如以耳聋及色素异常为主要表型的Waardenburg综合征.近年来发现SOX10在内耳发育早期即广泛表达于耳板及耳囊,且其突变可导致不同程度内耳畸形.本文重点讨论SOX10基因在内耳发育时期的动态表达,及其在内耳发育中的重要作用.
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SOX10新突变致Waardenburg综合征Ⅱ型家系基因突变研究
目的 通过对Waardenburg综合征Ⅱ型(WSⅡ型)一家系临床分析和候选基因的突变检测,丰富了WSⅡ型的基因突变谱,并探讨WSⅡ型的分子遗传学特征.方法 问卷式采集1个WSⅡ型家系的临床资料,绘制家系图谱,签署知情同意书并获取先证者及一级亲属的血样.通过聚合酶链反应(Polymerase chainreaction,PCR)扩增SOX10、SNAI2、PAX3、MITF、EDNRB和EDN3候选基因编码区的所有外显子.相应扩增产物酶切后进行测序,利用Mutation Surveyor 4.0软件及分子生物学网站的信息分析数据.结果 根据患者及其母亲的临床表现和相关检查结果结合WSⅡ的诊断标准,为WSⅡ型;家系中SNAI2、PAX3、MITF、EDNRB和EDN3基因检测未发现突变;在家系先证者及母亲的SOX10基因的编码区发现了一个国内外尚未报道过的新突变SOX10(c.482delGTAGC),而在家系其他成员中均未发现此突变.结论 此次研究对WSⅡ型一家系进行临床分析和基因突变研究,所发现的SOX10(c.482delGTAGC)基因突变国内外尚未见报道,属新突变;不仅丰富了人类基因突变数据库,而且为Waardenburg综合征的病因学研究和临床研究提供了有利资料.
关键词： Waardenburg综合征Ⅱ型 SOX10基因 基因突变 -
散发性先天性巨结肠与SOX10基因多态性的关联性
目的:探讨先天性巨结肠(HD)患者SOX10基因多态性与HD发病风险的关系.方法:收集散发性HD患者外周血标本95例为病例组,同时选取健康无便秘史患者80例作为对照组.提取外周血DNA,采用PCR和直接测序法分析SOX10基因多态性在病例组和对照组的分布情况.结果:直接测序发现SOX10基因有4个单核苷酸多态性位点(SNP),这些位点在病例组和对照组中分布差异无统计学意义,关联分析未发现SOX10基因的4个SNP位点与HD的发病风险相关.结论:SOX10基因的4个SNPs位点与散发HD的发病风险没有显著相关性,SOX10基因可能不是散发性HD患者的易感基因.
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七例Waardenburg综合征患者基因突变分析
目的 对7例Waardenburg综合征患者的MITF、PAX3、SOX10和SNAI2基因进行突变分析,为该病的基因诊断提供分子遗传学依据.方法 应用Sanger测序检测MITF、PAX3、SOX10和SNAI2基因的全部外显子,并用Polyphen2预测非同义SNP对蛋白质功能的影响.结果 共检测到7个突变位点,分别为c.649-651delAGA(p.R217del)、c.72delG(p.G24fs)、c.185T＞C(p.M62T)、c.118C＞T(p.Q40X)、c.422T＞C(p.L141P)、c.640C＞T(p.R214X)和c.128G＞T(p.G43V).其中,MITF基因的c.649-651delAGA(p.R217del)和c.640C＞T(p.R214X)突变位点为已报道的,PAX3基因的c.72delG(p.G24fs)、c.185T＞C(p.M62T)、c.118C＞T(p.Q40X)、c.128G＞T(p.G43V)突变和SOX10基因c.422T＞C(p.L141P)突变为未见报道的新突变.非同义SNP c.185T＞C(p.M62T)、c.128G＞T(p.G43V)和c.422T＞C(p.L141P)均考虑为有害突变.结论 对Waardenburg综合征患者的基因突变分析结果丰富了Waardenburg综合征致病基因的突变谱,为明确病因提供了重要依据.
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Waardenburg综合征致病基因SOX10重组真核细胞表达质粒的构建、表达及意义
目的 通过构建基因SOX10及其突变体表达质粒初步研究其外源性表达和定位表达,为研究Waardenburg综合征(Waardenburg syndrome,WS)发病机制提供实验基础.方法 通过分子克隆技术双酶切pECE-SOX10和pCMV-Flag后连接构建SOX10基因重组真核细胞表达质粒pCMV-SOX10-Flag,以其为模板分别构建SOX10基因新发突变G37fs、G38fs和E248fs表达质粒,DNA测序鉴定.SOX10、G37fs、G38fs和E248fs表达质粒分别瞬时转染NIH3T3细胞,Western印迹和细胞免疫荧光分别检测和观察野生和突变SOX10蛋白在NIH3T3细胞中的外源性表达和定位表达.结果 SOX10及其突变体G37fs、G38fs和E248fs表达质粒经DNA测序鉴定序列正确,三者在NIH3T3细胞中正确表达,E248fs与SOX10仅在细胞核中分布,G37fs和G38fs在细胞质与细胞核中均有分布.结论 成功构建了SOX10基因及其突变体真核细胞表达质粒,突变对SOX10蛋白的亚细胞定位产生影响,为在体外实验进一步研究中国人SOX10基因突变致WS发病的分子机制奠定了实验基础.
关键词： Waardengurg综合征 SOX10基因 基因突变 体外实验 -
一个Waardenburg综合征Ⅱ型家系SOX10基因的突变分析
目的 对1例Waardenburg综合征Ⅱ型先证者及其家系成员进行SOX10基因的突变分析,探讨其可能的分子生物学致病原因.方法 抽提先证者及其家系成员的外周血基因组DNA,芯片捕获高通量测序方法对MITF、PAX3、SOX10、SNA12、END3和ENDRB基因的全部外显子及其侧翼序列进行检测.根据高通量测序结果,对先证者及其父母进行突变位点的Sanger测序验证分析.结果 Sanger测序结果显示先证者存在SOX10 c.127 C＞T(p.R43X)杂合突变,导致SOX10基因第43位编码精氨酸的密码子(CGA)突变为终止密码子(UGA),产生截短蛋白,影响蛋白质功能的正常发挥.经检索人类基因突变数据库,该突变为未报道过的新突变.患儿父母未检测到该突变.结论 先证者SOX10基因c.127C＞T(p.R43X)杂合突变可能是其分子生物学致病原因.
关键词： Waardenburg综合征Ⅱ型 SOX10基因 听力障碍
